一种纯化恩夫韦肽的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用反相高效液相色谱法纯化恩夫韦肽的方法，主要解决恩夫韦肽收率极低的技术问题。纯化包括如下步骤：1）将恩夫韦肽粗品以稀氨水完全溶解后，以滤膜过滤后待用，以固定相为聚苯乙烯-聚乙烯基苯为基质的聚合物树脂填料的聚合物色谱柱，流动相中，磷酸盐缓冲液为A相，色谱乙腈为B相，进行梯度洗脱纯化，收集目的峰值含量大于80%的肽溶液；2）以固定相为十八烷基键合硅胶的反相硅胶柱进行二次纯化同时转盐，流动相中，醋酸水溶液为A相，色谱乙腈为B相，收集目的峰值含量大于98%的肽溶液；3）将最终的高纯度肽溶液减压旋蒸浓缩冷冻干燥，得粉末状成品肽。本发明专利技术提出了一条适合放大生产的高效液相色谱法纯化恩夫韦肽的纯化工艺。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于反相HPLC
，尤其是涉及ー种规模化纯化恩夫韦肽的方法。
技术介绍
恩夫韦肽是ー种人工合成的由36个氨基酸组成的链状多肽。是白色或灰白色非晶型固体，在纯水中几乎不溶，但在PH7. 5的缓冲液中溶解度达到82 142g/ml。分子式为C 204 H 301N5i O64。分子量为 4492。其结构式为=CH3CO-Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe-NH2o恩夫韦肽为合成肽类HIV融合抑制药，可与病毒包膜糖蛋白結合，阻止病毒与细胞膜融合所必需的构象变化，从而抑制HIV-I的复制。它是近7年来抗艾滋病治疗药的先鋒，是第一个融合抑制剂。其它抗艾滋病药物是作用于细胞内部，阻止病毒在细胞内部复 制；而这ー药物却是通过阻止病毒与T细胞等免疫细胞的接触融合，干扰HIV-I进入T细胞，防止艾滋病患者的免疫系统遭受病毒破坏来发生作用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纯化恩夫韦肽的方法，其特征是包括如下步骤：1）将恩夫韦肽粗品以稀氨水完全溶解后，以滤膜过滤后待用，以固定相为聚合物色谱柱，流动相为两相，磷酸盐缓冲液为A相，色谱乙腈为B相，进行梯度洗脱纯化，收集目的峰值含量大于80%的肽溶液；2)？以固定相为反相硅胶色谱柱进行二次纯化同时转盐，流动相为两相，醋酸水溶液为A相，色谱乙腈为B相，收集目的峰值含量大于98%的肽溶液；3）将最终的高纯度肽溶液减压旋蒸浓缩冷冻干燥，得粉末状成品肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐红岩，任丽萍，
申请(专利权)人：吉尔生化上海有限公司，上海吉尔多肽有限公司，滨海吉尔多肽有限公司，
类型：发明
国别省市：