从复杂基质中提取核酸制造技术

技术编号:8109016 阅读:217 留言:0更新日期:2012-12-21 22:35
本公开描述了一种吸附剂以及从复杂基质(如粪便样品和水样品)中提取核酸(如DNA和RNA)的示例性方案。所述吸附剂是用如聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖或椰子粉的材料涂敷的活性炭。所述吸附剂可用于微量离心旋柱中,其中,其可以作为浆料在贮藏溶液中存在。所述样品可以如下制备:在缓冲溶液中涡旋,离心,将蛋白酶加入到上清液中及使上清液通过含有经涂敷的活性炭的微量离心旋柱。在试剂盒中可装入包括缓冲液、蛋白酶和旋柱的主要组成部分。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开主要涉及一种从样本(例如,人类样本和环境样品)中纯化总核酸(包括DNA和RNA)的方法。人类样本的实例包括(仅仅出于举例的目的)粪便、组织、尿和其他样本。环境样品的实例包括(仅仅出于举例的目的):水、土壤和其他样品。本公开还适用于可以从中提取总核酸样品的农业、兽医医学、食品和其他样品。更具体地,本公开涉及一种新型材料收集法及其使用程序。
技术介绍
人类粪便样本通常用于临床实验室中诊断包括结肠直肠癌以及病毒、细菌和原生动物感染在内的多种疾病。据估计,在美国每年总共对粪便样本进行超过610万例的体外诊断(IVD)测试。这些测试大多数使用如直接显微镜检查、培养或免疫测定的成熟技术。然而,日益增加的传染原(包括腺病毒、肠道病毒、诺如病毒、轮状病毒、大肠杆菌(E. coli)和艰难梭状芽孢杆菌(C. difficile)),现正在使用分子方法进行识别。粪便是一种复杂基质,其包含许多在大多数分子测定的核心阶段抑制PCR测定的蛋白质、多糖和小分子。因此,实验室工作人员必须在分子分析之前分离粪便样本中包含的DNA和/或RNA。已有几种用于从粪便中提取DNA的商品。其中最受欢迎的是Qiagen本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.02.16 US 61/304,9131.一种从样品中提取核酸的方法,所述方法包括 在缓冲液中使至少一部分样品均质化; 离心该均质化的样品部分,所述离心产生沉淀和上清液; 分开所述上清液和沉淀; 将蛋白酶加入到所述上清液中;和 使所述上清液通过吸附剂,所述吸附剂包含经涂敷的活性炭。2.权利要求I所述的方法,其中,所述样品选自粪便样品、组织样品、尿样品、血液样品、水样品、土壤样品、农业样品、兽医医学样品和食品样品。3.权利要求I所述的方法,其中,所述部分样品至少具有O.2g的质量或O. 2μ L的体积。4.权利要求I所述的方法,其进一步包括孵育所述上清液。5.权利要求I所述的方法,其中,所述活性炭用选自聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖和椰子粉中的材料涂敷。6.权利要求I所述的方法,其中,该经涂敷的活性炭包括活性炭浆料。7.权利要求6所述的方法,其中,所述浆料的重量/体积比为约59Γ约20%。8.权利要求6所述的方法,其中,所述浆料包含约1% 约10%重量/体积的涂敷材料。9.权利要求8所述的方法,其中,所述涂敷材料选自聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖和椰子粉。10.一种从样品中提取核酸的试剂盒,所述试剂盒包括 缓冲溶...

【专利技术属性】
技术研发人员:克里斯特尔·R·伊琴豪尔布莱恩·V·洛亚尔玲·N·K·阮
申请(专利权)人:肺结核诊断公司
类型:
国别省市:

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