一种提取黄草乌酮的方法技术

本发明专利技术公开了一种提取黄草乌酮的方法，其特征在于采用超临界CO2萃取、离子树脂吸附、膜浓缩、高速逆流色谱纯化的方法获得黄草乌酮，含量高于98%。本发明专利技术具有简便易行、成本低、产品纯度等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药提取分离
，具体地说，涉及。
技术介绍
黄草乌酮(Vilmorrianone),是从玄参科裸露翠雀花應denudaturn Wall的根中分离得到的一种萜类生物碱。现代研究其具有抗真菌活性，对下列真菌的MIC(y g/ml)为波氏霉样真菌150、黑曲霉100、絮状表皮癣菌225、糙皮侧耳菌175。黄草乌酮为无色棱柱状结晶(甲醇)，mp. 253 255°C，分子式C23H27NO5,分子量397. 47。 目前，国内尚未有分离黄草乌酮的方法报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供，该方法简便易行、成本低、环保。为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案如下 1)超临界CO2萃取取裸露翠雀花的根粉碎，加入碱性醇浸润2-8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物； 2)阳离子树脂吸附将上述萃取物用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液上阳离子树脂柱交换吸附，用3-6倍柱体积氯化钠溶液洗脱，得洗脱液； 3)膜分离将上述洗脱液加入超滤膜系统超滤，透过液加入纳滤膜浓缩、干燥，得干燥物； 4)高速逆流色谱纯化将上述干燥物采用高速逆流色谱仪进行纯化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，用流动相溶解上述干燥物，由进样阀进样，收集目标流分，浓缩干燥即得黄草乌酮。所述步骤I)中的碱性醇为pH9-12的90-99%乙醇溶液。所述步骤I)中的超临界CO2萃取条件为萃取温度为40-60 °C,萃取压力为28-45MPa，CO2流量为20_38L/h，萃取时间为l_2h，分离釜I温度为35-42 °C，压力为10-15MPa，分离釜II温度为25-35°C，压力为6_9MPa。所述步骤2)中的阳离子树脂为强酸性阳离子交换树脂，氯化钠溶液为2-4%氯化钠水溶液。所述步骤3)中的超滤膜可选截留分子量3000-6000的中空纤维素膜，纳滤膜可选截留分子量200的中空纤维素膜。所述步骤4)中正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水的体积比为(4-6) :(4-7) :(5-8)(2-4)，主机转速 800-950rpm，流速为 I. 5-2. 5ml/min。本专利技术的积极效果在于超临界CO2萃取黄草乌酮，杂质溶出少，提取时间短，效率高，CO2重复利用，是一种环保无污染的方法；再经酸水溶解、阳离子树脂富集、膜浓缩分离和高速逆流色谱纯化，步骤简单易操作，溶剂可重复利用、节约能源，提取率高，可以快速得到高含量产品，并可连续生产。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式 实施例I: 取裸露翠雀花的根1kg，粉碎，加入PH9的90%乙醇浸润6小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，调节萃取温度为40°C，萃取压力为38MPa，CO2流量为38L/h，萃取2h，调节分离釜I温度为35°C，压力为lOMPa，分离釜II温度为25°C，压力为6MPa，在分离釜中收集 萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液上强酸性阳离子交换树脂，先用去离子水洗至中性，再用6倍柱体积2%氯化钠水溶液洗脱，将洗脱液直接加入截留分子量6000的中空纤维素膜系统超滤，透过液加入截留分子量200的中空纤维素膜浓缩、干燥，得干燥物。按体积比为4 :4:5 :2配备正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统，将此体系置于分液漏斗中充分混匀，分离上相和下相，分别超声处理除去气泡，向色谱柱中泵入上相(固定相)，待柱中充满固定相后再开启机器，调节主机转速950rpm,流速调至2ml/min,泵入下相(流动相)，待流动相连续流出时，用流动相溶解上述干燥物，由进样阀进样，收集流分，真空减压干燥即得产品，纯度为98. 7%。