一株降解纤维素的大肠埃希氏菌，本发明专利技术涉及一株大肠埃希氏菌。本发明专利技术提供了一株降解纤维素的大肠埃希氏菌，可产生纤维素酶，为纤维素降解提供微生物资源基础。本发明专利技术解纤维素的大肠埃希氏菌为大肠埃希氏菌J-019，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2012年5月21日，保藏号为CGMCC?No.6126。大肠埃希氏菌J-019能够产纤维素酶，可高效降解纤维素。用于纤维素的生物降解。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株大肠埃希氏菌。
技术介绍
作为农业大国，我国每年产生的农作物秸秆的量居全世界首位，但农作物秸秆等纤维素的利用率与发达国家仍有很大差距，所以纤维素资源的综合利用已经迫在眉睫。纤维素的利用前期处理是关键，前期处理方法主要有酸化法、碱化法、氧化法、物理法和生物法等方法。与其它方法相比，生物法处理纤维素具有绿色环保、方法简便、处理成本低等优点，应用前景广阔。
技术实现思路
本专利技术提供了一株降解纤维素的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，可在低温下降解纤维素，为纤维素降解提供微生物资源基础。本专利技术降解纤维素的大肠埃希氏菌为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)J-019，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2012年5月21日，保藏号为CGMCC No.6126；本发明大肠埃希氏菌J-019为革兰氏阴性菌，杆状，细胞大小为(0.3μm～0.4μm)×(1μm～3μm)，无芽孢，周身鞭毛，能运动；在肉汁胨培养基上培养，菌落呈圆形，颜色为乳白色(如图1所示)。本专利技术大肠埃希氏菌J-019接触酶试验呈阳性，氧化酶试验呈阴性，甲基红反应呈阳性，V-P反应呈阴性。本专利技术大肠埃希氏菌J-019可分解葡萄糖产酸，能够分解D-蜜二糖、甲基葡糖苷、糊精、D-棉子糖、L-鼠李糖、蔗糖、D-海藻糖、L-阿拉伯糖、D-果糖、D半乳糖和D-山梨醇。本专利技术的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)J-019通过16S rDNA序列比对分析，保守区相似性为99％，与埃希氏菌属(Escherichia)的16S rDNA序列的同源性最高，通过结合菌体形态特征、生长条件、生理生化鉴定结果确定大肠埃希氏菌J-019属于埃希氏菌属(Escherichia)。本专利技术大肠埃希氏菌J-019能够产纤维素酶，可在低温下降解纤维素。本专利技术的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)J-019属于埃希氏菌属(Escherichia)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2012年5月21日，保藏号为CGMCC No.6126。附图说明图1为本专利技术大肠埃希氏菌J-019的菌落形态照片；图2为具体实施方式二中大肠埃希氏菌J-019在刚果红纤维素鉴别培养基上生长的照片；图3为大肠埃希氏菌J-019随培养时间变化的产酶曲线图；图4为大肠埃希氏菌J-019随起始pH值变化的产酶曲线图；图5为大肠埃希氏菌J-019随培养基不同氮源变化的产酶曲线图；图6为大肠埃希氏菌J-019随接种量变化的产酶曲线图。具体实施方式本专利技术技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。具体实施方式一：本实施方式降解纤维素的大肠埃希氏菌为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)J-019，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2012年5月21日，保藏号为CGMCC No.6126。本实施方式大肠埃希氏菌(Escherichia coli)J-019为革兰氏阴性菌，杆状，细胞大小为(0.3μm～0.4μm)×(1μm～3μm)，无芽孢，周身鞭毛，能运动；在肉汁胨培养基上培养，菌落呈圆形，颜色为乳白色。参照《伯杰细菌鉴定手册》第八版和《常见细菌系统鉴定手册》对大肠埃希氏菌J-019进行生理生化鉴定：大肠埃希氏菌J-019接触酶试验呈阳性，氧化酶试验呈阴性，甲基红反应呈阳性，V-P反应呈阴性。大肠埃希氏菌J-019可分解葡萄糖产酸，能够分解D-蜜二糖、甲基葡糖苷、糊精、D-棉子糖、L-鼠李糖、蔗糖、D-海藻糖、L-阿拉伯糖、D-果糖、D半乳糖和D-山梨醇。本实施方式大肠埃希氏菌J-019可在肉汁胨培养基上生长，肉汁胨培养基由3g牛肉膏、0g蛋白胨、5g NaCl和1000mL蒸馏水组成，pH为7.2～7.4。具体实施方式二：本实施方式大肠埃希氏菌(Escherichia coli)J-019是由哈尔滨道里区太平镇农户养殖的牛粪中筛选得到。筛选按以下步骤进行：取5g牛粪，用无菌水稀释成10-1～10-9的各级浓度的稀释液，将装有初筛培养基的试管编号为1至9号，然后在每个试管中加入一张滤纸条(5×0.7cm或7×1em)，使滤纸条贴于试管内壁，滤纸条的一半进入试管中的初筛培养基中，一半暴露于空气中，然后将试管于121℃灭菌20-30min。用无菌移液管各吸取1mL各级浓度的稀释液对号接种到装有初筛培养基的试管中，于5℃培养至滤纸条上出现溃烂斑，选择滤纸溃烂程度高的试管，从溃烂处挑取菌落于分离培养基平板上进行划线培养，分离至得到纯化的单菌落，将得到的单菌落点种于刚果红纤维素鉴别培养基，培养48h，测量分解纤维素的透明圈直径大小，进行初筛，得到4株细菌菌株。将初筛得到的4株细菌菌株接入细菌液体发酵培养基中进行摇瓶培养，采用3，5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)分别测定4株菌株产纤维素酶的酶活，酶活分别为523U、422U、466U和407U，其中酶活最高的菌株即为大肠埃希氏菌J-019。所述初筛培养基由1g K2HPO4、0.1g FeCl3·5H2O、0.3g MgSO4·7H2O、0.1g CaCl2、0.1g NaCl、2.5g NaNO3和1000mL蒸馏水组成，pH为7.2～7.4。所述分离培养基平板由质量浓度为0.5％的CMC-Na、100mL营养盐和质量浓度为2％的琼脂组成，pH为7.2；其中所述营养盐由0.5g(NH4)H2PO4、2.5g MnSO4·H2O、2g K2HPO4、7.5mg FeSO4·7H2O、2g MgSO4、0.3g NaCl和1000mL自来水组成。所述刚果红纤维素鉴别培养基由0.5g K2HPO4、0.25g MgSO4、0.24g刚果红、14.00g琼脂、1.88g纤维素粉、2.00g明胶、100mL土壤浸汁和900mL蒸馏水组成，pH为7.0。刚果红纤维素鉴别培养基在配制前应对纤维素粉进行预处理，纤维素粉应加1mol/L的HCL溶液浸泡12h，然后蒸馏水洗多次至pH值中性，烘干。所述土壤浸汁的制备方法为：取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。所述细菌液体发酵培养基由0.3本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株降解纤维素的大肠埃希氏菌，其特征在于解纤维素的大肠埃希氏菌为大肠埃希氏菌(Escherichia？coli)J？019，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2012年5月21日，保藏号为CGMCC？No.6126。
【技术特征摘要】
1.一株降解纤维素的大肠埃希氏菌，其特征在于解纤维素的大肠埃希氏菌为大肠埃希
氏菌(Escherichia coli)J-019，保藏在中国微生物菌种保藏管理委...
【专利技术属性】
技术研发人员：张先成，孟利强，殷博，
申请(专利权)人：黑龙江省科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：
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