用于多肽纯化的方法和系统技术方案

本发明专利技术提供了用于纯化多肽的方法和系统，其中包括在纯化后对包含多肽的溶液直接过滤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于纯化多肽的方法和自动化系统。尤其是，本专利技术涉及基于快速蛋白质液相层析(FPLC)的方法以及相应的用于从复杂混合物中纯化多肽的自动化系统。
技术介绍
快速蛋白质液相层析是一种学术界和工业上广泛使用的液相层析形式，用于从复杂混合物中将大量的各种生物分子(例如蛋白质和DNA)分离和/或纯化。在FPLC中，含有可溶性成分(包括目标生物分子)的混合物在液体流动的帮助下通过经过固定相被分离，因此混合物中的单一成分被分离出来。基于所采用的洗脱方法，包含在混合物中的成分以不同的速度迁移通过固定相或者通过与固定相发生特定配体相互作用被保留下来，从而相互之间发生分离。基于简化设计，自动化FPLC系统发展起来。基于FPLC的自动化系统特别地是由来自英国查尔芬特圣贾尔斯的通用电气医疗保健公司制造，并且以商标名称Aktatm投入市场。尽管简化了生物分子的纯化，但是纯化循环只能设立于目前的基于FPLC系统上运行，其中产生的包含目标生物分子的流经物或洗出液可以在离开该系统后短暂的时间内被收集。如果产生的流经物或洗出液并不是立即被收集并由此暴露较长时间，这样会增加变质的风险。一旦在流经物或洗出液中出现变质，所包含的生物分子将失去用途，并且不得不进行处理或者替代性地进行深入地净化，这是非常耗时和耗资的。因此，必须避免流经物或洗出液变质。为了避免流经物或洗出液变质，则需要在流经物或洗出液离开系统时操作人员就要到场，这增加了额外的工时数量，并且没有提高生产力，尤其是对于长期运行的循环而言。因此，纯化循环的运行被设定为流经物或洗出液离开系统的时间落入操作人员的常规工作时间范围内，而这反过来又限制了待运行的纯化循环时间选择和数量。专利技术的简要描述因此，本专利技术的目的在于提供一种方式来克服目前基于FPLC系统所存在的某些缺陷。特别地，其旨在提供一种具有改善的灵活性和/或生产力的方法和系统。依据本专利技术，通过以下I至23项目的标的来达到上述目的I、一种用于纯化多肽的基于快速蛋白质液相层析(FPLC)的方法，包括以下步骤a)将包含多肽的液体溶液施加至包含固定相的层析装置中；b)通过液体溶液经过层析装置的固定相，将多肽与包含于液体溶液中的其它分子分离；c)以流经物或洗出液的形式，从层析装置中回收多肽；和d)通过过滤的方式对包含回收的多肽的流经物或洗出液进行灭菌。2、根据项目I所述的方法，其中在步骤b)中，多肽与固定相相互作用并通过固定相被保持；并且在步骤c)中，通过洗脱的方式回收多肽。3、根据项目I或2所述的方法，其中在步骤d)中，过滤是真空过滤。4、根据项目I至3任一所述的方法，其中步骤a)至d)中一个或多个是自动控制的。5、根据项目I至4任一所述的方法，其中固定相是生物聚合物，无机聚合物或者合成聚合物，其中每一聚合物可随意地与官能团相连，或者为膜或体块(monolith)。6、一种自动化快速蛋白质液相层析(FPLC)系统，其设置以根据项目I至5任一所述方法来纯化多肽，所述系统包括i)层析模块；和ii)在层析模块之后布置的过滤模块。7、根据项目6所述的系统，其中过滤模块包括至少一个过滤装置以及控制装置，所述至少一个过滤装置用于对从层析模块中回收而来的包含多肽的流经物或洗出液进行灭菌过滤，所述控制装置用于控制经由至少一个过滤装置的灭菌过滤。8、根据项目6或7所述的系统，其中过滤模块包括多于一个的过滤装置，所述多于一个的过滤装置用于对从层析模块中回收而来的包含多肽的流经物或洗出液进行灭菌过滤，并且对于每一过滤装置包括与之功能性连接的控制装置，用于控制经由过滤装置进行 的灭菌过滤。