生产3-羟基丙酸和4-羟基丁酸的共聚物的重组菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种产3-羟基丙酸和4-羟基丁酸的共聚物的重组菌及其应用。该重组菌的构建方法，是将1，3-丙二醇脱氢酶编码基因、醛脱氢酶编码基因、3-羟基丙酸辅酶A连接酶编码基因、4-羟基丁酸辅酶A转移酶编码基因和PHA聚合酶编码基因导入出发菌，得到重组菌。本发明专利技术的工程菌在500mL容积摇瓶中生产后，P(3HP-co-4HB)的产量最高可达6.2g/L，P(3HP-co-4HB)最高可达细胞干重的63％。本发明专利技术生产工艺简单，开生产的聚合物其热力学性能可以通过调节3HP和4HB的比例实现变化；应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生产3-羟基丙酸和4-羟基丁酸的共聚物(P(3HP-CO-4HB))的重组菌及其应用。
技术介绍
利用代谢工程技术改造微生物已成为一种行之有效的方法来生产化学产品以及新型的生物材料。聚轻基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates或PHA)是ー类在微生 Fuchtenbusch, B. ,1998. Bacterial and other biological systems for polyesterproduction. Trends Biotechnol. 16,419-427.)。随着对其深入的研究,聚轻基脂肪酸酯在环保材料、生物医学和生物能源方面将极具应用价值。根据单体的结构组成，PHA可分为短链和中长链两类前者的単体组成为C3到C5，后者的単体组成为C6到C14。3-羟基丙酸和4-羟基丁酸的共聚物(P(3HP-co-4HB))是ー种新型的生物可降解高分子聚合物，属于短链共聚物的ー种，之前报道的利用生物技术生产出的此聚合物中4-羟基丁酸的含量均低于 2mol% (Zhou, Q.，Shi，Z. Y.，Meng, D. C.，Wu, Q.，Che本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.产3-羟基丙酸和4-羟基丁酸的共聚物的重组菌的构建方法，包括如下步骤将1，3_丙ニ醇脱氢酶编码基因、醛脱氢酶编码基因、3-羟基丙酸辅酶A连接酶编码基因、4-羟基丁酸辅酶A转移酶编码基因和PHA聚合酶编码基因导入出发菌，得到重组菌。2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于所述1，3-丙ニ醇脱氢酶的氨基酸序列为序列表中序列8 ;所述醛脱氢酶的氨基酸序列为序列表中序列9 ;所述3-羟基丙酸辅酶A连接酶的氨基酸序列为序列表中序列10 ;所述PHA聚合酶的氨基酸序列为序列表中序列11 ；所述4-羟基丁酸辅酶A转移酶的氨基酸序列为序列表中序列12。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述1，3-丙ニ醇脱氢酶基因的核苷酸序列为序列表中序列I ;所述醛脱氢酶基因的核苷酸序列为序列表中序列2 ;所述3-羟基丙酸辅酶A连接酶编码基因的核苷酸序列为序列表中序列3 ;所述PHA聚合酶编码基因的核苷酸序列为序列表中序列4 ;所述4-羟基丁酸辅酶A转移酶编码基因的核苷酸序列为序列表中序列5 ;所述出发菌为大肠杆菌,优选为Escherichia coliS17_l。4.根据权利要求I或2或3所述的方法，其特征在于 所述1，3_丙ニ醇脱氢酶编码基因和所述醛脱氢酶编码基因通过重组载体A导入所述出发菌中； 所述3-羟基丙酸辅酶A连接酶编码基因、4-羟基丁酸辅酶A转移酶编码基因和所述PHA聚合酶编码基因通过重组载体B导入所述出发菌中； 所述重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈国强，孟德川，周琴，石振宇，吴琼，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：