一种分离植物低分子量RNA的方法技术

本发明专利技术提供了一种分离植物低分子量RNA的方法，主要包括：样品处理，DNA和蛋白质的去除，大分子量RNA的去除，低分子量RNA的获得，低分子量RNA的保存。本发明专利技术提取低分子量RNA过程中对DNA、大分子量RNA和低分子量RNA采用分级沉淀，用30%聚乙二醇（PEG）和1/3体积的无水乙醇沉淀DNA和大分子量RNA，用2/3体积的无水乙醇沉淀低分子量RNA，实现低分子量RNA的富集；提取过程中操作简便、所需时间短，是一种简单、经济、高效的提取高质量植物低分子量RNA的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学
，具体地说，涉及一种分离植物低分子量RNA的方法。
技术介绍
低分子量RNA包括大小在20nt 24nt的siRNAs和miRNAs，这类小RNA分子对植物的生长、发育及响应逆境胁迫方面起着重要的调控作用。自从2002年科学家首次在植物中发现miRNAs以来，miRNAs数据库已收录了 4169条植物miRNAs,小RNA分子的研究越来越受到植物科学家的重视。小RNA分子的获得是开展小RNA研究的前提，小RNA的质量直接影响后续实验的开展。不管是用哪种提取方法，都要求所获得的低分子量RNA纯度高、质 量好，没有多酚、多糖等物质的污染。目前，科研上获得植物小RNA的方法主要有以下几种①通过商业试剂盒提取小RNA ;②从总RNA中回收小RNA ;③直接富集小RNA。这3种方法的不同之处主要在于它们分离小RNA的手段。AmbioruStratagene等公司开发的小RNA提取试剂盒是利用高分子材料制成的膜吸附小RNA，然后再从膜上将其回收，这一方法虽然使用方便，但其价格昂贵，而且这些试剂盒不适合小RNA的大量提取。从总RNA中回收小RNA的方法是经典的分离本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离植物低分子量RNA的方法，其特征在于包括样品处理、DNA和蛋白质的去除、DNA和大分子量RNA的去除、低分子量RNA的获得、低分子量RNA的保存；所述的样品处理加入的CTAB提取缓冲液的成分为：2%十六烷基三甲基溴化铵,25mmol/L乙二胺四乙酸,2mol/L氯化钠,3%聚乙烯吡咯烷酮（PVP？40）,100mmol/L三羟甲基氨基甲烷（pH8.0）,0.5g/L亚精胺。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：安泽伟，李雅超，谢黎黎，翟琪麟，胡彦师，程汉，黄华孙，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院橡胶研究所，
类型：发明
国别省市：