一种鸭冠状病毒与番鸭细小病毒快速鉴别试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术具体涉及一种鸭冠状病毒与番鸭细小病毒快速鉴别试剂盒及其检测方法，属于动物检验检疫技术领域。本发明专利技术选择鸭冠状病毒orf 1ab基因编码序列作为靶区域，在多重序列比对的基础上，人工进行鸭冠状病毒引物和探针设计；选择番鸭细小病毒Rep1序列作为靶区域，在多重序列比对的基础上，人工加软件进行番鸭细小病毒引物和探针设计，对设计的鸭冠状病毒和番鸭细小病毒引物探针进行模拟PCR，未发现干扰现象。在对引物探针分别优化的基础上，将两对引物探针置于一个反应体系中，经过优化，组装成快速鉴别鸭冠状病毒和番鸭细小病毒的试剂盒，本发明专利技术的试剂盒具有快速、灵敏、特异的特点，对快速鉴别检测鸭冠状病毒和番鸭细小病毒，进行鸭及其产品检验检疫，减少病毒散播具有重要作用。有重要作用。

【技术实现步骤摘要】
一种鸭冠状病毒与番鸭细小病毒快速鉴别试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术涉及一种鸭冠状病毒与番鸭细小病毒快速鉴别试剂盒及其检测方法，属于动物检验检疫


技术介绍

[0002]鸭冠状病毒感染可以引起鸭冠状病毒性肠炎，也就是平时所说的烂嘴壳，是由冠状病毒引起的病毒性鸭肠炎疾病。鸭冠状病毒性肠炎的主要症状是病鸭出现剧烈腹泻，20日龄前后的鸭发病率较高，甚至凶猛爆发流行。开始少数发病，1
‑
2天后出现死亡高峰，发病率和死亡率几乎100%。由于该病毒具有极强传染性，以水平传播的方式传播，所以对养鸭业危害较大，目前尚无有效治疗药物，只能对症治疗防止继发感染，减少死亡率。
[0003]冠状病毒分为四个属，α、β、γ和δ冠状病毒，α和β冠状病毒主要感染哺乳动物(Hamre and Procknow, 1966; McIntosh et al., 1967; van der Hoek et al., 2004; Vlasova et al., 2011; Lin et al., 2017; Saldanha et al.,本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鸭冠状病毒（Dcov）与番鸭细小病毒（DPV）快速鉴别试剂盒及其检测方法，其特征在于，所述试剂盒采用双重实时荧光（RT
‑
）PCR法，所用引物探针序列为：DcovF如SEQ ID NO.1所示：5
’‑
TATAAYGAGTGTGCCCAAGT
‑3’
DcovR如SEQ ID NO.2所示：5
’‑
TTRGCATAAGCAGTTGTRG
‑3’
DcovP如SEQ ID NO.3所示：5
’
FAM
‑
CCACCTGTAGCAAGAACAGATTCAG
‑
BHQ1 3
’
DPVF如SEQ ID NO.4所示：5
’‑
GGAAAGACCAACATAGCCGAG
‑3’
DPVR如SEQ ID NO.5所示：5
’‑
TACAAACAGACCCCTTACACT
‑3’
DPVP如SEQ ID NO.6所示：5
’
HEX
‑
CATGCTGTACCCTTCTATGGCTG
‑
BHQ1 3
’
。2.一种含有权利要求1所述的探针引物组的试剂盒，其特征在于，包括以下成分：荧光(RT
‑
)PCR反应液、酶混合物、阳性对照、阴性对照中的一种或多种。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光(RT
‑
)PCR反应液由0.5体积浓度为10μmol/L鸭冠状病毒上游引物、0.8体积浓度为10μmol/L的鸭冠状病毒下游引物、0.3体积浓度为10μmol/L的鸭冠状病毒探针、1体积浓度为10μmol/L的番鸭细小病毒上游引物、1体积浓度为10μmol/L的番鸭细小病毒下游引物、0.15体积浓度为10μmol/L的番鸭细小病毒探针、5体积5x缓冲液、3体积浓度为25mmol/L的MgCl2、2体积浓度为2.5mmol/L的dNTP和6.25体积焦碳酸二乙酯处理水组成。4.根据权利3所述的试剂盒，其特征在于，所述的5
×
缓冲液由 pH 9.1 200~400 mM TrisH2SO4、50~150mM(NH4)2SO4、5~30 mM MgSO4、0.01...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏莹，臧京帅，丁凯，游苗苗，
申请(专利权)人：北京森康生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：