【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学
中血液RNA分离方法,具体涉及从微量血液中快速分离RNA,采用特定的RNA分离试剂与核酸吸附离心套管联合应用,能快速分离血液中的RNA,其分离出的RNA产量和纯度高,无蛋白质和基因组DNA污染,操作简便、耗时短。
技术介绍
目前,国内外对于血液中RNA的提取,多采用淋巴细胞分离液先分离出单个核细胞,然后进行裂解提取。因为分离单个核细胞需要大量的血液,这样给取样带来了困难和不便,更重要地是给病人带来不必要的痛苦和心理负担,以及影响并限制了临床对疾病的检测诊断和研究工作。另外,由于血液中含有大量的RNA酶和红细胞中的某些成分,如果处理不干净会严重影响RNA的提取质量及后续实验的成功,传统的提取RNA方法包括使用淋巴细胞分离液很难做到这一点,且耗时长、操作繁琐。这也是影响血液中RNA提取时容易降解和产量低及不纯的重要原因。
技术实现思路
针对上述存在的不足和影响因素,本专利技术的目的在干,提供ー种微量血液RNA核酸吸附快速分离方法,有效抑制内源性RNA酶降解RNA的活性及除去红细胞碎片和成分,操作简单快速,而且纯度高、无蛋白质及基因组DN ...
【技术保护点】
一种微量血液RNA核酸吸附快速分离方法,其特征在于,该方法采用核酸吸附离心套管,用RNA提取试剂从微量血液中快速分离RNA,所述的RNA提取试剂由红细胞裂解溶液,离解溶液,清除溶液,洗涤液溶和分离溶液组成,具体按操作步骤是:首先通过红细胞裂解溶液裂解除去微量血液中的红细胞及碎片,再用离解溶液使单个核细胞中的RNA分离,同时抑制内源性RNA酶降解RNA的活性,其溶液通过核酸吸附管中吸附层使RNA被吸附,用清除溶液清除蛋白质及其他杂质成分,再用洗涤溶液清洗,最后用分离溶液使RNA与核酸吸附层脱离,从而获得超纯的RNA;所述的RNA提取试剂各组分及物质浓度(摩尔/升)组成按终浓度 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:饶国洲,李昂,李晓红,周洪,
申请(专利权)人:西安交通大学口腔医院,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。