实施例2: 取裸露翠雀花的根1kg，粉碎，加入pH12的99%乙醇浸润2小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，调节萃取温度为60°C，萃取压力为28MPa，C(V流量为20L/h，萃取lh，调节分离釜I温度为42°C，压力为15MPa，分离釜II温度为35°C，压力为9MPa，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液上强酸性阳离子交换树脂，先用去离子水洗至中性，再用3倍柱体积4%氯化钠水溶液洗脱，将洗脱液直接加入截留分子量3000的中空纤维素膜系统超滤，透过液加入截留分子量200的中空纤维素膜浓缩、干燥，得干燥物。按体积比为6 :7 8 :4配备正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统，将此体系置于分液漏斗中充分混匀，分离上相和下相，分别超声处理除去气泡，向色谱柱中泵入上相(固定相)，待柱中充满固定相后再开启机器，调节主机转速800rpm,流速调至I. 5ml/min,泵入下相(流动相)，待流动相连续流出时，用流动相溶解上述干燥物，由进样阀进样，收集流分，真空减压干燥即得产品，纯度为97. 9%。实施例3: 取裸露翠雀花的根10kg，粉碎，加入PHll的95%乙醇浸润8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，调节萃取温度为55°C，萃取压力为45MPa，C(V流量为33L/h，萃取I. 5h，调节分离釜I温度为38°C，压力为13MPa，分离釜II温度为28°C，压力为7MPa，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液上强酸性阳离子交换树脂，先用去离子水洗至中性，再用5倍柱体积3%氯化钠水溶液洗脱，将洗脱液直接加入截留分子量3000的中空纤维素膜系统超滤，透过液加入截留分子量200的中空纤维素膜浓缩、干燥，得干燥物。按体积比为5 6 7 3配备正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统，将此体系置于分液漏斗中充分混匀，分离上相和下相，分别超声处理除去气泡，向色谱柱中泵入上相(固定相)，待柱中充满固定相后再开启机器，调节主机转速900rpm,流速调至2. 5ml/min,泵入下相(流动相)，待流动相连续流出时 ，用流动相溶解上述干燥物，由进样阀进样，收集流分，真空减压干燥即得产品，纯度为98. 6%。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提取黄草乌酮的方法，其特征在于包括以下步骤：1）超临界CO2萃取：取裸露翠雀花的根粉碎，加入碱性醇浸润2？8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物；2）阳离子树脂吸附：将上述萃取物用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液上阳离子树脂柱交换吸附，用3？6倍柱体积氯化钠溶液洗脱，得洗脱液；3）膜分离：将上述洗脱液加入超滤膜系统超滤，透过液加入纳滤膜浓缩、干燥，得干燥物；4）高速逆流色谱纯化：将上述干燥物采用高速逆流色谱仪进行纯化，以正己烷？乙酸乙酯？甲醇？水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，用流动相溶解上述干燥物，由进样阀进样，收集目标流分，浓缩干燥即得黄草乌酮。

【技术特征摘要】
1.一种提取黄草乌酮的方法，其特征在于包括以下步骤 1)超临界CO2萃取取裸露翠雀花的根粉碎，加入碱性醇浸润2-8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物； 2)阳离子树脂吸附将上述萃取物用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液上阳离子树脂柱交换吸附，用3-6倍柱体积氯化钠溶液洗脱，得洗脱液； 3)膜分离将上述洗脱液加入超滤膜系统超滤，透过液加入纳滤膜浓缩、干燥，得干燥物； 4)高速逆流色谱纯化将上述干燥物采用高速逆流色谱仪进行纯化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，用流动相溶解上述干燥物，由进样阀进样，收集目标流分，浓缩干燥即得黄草乌酮。2.如权利要求I所述的一种提取黄草乌酮的方法，其特征在于所述步骤I)中的碱性醇为pH9-12的90-99%乙醇溶液。3.如权利要求I所述的一种提取黄草乌酮的方法，其特征在于所述步骤I)...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：