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一种亲本特异位点测序克隆基因的方法技术

技术编号:8268037 阅读:292 留言:0更新日期:2013-01-30 23:35
本发明专利技术公开了一种亲本特异位点测序克隆基因的方法。其包括以下步骤:选用目标性状有差异的材料做亲本,通过两亲本杂交构建分离群体,从分离群体中选择具有隐性性状的个体构建隐性基因池;对两个亲本进行基因组高通量测序,通过初步直接组装并比对,获得显性与隐性亲本特异位点,该特异位点为目标基因的候选位点;通过富集隐性池候选位点并重测序或PCR方式逐个检查隐性池每个个体的每个候选位点的方式,确定目标基因位点;通过PCR扩增克隆全长目标基因,通过遗传互补实验验证目标基因。本发明专利技术以测序为基础,可用于任何物种,直接克隆基因本身。采用本发明专利技术的方法,工作量大为减少,速度大为加快,而且降低了风险。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于遗传学领域,公开了。
技术介绍
自然界物种性状丰富多样,如株高、抗病性、产量等。从孟德尔时代起,就逐渐认识到了性状是由遗传因子控制,摩尔根进一步将遗传因子明确为“基因”,并指出基因位于染色体上且呈线性排列。确定基因在染色体上具体的位置(基因定位)是研究性状的基础,也是分离、克隆并利用基因的前提。经典的基因定位策略源于摩尔根的连锁理论,即染色体上相邻基因(即基因连锁)不能自由分离,而是倾向于整体向后代传递,它们所控制的性状也倾向于同时出现。二者相邻越近,性状同时出现的可能性越大,重组性状越少。因此,由重组性状(配子)的比 例可以度量二者间的距离。若已知道其中一个基因在染色体上的位置(称这样的基因为标记基因),就可以根据重组率推断另一个基因的位置。例如,黄色圆粒豌豆品种(基因型分别为YYRR)与绿色皱粒品种(基因型为yyrr)杂交产生F1 (基因型YyRr) ,F1自交可能产生YR、Yr、yR和yr4种配子,根据F2代的性状表现可以确定它们的比例,进而计算交换率。若交换率为I %,且已知控制颜色的Y基因位于第3染色体上,那么就可以推测,控制豌豆籽粒形状的R基因位于第3染色本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种亲本特异位点测序克隆基因的方法,其特征在于,包括以下步骤:选用目标性状有差异的材料做亲本,通过两亲本杂交构建分离群体,从分离群体中选择具有隐性性状的个体构建隐性基因池;对两个亲本进行基因组高通量测序,通过初步直接组装并比对,获得显性与隐性亲本特异位点,该特异位点为目标基因的候选位点;通过富集隐性池候选位点并重测序或PCR方式逐个检查隐性池每个个体的每个候选位点的方式,确定目标基因位点;通过PCR扩增克隆全长目标基因,通过遗传互补实验验证目标基因。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:彭海张静章伟雄
申请(专利权)人:江汉大学
类型:发明
国别省市:

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