一种检测原发性肝细胞癌的易感基因的荧光定量PCR基因分型方法及其试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种检测原发性肝细胞癌的易感基因的荧光定量ＰＣＲ基因分型方法，针对ＧＲＰ７８基因第５个内含子ｒｓ４３０３９７位点的多态性，设计ＰＣＲ反应引物和荧光探针；在反应体系中加入ＰＣＲ反应引物、荧光探针和ＰＣＲ反应液；置于荧光定量ＰＣＲ仪上反应。本发明专利技术还公开了一种原发性肝细胞癌的易感基因的荧光定量ＰＣＲ基因分型方法的试剂盒。该试剂盒包括ＰＣＲ反应液，还包括ＰＣＲ反应引物和荧光探针。本发明专利技术的ＴａｑＭａｎ荧光探针基因分型检测方法和试剂盒简单、快速、高通量、高敏感、特异性强，适用于ＨＣＣ易感人群的大规模筛查，并为基因治疗提供潜在的靶标，有利于指导ＨＣＣ的预防和治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种荧光定量PCR基因分型方法及其试剂盒，特别是一种^r测 原发性肝细胞癌的易感基因的荧光定量PCR基因分型方法及其试剂盒。
技术介绍
原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是世界范围内高发病率的恶 性肿瘤之一，在常见胂瘤中其发病率居第五位；HCC的年死亡数与同年新发病 数大致相仿，在肿瘤相关的死亡率中占第三位，仅仅低于肺癌和胃癌。中国也 是肝癌高发国家，HCC占我国原发性肝癌的90%， HCC是我国最常见的恶性肿 瘤之一，严重威胁人民群众的身体健康，因此也是我国重点研究的课题之一。目前所知，肝癌形成是一个多基因和多步骤的过程，涉及到染色体lp, 4q, 8p， 8q, 10q， lip, 13q, 16p, 17p, 19p和22q等染色体畸变(chromosomal aberrations )，导致控制细胞生长或抑制的一些基因功能发生改变。葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulatedprotein78, GRP78),又名70千道尔顿热 休克蛋白5 (heat shock 70kDa protein 5， HSPA5本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测原发性肝细胞癌的易感基因的荧光定量ＰＣＲ基因分型方法，其特征在于，包括如下步骤：　（１）针对ＧＲＰ７８基因第５个内含子ｒｓ４３０３９７位点的多态性，设计ＰＣＲ反应引物和荧光探针；　（２）在反应体系中加入ＰＣＲ反应液和所述 步骤（１）中的ＰＣＲ反应引物、荧光探针；　（３）将所述的步骤（２）得到的混合溶液置于荧光定量ＰＣＲ仪上反应。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱萧，孔祥复，谢丹，王金龙，廖奕佶，童铸廷，武鸿美，朱伟，邓海霞，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]