一种测定赭曲霉毒素A的适配体传感器的构建方法技术

一种测定赭曲霉毒素A的适配体传感器的构建方法，属于生物传感器检测技术领域。本发明专利技术包括：链霉亲和素包被PCR管，适配体与其部分互补的DNA片段杂交并固定在PCR管表面，适配体传感器的构建。本发明专利技术提供了一种与赭曲霉毒素A高特异性高亲和力结合的单链DNA适配体和部分互补于适配体的DNA片段，通过适配体与赭曲霉毒素A的识别结合，诱导适配体构象的改变从而导致互补于适配体的DNA片段释放，以互补于适配体的片段作为PCR扩增模板，通过扩增后的荧光信号对赭曲霉毒素A进行检测。本发明专利技术方法能实现对赭曲霉毒素A超灵敏检测，检测限低、检测灵敏度高、特异性好，为痕量赭曲霉毒素A以及其他有害物质的检测提供了一种有效的方法。

【技术实现步骤摘要】

一种测定赭曲霉毒素A的适配体传感器的构建方法，属于生物传感器检测

技术介绍
赭曲霉毒素(Ochratoxins)是曲霉属和青霉属的几个种产生的一组结构类似的有毒代谢产物，有A、B、C、D四种化合物，包括7种化学结构相似的化合物，其中毒性最大、分布最广、产毒量最高、对农作物的污染最重、与人类健康关系最密切的是赭曲霉毒素A(ochratoxin A, OTA)。主要产生菌是赫曲霉(Asperillus ochraceus)、纯绿霉(Penicillium verrucosum),对食品污染的范围较广,广泛存在于谷物、咖啡豆、豆类、葡萄·干、啤酒、葡萄汁等各类食物和饲料中，谷物及其副产品是OTA的主要来源。赭曲霉毒素A具有肾脏毒性、肝脏毒性、免疫毒性、以及致畸、致癌和致突变作用等多种毒性，对动物和人体健康有很大的潜在危害。因此世界各国均重视对赭曲霉毒素A的检测和控制，并制定了相关限量标准，以便于确保食品安全和消除国际贸易中的技术壁垒。目前，赭曲霉毒素A的残留分析方法主要有化学分析法和免疫化学分析法。薄层层析法(TLC)的优点是方法简单，使用的试剂价格便宜，但是存在灵敏度较差，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定赭曲霉毒素A的适配体传感器的构建方法，其特征在于包括：链霉亲和素包被PCR管，适配体与其部分互补的DNA片段杂交并固定在PCR管表面，适配体传感器的构建；具体步骤为：（1）链霉亲和素包被PCR管首先将PCR管用50μL质量浓度0.8%的戊二醛溶液在37℃包被5h，然后用超纯水将PCR管洗涤三次，每次3min；再用pH7.2、0.01M的碳酸盐缓冲液稀释的12.5ng/mL的链霉亲和素包被PCR管，每管30μL在37℃孵育2h，孵育结束后再用上述碳酸盐缓冲液洗涤三次，每次3min，以去除未结合的链霉亲和素；（2）适配体与其部分互补的DNA片段杂交并固定在PCR管表面用含750mM？NaC...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胥传来，徐丽广，匡华，马伟，刘丽强，宋珊珊，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：