层析方法及为此使用的介质技术

技术编号:8389955 阅读:205 留言:0更新日期:2013-03-07 23:07
本发明专利技术涉及在介质上进行离子交换层析的方法,所述介质包含具有多孔内芯和外壳的壳式珠粒,其中内芯提供有其电荷随pH改变的配位体,壳提供有带电荷的离子交换配位体,所述方法包括以下步骤:a)使样品分子在第一pH吸附在壳配位体上;b)通过加入缓冲剂物质使内芯配位体在第二pH放电,所述缓冲剂物质能够增加它与芯配位体相同符号/类型的电荷,这同时导致离子从内芯配位体释放,从而导致增加离子强度,增加离子强度从壳配位体置换样品分子,即,产生洗脱。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利
本专利技术涉及新的离子交换介质及其用途。更准确地讲,本专利技术涉及在包含壳式珠粒(shell bead)的介质上进行离子交换层析的方法。介质包含在芯中其电荷随pH改变的配位体和在外壳中能够结合样品分子的离子交换配位体。背景在生物技术内,最近提出的层析方法基于与靶相互作用的不同模式。因此,例如,在离子交换层析中,官能团为与它们的相反电荷可交换反离子的持久结合的离子基团。生物分子的离子交换层析一般使用的层析介质用在珠粒中均匀分布的适合带电配位体取代。为了达到用于洗脱被吸附生物分子的盐梯度和/或pH梯度,用具有不同洗脱剂的两个泵得到梯度。最初,非排代流动相泵输送大部分(如果不是全部)流量通过层析介质,而排代流动相泵将很少(或甚至没有)流量输送通过层析介质。然后,连续或间歇改变各泵的流速,以得到适合洗脱被吸附化合物的梯度。因此,在很多情况下,为了洗脱被吸附的样品分子,希望比使用常规双泵装配用来产生盐梯度和/或pH梯度更简单的进行离子交换层析的方法。专利技术概述本专利技术提供进行离子交换层析的新原理,所述原理不依赖双泵装配来产生盐梯度和/或pH本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.09 SE 1050774-71. 一种在介质上进行离子交换层析的方法,所述介质包含具有多孔内芯和外壳的壳式珠粒,其中内芯提供有其电荷随pH改变的配位体,壳提供有带电荷的离子交换配位体,所述方法包括以下步骤:a)使样品分子在第一pH吸附在壳配位体上;b)通过加入缓冲剂物质使内芯配位体在第二pH放电,所述缓冲剂物质能够增加它与芯配位体相同符号/类型的电荷,这同时导致离子从内芯配位体释放,从而导致增加离子强度,增加离子强度从壳配位体置换样品分子,即,产生洗脱。
2. 权利要求1的方法,其中壳配位体为强离子交换配位体,例如-+N(CH3)3和所有类型的季铵配位体、非芳族和芳族-SO3–配位体。
3. 权利要求1至2的方法,其中官能化芯的电荷改变/pH单位为>30μmol/pHmL凝胶。
4. 前述权利要求中一项或多项的方法,其中壳配位体和芯配位体可具有相同或不同的电荷,并且选自任何类型的阳离子配位体,例如羧酸根(-COO-)、膦酸根或磷酸根(分别为-PO32-、-P(OH)O2-和-OP(OH)O2-、-OPO32-)、磺酸根或硫酸根(...

【专利技术属性】
技术研发人员:J贝格斯特伦BL约翰逊
申请(专利权)人:通用电气健康护理生物科学股份公司
类型:
国别省市:

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