靶向基因DNA分子探针的制备方法技术

技术编号:8384150 阅读:371 留言:0更新日期:2013-03-07 01:44
本发明专利技术公开了靶向基因DNA分子探针的制备方法,其将网路生物医学信息学和实验室分子生物学有机的结合起来,通过使用网路的或计算机的生物医学信息学工具,来确定人类基因组中疾病基因序列或正常基因序列,剔除其中的非特异的重复DNA片断,保留独特的和特异的疾病基因序列或者基因组特有的正常基因序列。整个DNA探针制作过程包括两大程序:第一程序是将基因的DNA序列确定并排除非特异性重复片段,第二程序是在第一程序的设计和指导下,应用实验室分子生物学的手段将此DNA探针实际地制造出来。本发明专利技术制造的探针可用于在福尔马林固定、石蜡包埋的组织和细胞切片以及细胞涂片的临床病理标本上进行以形态学为基础的原位杂交反应包括荧光原位杂交和非荧光的显色原位杂交,用于各级各类疾病基因的检测和诊断,还可用于正常人类基因和非人类基因的测定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学
,涉及将基于计算机的生物医学信息学和实验室分子生物学结合起来以制备靶向基因DNA分子探针的方法。
技术介绍
人类基因组测序工程于1990年正式启动,经过多个国家的数百名科学家和工程技术人员的共同努力,于2001年发表了初稿,并于2006年最后完成,历时十六年,耗资上百亿美元。这一工程的完工,将第一个也是最重要的一个哺乳动物,即我们人类自己的整个基因组的图谱展现在我们眼前,其中包括所有22对常染色体(1-22)和两个性染色体(X,Y)的DNA序列,共计大约32亿核苷酸碱基。同时揭示人类蛋白质编码的基因大约有二万至二万五千个,其核苷酸序列的总长度仅占整个基因组长度的1.9%。这些基因不均等地分散分布在基因组的各个角落,参见图I。此外,占基因组绝大部分的碱基是一些有序或无序的重复序列,有些重复序列具有明显的规律,比如,5-8个碱基循环出现构成到100-200个碱基的集团,然后这个集团又在不同的基因组中出现,由于此类DNA碱基可以在任意(无规律)基因组DNA中出现,如图2,因此,如果所制作的进行杂交的DNA分子探针中含有此类重复序列,则信号会在所有染色体基因或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种靶向基因DNA分子探针的制备方法,其特征在于:包括第一程序,其利用基于计算机的生物信息学手段来获得靶向基因的特异性DNA序列,并设计出相应PCR引物;第二程序,其根据第一程序的设计应用分子生物学手段来制造DNA分子探针;所述第一程序包括以下步骤:(1)在公共基因库上搜索到靶向基因的基因组位置,然后识别出该靶向基因的编码序列和非编码序列,剔除掉其中的非特异性重复序列,获得覆盖整个靶向基因的特异性DNA序列,该特异性DNA序列为不连续的多个DNA片段;(2)给靶向基因的特异性DNA序列中每一个DNA片段设计出成对PCR引物,引物长度为18?25个碱基;所述第二程序包括以下步骤:(1)以正常组织...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:方园
申请(专利权)人:张家港蓝苏生物工程有限公司
类型:发明
国别省市:

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