一种原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性其构建方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种与原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性、其构建方法及其应用。本发明专利技术具有如下技术效果：1）本发明专利技术所建立的方法可以简便快捷地检测位于人klotho基因外显子4区的单核苷酸多态性，诊断个体是否对原发性肝细胞肝癌具有易感性，从而有利于原发性肝细胞肝癌易感人群的筛查和原发性肝细胞肝癌的预防；2）利用rs648202的T等位位点作为药物设计靶点进行药物的筛选，筛选出能够调节klotho基因表达水平的活性分子，促进新的抗肿瘤药物的发现；3）利用本发明专利技术提供的引物序列和HaeIII核酸内切酶可以简便、高效、特异地检测出rs648202多态；4）利用原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性，构建对原发性肝细胞肝癌进行遗传性诊断的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供了一种原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性其构建方法及其应用，属于基因工程生物

技术介绍
是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，2007年12月美国癌症学会(ACS)发布的数据显示肝癌年增66. 7万例，死亡59. 8万例，其中约50%的新患病例和死亡病例在中国，即肝癌对我国人民的健康威胁更大，已成为我国第二位肿瘤杀手，不仅使患者痛苦不堪，生存率低，而且给家庭、社会带来严重的经济和心理负担。单核苷酸多态性(SNP)是指基因组水平上由单个核苷酸的变异引起的多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种，占所有已知多态性的90%以上。SNP作为稳定遗传的早期突变，与疾病密切相关。当一种SNP在患者中的出现频率明显高于非患者，提示该SNP与此疾病相关，通过分析研究两者的单倍型和连锁不平衡性，可将基因组中任何未知的致病基因定位。SNP在致病基因定位中发挥的作用主要包括一是在寻找致病SNP，这种SNP的出现可导致基因在表达量和(或)蛋白表达产物结构的变化，从而导致某种疾病的发生或使得个体对某种疾病易感；二是SNP作为一种遗传标记，与疾病或者表型连锁。Klot本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，采用PCR？RFLP方法，包括以下步骤：⑴以包含klotho基因的待测人全基因组DNA为模板，PCR扩增得到klotho基因外显子4区的包含rs648202单核苷酸多态的DNA序列，即SEQ？ID？No.1中第2190位至第2352位所示序列；其中，PCR引物序列如下：上游引物为F:？5“？？ATAGCCTTGCAGGCTGATTG？？3“？？？下游引物为R:？5“？？TTCTTTGGTTCAGCCAGTCC？？3“⑵？对PCR扩增产物经限制性内切酶Hae？III进行酶切后通过琼脂糖凝胶电泳进行rs648202单...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄曙，季国忠，杨昀，范志宁，王敏，汤小伟，
申请(专利权)人：黄曙，南京医科大学第二附属医院，
类型：发明
国别省市：