一种快速准确鉴定乌鳢、斑鳢及杂交鳢的方法技术

本发明专利技术涉及一种快速准确鉴定乌鳢、斑鳢及杂交鳢的方法，该方法包括步骤：1）引物合成；2）乌鳢、斑鳢及杂交鳢[斑鳢（♀）╳乌鳢（♂）]DNA的提取；3）SRAP-PCR反应采用复性变温法；4）电泳检测；5）对能用于鉴定乌鳢、斑鳢及杂交鳢[斑鳢（♀）╳乌鳢（♂）]的引物组合，用Gelpro32软件处理条带，标出条带的大小，并在其它采样的群体中验证。本发明专利技术在不处死鱼种的基础上，只需剪去少量鳍条或其它鱼体组织部分，利用SRAP技术便很容易区别乌鳢、斑鳢及杂交鳢[斑鳢（♀）╳乌鳢（♂）]的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用分子生物学的技术(SRAP)鉴定杂交鱼种的方法，更具体的说，本专利技术涉及一种快速准确鉴定乌鳢、斑鳢及杂交鳢的方法。
技术介绍
乌體(Channaargus)和斑體(Channa maculate)同属于S卢形目(Perciformes)體科(Channidae)鳢属。通过斑鳢和乌鳢杂交所获得的杂交鳢系的子一代，具有生长快、产量高、病害少、安全质量高等优势，人工养殖过程可采用人工饲料喂养，大大改善原乌鳢养殖中因采用冰鲜投喂而造成饲料浪费及水源污染等问题，在珠江三角洲地区已成为鳢科鱼类中最重要的养殖品种。其中，以斑鳢为母本和乌鳢为父本的杂交鳢，因为苗种 孵化率高、成活率高等优势，在中国鳢科鱼类养殖中所占的比重越来越大。相关序列扩增多态性(SRAP)是近年来发展起来的一种新型分子标记系统，它独特的引物设计原则，上游引物可以特异性结合在基因的外显子或启动子区域，下游引物可特异地与基因的内含子配对，针对基因组的ORF进行扩增，由于个体的内含子、启动子与间隔区长度不等而产生多态性扩增产物。SRAP技术具有简便、高共显性、重复性高、成本低等特点。此技术在植物方面已经大量应用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速准确鉴定乌鳢、斑鳢及杂交鳢的方法，其特征在于，包括步骤：1）引物合成步骤：根据2001年由美国加州大学蔬菜作物系Li和Quiros博士提出的一种基于PCR的新型分子标记技术？相关序列扩增多态性，合成引物；2）乌鳢、斑鳢及杂交鳢[斑鳢（♀）╳乌鳢（♂）]DNA的提取步骤：剪取三种鱼的胸鳍，用苯酚法提取组织的DNA，把DNA浓度稀释到20ng/μl，放入–20℃以下保存；3）SRAP？PCR反应步骤，其中SRAP？PCR反应采用复性变温法；具体是指：扩增程序:94℃预变性3min；94℃预变性45s，35℃退火45s，72℃延伸1min，共5个循环；94℃预变性45s，50℃退火45s，7...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱树人，李家乐，王群，邢智珺，谢楠，王宇希，潘彬斌，
申请(专利权)人：华东师范大学，上海海洋大学，杭州市农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：