9、根据项目7或8所述的系统，其中灭菌过滤通过采用真空来进行。10、根据项目7至9任一所述的系统，其中控制装置包括至少一个电动继电器和至少一个机电阀，二者功能性连接，其中所述电动继电器可选地包括输入端和输出端用于计算装置控制。11、根据项目7至10任一所述的系统，其中每一控制装置包括电动继电器和机电阀，二者功能性连接。12、根据项目7至11任一所述的系统，其中控制装置包括输入端和输出端用于计算装置控制。13、根据项目10至12任一所述的系统，其中机电阀用于控制真空的提供向过滤装置的传输。14、根据项目10至13任一所述的系统，其中机电阀由电动继电器控制。15、根据项目10至14任一所述的系统，其中机电阀是电磁阀。16、根据项目6至15任一所述的系统，其中过滤装置是滤杯。17、根据项目6至16任一所述的系统，其中过滤包括4个过滤和4个控制装置。18、一种设置用于项目6至17任一所述的自动化层析系统的过滤模块，包括至少一个过滤装置以及控制装置，所述至少一个过滤装置用于对包含多肽的溶液灭菌过滤，所述控制装置用于控制经由至少一种过滤装置的灭菌过滤。19、根据项目18所述的过滤模块，包括多于一个的过滤装置，所述多于一个的过滤装置用于对包含多肽的溶液灭菌过滤，并且对于每一过滤装置包括与之功能性连接的控制装置，用于控制经由过滤装置进行的灭菌过滤。20、根据项目18或19所述的过滤模块，其中过滤模块包括4个过滤装置和4个控制装置，因此总是一个过滤装置与一个控制装置功能性连接。21、一种设置用于项目18至20任一所述的过滤模块的控制装置，包括至少一个电动继电器和至少一个机电阀，二者功能性连接，所述电动继电器可选地包括输入端和输出端用于计算装置控制。22、根据项目21所述的控制装置，包括超过一个的电动继电器和超过一个的机电阀，二者功能性连接，所述电动继电器可选地包括超过一个的输入端和超过一个的输出端用于计算系统控制。23、根据项目21或22所述的控制装置，其中控制装置包括4个继电器和4个阀，因此总是一个继电器与一个阀功能性连接。一旦流经物或洗出液离开诸如纯化柱的层析装置后，直接对其进行灭菌可以使流经物或洗出液以及其中包含的生物分子安全贮藏较长时期，而不有变质的风险(也就是，层析后直接进行在线(in line)的灭菌过滤)。在这种方式下，本申请优选指向这样的设备，其包括一个层析模块以及继而平行的多个过滤装置(也就是超过I个)。上述设计的优点在于经过层析模块后形成的洗出液将通过多个平行的过滤装置，允许在给定时间内过滤更大体积的液体(与一个层析装置仅仅与一个过滤装置相连接的设备相比)。由于如此获得了更快速度的过滤，待纯化的蛋白质变质的风险大大降低。因此，本专利技术的方法和系统在循环运行的用时上增加了灵活性。通过在过夜循环中允许无人照看，运行时间和工时都得到了降低，因此增加了系统的生产力。此外，使用真 空过滤，就像增加由压力驱动的在线式过滤器，并没有改变系统动力学。在系统压力限制是一个问题时，这将获得较快的生产量。附图说明图I是本专利技术的包含一个电动EUL继电器和一个气体电磁阀的控制装置的原理图。图2是本专利技术的包含四个电动EUL继电器和四个气体电磁阀所组成的阵列的另外一个控制装置的原理图。定义除非此处特别地另有说明，术语“多肽”和“蛋白质”是指由至少2个氨基酸形成的化合物。“多肽”或“蛋白质”可以具有催化或结合活性。例如，“多肽”和“蛋白质”可以是，但不局限于，酶或抗体(例如抗体的一个区域或单域抗体)。出于本专利技术的目的，上述两个术语可以互换使用。除非此处特别地另有说明，术语“氨基酸”本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克·R·维克曼，山姆·曼苏尔，
申请(专利权)人：朗萨生物制剂有限公司，
类型：
国别省市：