本发明专利技术涉及抗原结合分子(ABM)。在具体的实施方案中，本发明专利技术涉及对细胞表面或膜结合人CEA特异性的重组单克隆抗体，包括嵌合的、灵长类化的或人源化的抗体或其变体。另外，本发明专利技术涉及编码此类ABM的核酸分子，和包含此类核酸分子的载体和宿主细胞。本发明专利技术进一步涉及用于生成本发明专利技术的ABM的方法，及在疾病的治疗中使用这些ABM的方法。另外，本发明专利技术涉及具有改善的治疗特性的具有经修饰的糖基化的ABM，包括具有升高的Fc受体结合和升高的效应器功能的抗体。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】亲和力成熟的人源化抗CEA单克隆抗体专利技术背景专利
本专利技术涉及抗原结合分子(ABM)。在具体的实施方案中，本专利技术涉及对人癌胚抗原(CEA)特异性的重组单克隆抗体,包括嵌合的、灵长类化的(primatized)或人源化的抗体。另外，本专利技术涉及编码此类ABM的核酸分子，和包含此类核酸分子的载体和宿主细胞。本专利技术进一步涉及用于生成本专利技术的ABM的方法，及在疾病的治疗中使用这些ABM的方法。另夕卜，本专利技术涉及具有改善的治疗特性的具有经修饰的糖基化的ABM，包括具有升高的Fe受体结合和升高的效应器功能，诸如ADCC的抗体。
技术介绍
癌胚抗原(CEA)和抗CEA抗体癌胚抗原(CEA，又称为CEACAM-5或CD66e)是一种具有约180kDa分子量的糖蛋白。CEA是免疫球蛋白超家族的一名成员，并且含有经由糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚与细胞膜连接的 7 个域(Thompson J. A. , J Clin Lab Anal. 5 :344-366,1991)。I 个域包括单一N端Ig可变域和与Ig恒定域同源的6个域(A1-B1-A2-B2-A3-B3) (Hefta L J等，CancerRes. 52 :5647-5655,1992)。人CEA家族含有29种基因，其中18种得到表达7种属于CEA亚组，而11种属于妊娠特异性糖蛋白亚组。认为几个CEA亚组成员拥有细胞粘着特性。认为CEA在先天性免疫中具有作用(Hammarstrom S. , Semin Cancer Biol. 9(2) :67-81 (1999))。由于存在与CEA紧密相关的蛋白质，生成与其它紧密相关蛋白质具有最小交叉反应性的对CEA特异性的抗CEA抗体可以是有挑战的。CEA 早就被鉴定为肿瘤相关抗原(Gold 和 Freedman, J Exp Med. , 121 :439-462,1965 ；Berinstein N. L.，J Clin Oncol. ,20 :2197-2207, 2002)。最初分类为仅在胎儿组织中表达的蛋白质，CEA现在已经在几种正常成年组织中鉴定出。这些组织在起源上主要是上皮的，包括胃肠、呼吸、和泌尿生殖道的细胞，及结肠、宫颈、汗腺、和前列腺的细胞(Nap等，Tumour Biol. ,9(2-3) :145-53,1988 ;Nap 等，Cancer Res. ,52(8) :2329-23339,1992) 上皮起源的肿瘤及其转移含有CEA作为肿瘤相关抗原。虽然CEA自身的存在不指示转化为癌性细胞，但是CEA的分布是指示的。在正常的组织中，CEA —般在细胞的顶端表面上表达(Hammarstr6m S. , Semin Cancer Biol. 9(2) :67-81 (1999)),使得血流中的抗体难以接近它。与正常的组织相反，CEA趋向于在癌性细胞的整个表面上表达(Hammarstrom S.，Semin Cancer Biol. 9 (2) :67-81 (1999))。此表达样式变化使 CEA 在癌性细胞中能被抗体结合。另外，CEA表达在癌性细胞中升高。此外，升高的CEA表达促进升高的细胞间粘着，这可以导致转移(Marshall J.，Semin Oncol.，30(增刊8) =30-6,2003) CEA容易自细胞表面切割，并直接或经由淋巴系统自肿瘤脱落入血流中。由于此特性，已经使用血清CEA的水平作为临床标志物以诊断癌症并筛选癌症，特别地结肠直肠、癌的复发(Goldenberg D M. , The International Journal of Biological Markers, 7 183-188，1992 ;Chau I.等，J Clin Oncol.，22 :1420-1429，2004 ;Flamini 等，Clin CancerRes ；12(23) :6985-6988, 2006)。此特性还为使用CEA作为靶物呈现挑战之一，因为血清CEA结合大多数目前可用的抗CEA抗体，这阻碍它们达到细胞表面上的其靶物，并且限制潜在的临床效果。出于研究目的、作为诊断工具、及出于治疗目的，已经针对CEA生成多种单克隆抗体(例如，Nap 等，Cancer Res. ,52(8) :2329-23339,1992 ；Sheahan 等，Am. J. Clin.Path. 94 :157-164,1990 ；Sakurai 等，J. Surg. Oncol. ,42 :39-46,1989 ；Goldenberg D M.，The International Journal of Biological Markers,7 :183-188,1992 ;Ledermann J A,Br. J. Cancer, 58 :654,1988 ；Ledermann J A, Br. J. Cancer, 68 :69-73,1993 ；Pedley R B等,Br. J. Cancer, 68 :69-73,1993 ；BoxerGM 等，Br. J. Cancer,65 :825-831,1992)。Chester 等 已经自噬菌体展示文库分离出单链抗CEA抗体以在放射性免疫检测和放射性免疫疗法中使用(美国专利No. 5，876，691)，随后将抗体人源化(美国专利No. 7，232，888)。也已经自人噬菌体展示文库分离出抗CEA抗体(美国专利No. 5，872，215)。通过融合NSl (P3/NSl/I-Ag-4-l)骨髓瘤细胞与来自用正常结肠直肠上皮免疫的小鼠的脾细胞来生成小鼠单克隆抗体PR1A3 (Richman P. I.和BodmerW. F. , Int. J. Cancer,39 :317-328,1987)。PR1A3与良好和不良分化的结肠直肠癌两者强烈起反应，并且优于其它结肠直肠上皮反应性抗体，因为其抗原表现为固定至肿瘤，并且不出现在引流肿瘤的正常淋巴结或淋巴系统中(Granowska M.等，Eur. J. Nucl. Med. , 20 :690-698,1989)。例如，PR1A3 与 59/60 例结肠直肠肿瘤起反应(Richman P. I.和 Bodmer ff. F. , Int. J. Cancer, 39 317-328，1987)，而CEA反应性抗体B72. 3仅与75%的结肠直肠肿瘤起反应(Mansi L.等，Int J Rad Appl Instrum B.,16(2) : 127-35,1989)。PR1A3的表位定位显示了抗体靶向CEA分子的B3域和GPI锚(Durbin H.等，Proc.Natl. Scad. Sci. USA, 91 :4313-4317,1994)。因此，PR1A3 抗体仅结合膜结合 CEA,而非可在癌症患者的血流中找到的可溶性CEA形式。由于此结合特性，PR1A3抗体不太可能被血清CEA隔离；相反，它可以靶向癌性细胞上表达的CEA。由PR1A3结合的表位是一种构象表位，不是线性表位，认为它促成PR1A3对可溶性CEA结合的丧失(Stewart等，Cancer ImmunolImmunother,47 :299-06,1本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：TU霍弗，R霍斯，E莫斯纳，P乌马纳，
申请(专利权)人：罗切格利卡特公司，
类型：发明
国别省市：
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