本发明专利技术属于总黄酮提取技术领域，提供了一种从紫花苜蓿中提取及分离总黄酮的方法，将紫花苜蓿用粉碎机粉碎，加入去离子水，用碱溶液调节pH，提取数次获得滤液；将滤液加盐酸调节pH，过滤获得沉淀，用去离子水将沉淀冲洗至冲洗液为无色；将沉淀用55-65％乙醇溶液溶解，过滤后收集滤液，将滤液减压浓缩成稠膏；将稠膏溶于60％乙醇，加入去离子水后，用稀NaOH溶液将pH调节，加入大孔树脂吸附；将吸附后的大孔树脂用去离子水冲洗至无色，再用55-65％乙醇将大孔树脂冲洗至无色，加入89-92％乙醇溶液解吸附，将解吸液浓缩干燥，得到含黄酮的棕黄色提取物；该方法成本低廉、操作简单，具有较强的推广与应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于总黄 酮提取
，尤其涉及。
技术介绍
紫花苜蓿是一种多年生豆科植物，具有适应性和生物固氮能力强、产草量高、品质好、适口性好、营养丰富、易于家畜消化等特点，有“牧草之王”美誉。紫花苜蓿中含有多种生物活性成分，如苜蓿皂苷、苜蓿黄酮、苜蓿多糖等。研究表明，黄酮类有药用价值的化合物很多，这些化合物可用于防治心脑血管疾病；许多黄酮类成分具有止咳、祛痰、平喘及抗菌的活性，同时具有护肝、解肝毒、抗真菌、治疗急慢性肝炎、肝硬化及抗自由基和抗氧化作用。除此之外，黄酮类化合物还具有植物雌激素样作用，畜牧业动物生产上，黄酮类化合物的应用能显著提高动物生产性能，提高动物机体抗病力，改善动物机体免疫机能。目前，人们对大豆、银杏叶等植物中的黄酮类化合物的提取和纯化做了大量细致的研究，而对紫花苜蓿该类化合物的提取和纯化的研究很少。据研究，适时收获的苜蓿茎叶干物质中，黄酮含量约为O. 53%。可能由于苜蓿黄酮的种类、分子结构等与其他种类植物不同，故国内外对紫花苜蓿的提取与纯化研究较少，而且沿用传统的工艺提取苜蓿黄酮时，得率少，纯化困难，研究报道所得紫花苜蓿提取物中黄酮含量仅为13. 69%，限制了苜蓿黄酮在生广中的应用和其功能的进一步研究。
技术实现思路
本专利技术提供了，旨在解决现有技术提供的提取苜蓿黄酮的方法，过程复杂，总黄酮产率低，纯化困难，生产成本较高，原料利用率较低的问题。本专利技术的目的在于提供，该方法包括以下步骤步骤一，将紫花苜蓿粉碎，按照固液比I : 25-35的比例加入去离子水，将水溶液加热至90-100°C，然后冷却至30-50°C以下，用碱溶液调节pH至8. 5-9. 5，沸水浴煮30-40min，并不断搅拌，过滤水溶液得到滤渣，将滤渣按照I : 10-20加沸腾的去离子水，经搅拌、过滤处理后获得滤液；步骤二，将滤液加盐酸调节pH为2. 1-2. 3，静置至滤液的上层完全澄清，除去上层清液，经过滤处理后获得沉淀物，用去离子水将沉淀物冲洗至无色，得到酸性沉淀物；步骤三，用55-65 %乙醇溶解酸性沉淀物，经过滤处理后收集滤液，将滤液减压浓缩为稠膏；步骤四，将大孔树脂分别用90%乙醇浸泡48h，用去离子水冲洗至无醇味，用4%盐酸溶液浸泡4h，用去离子水冲洗至中性，用4% NaOH浸泡4h，用去离子水冲洗至中性，在4°C的条件下密封保存；步骤五，稠膏按照4g/150ml的比例溶于60%乙醇，再按照3 : I比例加入去离子水，分别将PH调至5. 1-5. 5，按照lg/10ml的比例将所得样液加入到大孔树脂中，静态吸附12h,每隔2h轻微摇动一次；步骤六，将吸附样液后的大孔树脂用去离子水冲洗至无色，再用55-65%乙醇将大孔树脂冲洗至冲洗液为无色，然后按照lg/10ml的比例加入89-92%乙醇溶液，密封后在25-35°C条件下，在摇床中以50转/分的速度摇动12h，再将解吸液浓缩干燥得到棕黄色提取物。进一步，步骤一中的碱溶液为质量浓度为4%的NaOH溶液。进一步，吸附所用的大孔树脂分别为海D101、DM130。本专利技术提供的从紫花苜蓿中提取及分离总黄酮的方法，将紫花苜蓿用粉碎机粉碎，加入去离子水，用NaOH溶液调节pH，90--10(TC温度下提取数次获得滤液；将滤液加盐酸调节PH至2. 1-2. 3，静止至沉淀完全下沉，过滤获得沉淀，并用去离子水将沉淀冲洗至冲洗液为无色；将沉淀用55-65%的乙醇溶液充分溶解，过滤后收集滤液，将滤液减压浓缩成·稠膏；将稠膏溶于60%乙醇，将此溶液加入去离子水，用稀NaOH溶液将pH调节至5. 1-5. 5，加入上样液；将吸附后的大孔树脂用去离子水冲洗至无色，再用55-65%乙醇将大孔树脂进行冲洗，至冲洗液为无色，加入89-92%乙醇溶液解吸附，将解吸液浓缩干燥，得到黄酮含量在25-30%的棕黄色提取物；该方法成本低廉、操作简单、实用性强，具有较强的推广与应用价值。附图说明图I是本专利技术实施例提供的从紫花苜蓿中提取与分离总黄酮的方法的实现流程图。