猪传染性胃肠炎TGE 的RT-LAMP检测方法技术

本发明专利技术提供了猪传染性胃肠炎TGE的RT-LAMP检测方法，包括如下具体步骤：1）根据GenBank中TGEVN基因的保守区域，用在线软件设计LAMP引物；2）制备病毒液，-80℃备用；3）提取TGEV的RNA；4）以步骤3)所得的TGEV的RNA为模板，进行RT-LAMP反应；5）琼脂糖凝胶检测RT-LAMP反应结果。本发明专利技术所述猪猪传染性胃肠炎TGE的RT-LAMP检测方法与传统方法相比，具有以下优点1.操作简单。2.快速高效。3.高特异性。4.高灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术适用于临床和基层实验室快速、准确地诊断猪传染性胃肠炎。
技术介绍
猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的一种高度接触传染性肠道疾病，临床上以病猪呕吐、严重腹泻和失水为主要特征，不同品种、年龄的猪只都可感染发病，尤以两周龄以内仔猪、断奶仔猪易感性最强，致死率高，可达100%。该病是 一种世界性疾病，给畜牧业生产带来巨大的经济损失，早发现、早确诊对该病的防治意义重大。要做到早确诊就需要快速、敏感、特异的诊断方法。目前，检测TGEV的常规方法主要有病原学检测，包括病毒的分离鉴定、电镜检测、免疫荧光法和免疫过氧化物酶法等；血清学检测，包括血清中和试验、酶联免疫吸附试验(ELISA) 等；分子诊断技术，包括核酸探针杂交技术、聚合酶链式反应(RT-PCR)技术、多重RT-PCR和RT-nPCR方法等。作为传统的检测方法，TGEV的病原学检测存和血清学检测在着许多问题。 TGEV的分离只能在实验室进行，需要较高的技术水平和较先进的实验条件，操作困难，所需周期长，且TGEV与多种病毒接种细胞后CPE相同或相似，如诸呼吸道冠状病毒、猪流行性腹泻等，因此病毒分离方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
猪传染性胃肠炎TGE？的RT？LAMP检测方法，其特征在于，包括如下具体步骤：1）根据GenBank中TGEV？N基因的保守区域，用在线软件设计LAMP引物如下：？？FIP？？5’GGCATCTGCATGAGGTCCAGACGTAAAGAGCTTCCTGAA3’BIP？5’CAAGGATGGTGCCATGAACAAAGCTTTGGATTCATTATTAGCAC3’F3？？？？5’GCTATCGCATGGTGAAGG3’B3？？？？5’CAAGTTGAAATTCGCCTGG3’；2）用常规方法将PK？15细胞传代培养，待其长成单层，将TGEV？Purdue株冻干毒用DMEM稀释后接种于细胞上，在...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：贺东生，陈瑞爱，钟望，刘好鹏，张显浩，裴仉福，唐绪，汤钦，
申请(专利权)人：广东大华农动物保健品股份有限公司，肇庆大华农生物药品有限公司，
类型：发明
国别省市：