一种隐性混合池测序基因克隆方法技术

本发明专利技术公开了一种隐性混合池测序基因克隆方法。此方法包括以下步骤：亲本杂交构建分离群体；按个体目标性状的差异对分离群体分池，通过高通量测序亲本获得显性与隐性亲本特异位点，与隐性混合池测序结果比较获得候选基因；富集隐性混合池中候选基因并重测序克隆目标基因。本发明专利技术以测序为基础，可用于任何物种，直接克隆基因本身。采用本发明专利技术的方法，工作量大为减少，速度大为加快，而且降低了风险。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于遗传学领域，公开了。
技术介绍
自然界物种性状丰富多样，如株高、抗病性、产量等。从孟德尔时代起，就逐渐认识到了性状是由遗传因子控制，摩尔根进一步将遗传因子明确为“基因”，并指出基因位于染色体上且呈线性排列。确定基因在染色体上具体的位置(基因定位)是研究性状的基础，也是分离、克隆并利用基因的前提。经典的基因定位策略源于摩尔根的连锁理论，即染色体上相邻基因(即基因连锁)不能自由分离，而是倾向于整体向后代传递，它们所控制的性状也倾向于同时出现。二者相邻越近，性状同时出现的可能性越大，重组性状越少。因此，由重组性状(配子)的比例可以度量二者间的距离。若已知道其中一个基因在染色体上的位置(我们称这样的基因为标记基因)，就可以根据重组率推断另一个基因的位置。例如，黄色圆粒豌豆品种(基因型分别为YYRR)与绿色皱粒品种(基因型为yyrr)杂交产生F1 (基因型YyRrhF1自交可能产生YR、Yr、yR和yr 4种配子，根据F2代的性状表现可以确定它们的比例，进而计算交换率。若交换率为1%，且已知控制颜色的Y基因位于第3染色体上，那么就可以推测，控制豌豆籽粒形状的R基因位于第3染色体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种隐性混合池测序基因克隆方法，其特征在于，包括以下步骤：亲本杂交构建分离群体；按每个个体目标性状的差异对分离群体分池，获得隐性池，通过对亲本的高通量测序获得显性与隐性亲本特异位点，与隐性混合池测序结果比较获得候选位点；通过PCR检测隐性池中每一基因型候选位点，或通过富集隐性池中候选位点后重测序的方式确定目标位点；PCR扩增克隆目标基因，并通过遗传互补实验验证所克隆基因的功能。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：彭海，张静，周俊飞，章伟雄，
申请(专利权)人：江汉大学，
类型：发明
国别省市：