检测核酸突变的固相载体、试剂盒和方法技术

技术编号:8268124 阅读:234 留言:0更新日期:2013-01-30 23:45
本发明专利技术涉及生物技术领域,提供了一种检测核酸突变的固相载体、试剂盒和方法。所述检测核酸突变的固相载体表面固定有MutS;所述MutS含有报告基团;所述报告基团用于指示固相载体上MutS的数量。本发明专利技术还提供了包括上述检测核酸突变的固相载体的试剂盒,以及基于上述检测核酸突变的固相载体进行核酸突变检测的方法。本发明专利技术的检测核酸突变的固相载体、试剂盒在实际应用中能够减少检测步骤,提高检测效率,排除检测结果中的假阴性结果,提高检测结果的准确率。本发明专利技术的检测核酸突变的方法能够减少检测步骤,提高检测效率,排除检测结果中的假阴性结果,提高检测结果的准确率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
,更具体地说,涉及。
技术介绍
错配识别蛋白(mismatch binding protein,MutS)是错配修复系统行使修复功能的第一个蛋白,能够识别并结合全部八种碱基错配 ,还能识别结合I至4个核苷酸插入或缺失形成的loop环结构引起的错配。 利用MutS的上述特殊功能,近年来己有一些研究探索MutS在检测和富集突变以及检测SNP方面的应用。其中,Rober Wanger等提出了一种利用固定化的MutS检测突变的方法,大致包括以下步骤1)将含有MutS溶于反应缓冲液中,所述反应缓冲液为pH7. 6,含有5mM氯化镁,O. ImM 二硫苏糖醇,O. OlmMEDTA的Tris-HCl溶液;2)将预湿的硝酸纤维膜置于48孔板中,加入含有MutS的反应缓冲液,每孔含有的MutS 500ng,室温反应20min ;3)然后加入3% BSA, 200 μ L/孔,封闭lh,洗去封闭液;4)将待测DNA溶于含有3% BSA的反应缓冲液中,并加至经步骤3)处理后的48孔板中,O. 05 μ g/ μ L-0. 5 μ g/ μ L,20 μ L,室温反应30min本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测核酸突变的固相载体,其特征在于,所述固相载体表面固定有MutS;所述MutS含有报告基团;所述报告基团用于指示固相载体上MutS的数量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:盛司潼
申请(专利权)人:深圳市华因康高通量生物技术研究院
类型:发明
国别省市:

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