具体实施例方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步的详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定专利技术。图I示出了本专利技术实施例提供的从紫花苜蓿中提取与分离总黄酮的方法的实现流程。该方法包括以下步骤在步骤SlOl中，将紫花苜蓿粉碎，按照固液比I : 25-35的比例加入去离子水，将水溶液加热至90-100°C，然后冷却至30-50°C以下，用碱溶液调节pH至8. 5-9. 5，沸水浴煮30-40min，并不断搅拌，过滤水溶液得到滤渣，将滤渣按照I : 10-20加沸腾的去离子水，经搅拌、过滤处理后获得滤液；在步骤S102中，将滤液加盐酸调节pH为2. 1-2. 3，静置至滤液的上层完全澄清，除去上层清液，经过滤处理后获得沉淀物，用去离子水将沉淀物冲洗至无色，得到酸性沉淀物；在步骤S103中，用55-65%乙醇溶解酸性沉淀物，经过滤处理后收集滤液，将滤液减压浓缩为稠膏；在步骤S104中，将大孔树脂分别用90%乙醇浸泡48h，用去离子水冲洗至无醇味，用4%盐酸溶液浸泡4h,用去离子水冲洗至中性,用4% NaOH浸泡4h,用去离子水冲洗至中性，在4°C的条件下密封保存；在步骤S105中，稠膏按照4g/150ml的比例溶于60%乙醇，再按照3 I比例加入去离子水，分别将PH调至5. 1-5. 5，按照lg/10ml的比例将所得样液加入到大孔树脂中，静态吸附12h，每隔2h轻微摇动一次；在步骤S106中，将吸附样液后的大孔树脂用去离子水冲洗至无色，再用55-65%乙醇将大孔树脂冲洗至冲洗液为无色，然后按照lg/10ml的比例加入89-92%乙醇溶液，密封后在25-35°C条件下，在摇床中以50转/分的速度摇动12h，再将解吸液浓缩干燥得到棕黄色提取物。在本专利技术实施例中，步骤SlOl中的碱溶液为质量浓度为4%的NaOH溶液。在本专利技术实施例中，吸附所用的大孔树脂分别为海D101、DM130。 下面结合附图及具体实施例对本专利技术的应用原理作进一步描述。本专利技术实施例提供的从紫花苜蓿中提取与分离总黄酮的方法，该方法包括以下步骤将紫花苜蓿粉碎，按照固液比I : 25-35的比例加入去离子水，水溶液加热至90-100°C，然后冷却至30-50°C以下，分别用碱溶液调节pH至8. 5-9. 5，沸水浴煮30_40min，并不断搅拌，然后过滤；将滤渣按照I : 10-20加沸腾的去离子水，然后搅拌、过滤，到得滤液；将所述滤液加盐酸调节pH2. 1-2. 3，静置至上清液完全澄清，弃上清，过滤沉淀物，用去离子水将沉淀物冲洗至无色，得到酸沉淀物；将沉淀物用55-65%乙醇溶解沉淀物；过滤，收集滤液，减压浓缩为稠膏；将大孔树脂分别用90%乙醇浸泡48h，用去离子水冲洗至无醇味，用4%盐酸溶液浸泡4h，用去离子水冲洗至中性，用4% NaOH浸泡4h，用去离子水冲洗至中性，在4°C的条件下保存密封备用；将制备的稠膏按照4g/150ml的比例溶于60%乙醇，然后按照3 I比例加入去离子水，分别将PH调至5. 1-5. 5，按照lg/10ml的比例加入上样液，吸附所用的大孔树脂分别为 海本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种从紫花苜蓿中提取与分离总黄酮的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤 步骤一，将紫花苜蓿粉碎，按照固液比I : 25-35的比例加入去离子水，将水溶液加热至90-100°C，然后冷却至30-50°C以下，用碱溶液调节pH至8. 5-9. 5，沸水浴煮30_40min，并不断搅拌，过滤水溶液得到滤渣，将滤渣按照I : 10-20加沸腾的去离子水，经搅拌、过滤处理后获得滤液； 步骤二，将滤液加盐酸调节PH为2. 1-2. 3，静置至滤液的上层完全澄清，除去上层清液，经过滤处理后获得沉淀物，用去离子水将沉淀物冲洗至无色，得到酸性沉淀物； 步骤三，用55-65 %乙醇溶解酸性沉淀物，经过滤处理后收集滤液，将滤液减压浓缩为稠膏； 步骤四，将大孔树脂分别用90%乙醇浸泡48h,用去离子水冲洗至无醇味,用4%盐酸溶液浸泡4h,用去离...
【专利技术属性】
技术研发人员：王成章，文开新，严学兵，史莹华，樊文娜，杜红旗，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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