一种利用磁珠提取全血基因组DNA的试剂盒及应用制造技术

技术编号:8239248 阅读:247 留言:0更新日期:2013-01-24 19:12
本发明专利技术公开了一种利用磁珠提取全血基因组DNA的试剂盒及应用,所述试剂盒由磁珠悬浮液、基因提取液和磁架构成;所述基因提取液包括红细胞裂解液、细胞裂解液、结合液、蛋白酶K工作液、漂洗液1、漂洗液2、漂洗液3和洗脱液;本发明专利技术适于中大量全血基因组DNA的提取,操作简便,只需对红细胞进行简单预处理,即可对大体积的全血样本进行快速提取,1h内可完成操作,适合高通量、自动化提取;反应体系灵活,可根据样品体积作体系的相应调整;不使用苯酚、氯仿等有机溶剂,对操作人员安全无毒副作用;提取效率高,能够从2ml全血中提取20~?60μgDNA,且片段完整。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因组DNA的提取方法,特别涉及一种利用磁珠提取全血基因组DNA的试剂盒及应用
技术介绍
DNA作为遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象。提取基因组DNA是许多分子生物学实验的基础,在诸如基因组测序、Southern杂交、PCR扩增、构建BCA文库、分子克隆等常规实验中,获得高分子量、高纯度的基因组DNA是开展研究工作的重要前提。随着分子生物学技术的深入发展,在基因水平上对疾病进行检测、诊断已经成为临床诊断的一项基本技术手段;尤其是法医学中的个体识别、亲子鉴定等,对所提取基因组DNA的完整性及纯度要求更高。血液取材方便可靠,因此许多研究均以血液作为材料以提取完整的基因组DNA。而出于对实验成本、工作效率等多方面因素的考虑,研究人·员希望尽可能一次性获取最大采血量(2-10ml)的基因组DNA,以进行长期保存,满足长期、反复、多种研究的需要。基因组DNA提取一般需遵循以下几个原则1、保证提取的DNA具有一定的长度;2、纯化后不应存在对没有抑制作用的物质;3、排除有机溶剂和金属离子污染;4、蛋白质、多糖、脂类等降低到最低程度;5、排除其他核本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用磁珠提取全血基因组DNA的试剂盒,其特征在于所述试剂盒由磁珠悬浮液、基因提取液和磁架构成;所述磁珠悬浮液以氯化铁和氯化亚铁为磁性材料,在氮气和氢氧化钠的作用下,通过化学共沉淀形成磁性粒子,再将磁性粒子用硅酸钠修饰,水分散,获得所述磁珠悬浮液;所述基因提取液包括红细胞裂解液、细胞裂解液、结合液、蛋白酶K工作液、漂洗液1、漂洗液2、漂洗液3和洗脱液;所述红细胞裂解液终浓度组成为:100~200mmol/L氯化铵、5~20mmol/L钾盐,0.05~?0.1mmol/L?EDTA,溶剂为水,pH为7.0~8.0;所述细胞裂解液终浓度组成为:50?~?200mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐a...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:吴箭王珺张琼
申请(专利权)人:杭州硕航生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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