一种mRNA快速提取试剂盒制造技术

一种mRNA快速提取试剂盒及其制备方法。所述试剂盒包括一套用于固、液相分离的分离装置；所述分离装置中至少包含一层纤维素固相载体；该试剂盒还包括下述所有成份：至少有一管为细胞或组织裂解液；至少有一管为生物素化Oligo(dT)探针；至少有一管为结合缓冲液；至少有一管为洗脱缓冲液。该试剂盒操作简便、快速、高效，适合用于生物样品中mRNA的分离提取。其主要特征在于分离装置中采用纤维素为固相载体，利用融合蛋白CBD-SA作为生物桥联剂，以生物特异性偶联法代替传统的物理吸附法和化学键合法活化纤维素固相载体，活化后的固相载体能够高效率的结合生物素化的试剂，可用于蛋白或核酸的分离。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种mRNA快速提取试剂盒及其制备方法，属于生物

技术介绍
mRNA为messenger RNA的简称,或称为信使RNA。mRNA由DNA经由转录而来，带着相应的遗传讯息，为下一步转译成蛋白质提供所需的讯息。目前，随着分子生物学的日益发展，从真核细胞或组织中高效提取完整的mRNA是cDNA文库构建、EST测序、Northern斑点杂交、微阵列基因表达分析及实施定量PCR等功能基因组应用的关键步骤。在哺乳动物中， 大量的RNA分子是以tRNA和核糖体RNA的形式存在，而mRNA仅占总RNA的1_5%。传统的mRNA提取包括两步；首先，采用Trizol等方法从细胞或组织中提取总 RNA,然后再利用Oligo (dT)纤维素柱纯化mRNA。因为mRNA末端含有多poly (A) +，当总RNA 流径Oligo (dT)纤维素时，在高盐缓冲液作用下，mRNA被特异的吸附在Oligo (dT)纤维素柱上，在低盐浓度或蒸馏水中，mRNA可被洗下，经过两次Oligo (dT)纤维素柱，可得到较纯的mRNA。这种方法的缺点是耗时长，引入酚、氯仿等有机试剂，由于RNA容易被降本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种mRNA快速提取试剂盒，其特征在于该试剂盒包括一套用于固、液相分离的分离装置，所述分离装置中至少包含一层纤维素固相载体；该试剂盒还包括下述所有成份：1）至少有一管为细胞或组织裂解液；2）至少有一管为生物素化Oligo(dT)探针；3）至少有一管为结合缓冲液；4）至少有一管为洗脱缓冲液。

【技术特征摘要】
1.一种mRNA快速提取试剂盒，其特征在于该试剂盒包括一套用于固、液相分离的分离装置，所述分离装置中至少包含一层纤维素固相载体；该试剂盒还包括下述所有成份 O至少有一管为细胞或组织裂解液； 2)至少有一管为生物素化Oligo(dT)探针； 3)至少有一管为结合缓冲液； 4)至少有一管为洗脱缓冲液。2.根据权利要求I所述的试剂盒，其特征在于所述的分离装置中的纤维素固相载体是表面被融合蛋白CBD-SA生物活化的固相基质，具体是利用融合蛋白CBD-SA作为生物桥联齐U，以生物特异性偶联法代替传统的物理吸附法和化学键合法，使纤维素固相载体活化，活化后能够高效率的...

【专利技术属性】
技术研发人员：高智慧，白钢，
申请(专利权)人：天津启仁医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：