检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的核苷酸序列和试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的核苷酸序列和试剂盒，该检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的核苷酸序列如序列表SEQIDNO：1至SEQIDNO：3所示，其中序列SEQIDNO：1和SEQIDNO：2分别为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的正义引物和反义引物，序列SEQIDNO：3为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的荧光探针。本发明专利技术进一步公开了含有上述引物的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（美洲型）的试剂盒。本发明专利技术所述的试剂盒具有快速、灵敏、特异、稳定、重复性好的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基于TaqMan水解探针荧光RT-PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的核苷酸序列和试剂盒，不仅适用于猪组织样本中猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的准确检测，还可适用于猪活体样本(主要为拭子样品)中猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的检测，可用于动物猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的筛查、出入境检疫等，属于检验检疫领域。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征(porcine!^productive and respiratory syndrome,PRRS)是危害当今养猪业的主要疫病之一，给世界养猪业造成巨大的经济损失。猪繁殖与呼吸综 合征的控制一直是养猪生产国家所面临的艰巨任务，即使在养猪业发达的美国及西欧国家，也是一大难题。在我国，PRRS的危害也日益严重，自1995年传入至今，我国几乎所有的省市都时有PRRS的发生。历年来的流行病学和血清学调查结果表明，在我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的感染率非常高。PRRSV还是猪呼吸道疾病综合征(PRDC)的一个主要原发性病原。在饲养管理水平低、卫生条件差的猪场，常与PCV2、猪肺炎支原体、副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、猪伪本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一组检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的核苷酸序列，其特征在于，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO 1至SEQ ID NO 3所示，其中序列SEQ ID NO 1和SEQ ID NO 2分别为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的正义引物和反义引物，序列SEQ ID N03为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的荧光探针。2.根据权利要求I所述的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的核苷酸序列，其特征在于所述探针序列SEQ ID NO 3的5’端标记报告荧光基团FAM，3’端标记淬灭荧光基团 TAMRA 或 BHQI。3.—种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)的试剂盒，其特征在于，由以下组分组成 1)裂解液； 2)RT-PCR反应液，包括PCR缓冲液、RT缓冲液、MgCL2、dNTP、正义引物、反义引物和荧光探针； 3)反转录酶M-MLV； 4)Taq DNA聚合酶； 5)DEPC 7jC ； 6)阴性对照猪繁殖与呼吸综合征病毒(美洲型)阴性猪组织样品； 7)阳性对照为体外转录的非感染性RNA片段，其对应的DNA序列为序列表SEQIDNo. 4所示的核苷酸序列； 其中，正义引物为序列表SEQ ID No. I所示的核苷酸序列，反义引物为序列表SEQ IDNo. 2所示的核苷酸序列，荧光探针为序列表SEQ ID No. 3所示的核苷酸序列，其5’端标记报告...

【专利技术属性】
技术研发人员：李海花，杨丙田，张向东，葛思娟，杜小迪，
申请(专利权)人：北京森康生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：