全人源抗CD33单链抗体ZJL101及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种全人源抗CD33单链抗体ZJL101。通过噬菌体展示技术，以人CD33-ECD蛋白做为靶抗原从高容量的全人源白血病噬菌体抗体库中经多轮筛选，并在大肠杆菌中诱导表达出单链抗体ZJL101，并经过Ni柱亲和纯化而获得。本发明专利技术获得的全人源抗CD33单链抗体ZJL101能够特异抑制CD33阳性的白血病细胞株HL-60和Kasumi-1的生长，该单链抗体本身及其可变区序列经过基因工程改造成其它的抗体形式后，可作为治疗药物或药物运载体用于CD33阳性的白血病的靶向治疗。该单链抗体具有结构简单、免疫源性低、特异性强、相对分子量小、穿透性强等优点，是一种理想的靶向药物和药物运载体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属基因工程，涉及全人源抗⑶33单链抗体的筛选、鉴定和原核表达，及其在CD33阳性白血病靶向药物制备中的应用。
技术介绍
噬菌体展示抗体技术可以制备全人源的抗体，是将蛋白分子或肽段的基因克隆到丝状噬菌体的基因组DNA中，与噬菌体的外壳蛋白形成融合蛋白，从而使异源分子展示于噬菌体表面。主要特点是将特定的分子的基因型和表达型同时出现在一个噬菌体颗粒内，通过DNA测序可以获得特定展示蛋白的序列信息。噬菌体抗体库技术模拟了人类B细胞的分化成熟过程，首先通过分子生物学手段将人类抗体的重链和轻链可变区基因连接起来形成单链抗体(Single-chain variablefragment, scFv),插入曬菌体载体上,使单链抗体scFv展示在卩遼菌体表面,再用特定的抗原筛选出特异性的噬菌体抗体，并用大肠杆菌表达可以表达大量单链抗体。卩遼菌体可以表达抗体结合片段(Fragmentantigen binding, Fab)、单链抗体(scFv)、双链抗体(Diabody)和双特异性抗体(Bispecific scFv, BsAb)等。其中单链抗体(scFv)是目前报道最多的一种小分子抗体，是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种全人源抗CD33单链抗体ZJL101，SEQ?ID?NO?1是该单链抗体的DNA序列，SEQ?ID?NO?2是该单链抗体的氨基酸序列，该单链抗体的分子量为25212，含有完整的抗体重链可变区VH和轻链可变区VL?，中间连接肽为（Gly?Gly?Gly?Gly?Ser）3，其重链可变区VH的氨基酸序列为SEQ?ID?NO?3，含119个氨基酸，其分子量为12764，轻链可变区VL的氨基酸序列为SEQ?ID?NO?4，含107个氨基酸，其分子量为11519。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：詹金彪，范娜娜，张珍珍，林莉，丁倩，汤沁，代争，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：