一种重组人IgE受体蛋白的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开一种重组人IgE受体蛋白的制备方法及应用，涉及生物工程领域和血液净化技术。其通过基因重组技术高表达与IgE有高结合力的受体FcεRIα-D2，纯化得到重组蛋白并将其作为一种吸附剂的配基，固定于固相载体上制备得的吸附剂可用于高亲和力结合IgE。本发明专利技术解决了血液净化技术去除IgE领域现有技术所存在的安全性低和成本较高的问题。在利用血液净化技术去除过敏反应病人血液中过量的IgE，治疗由IgE介导的过敏反应及IgE的纯化方面等方面有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程领域，具体涉及一种血液净化吸附剂配基一重组人IgE受体蛋白Fe ε RI α链的胞外二区(Fe ε RI a -D2)的表达制备，及其在血液净化领域和抗体纯化等方面的应用。
技术介绍
变态反应有着极大的发病人群，正影响着超过世界总人口数的25%。其中I型变态反应(Allergic inflammation, Al)又称速发型过敏反应,是由IgE引起的一种免疫系统疾病，如临床常见的过敏性哮喘、过敏性荨麻疹、过敏性鼻炎和青霉素引起的过敏性休克坐 寸ο过敏反应发生机制是变应原经呼吸道、消化道粘膜和皮肤初次入侵过敏体质机体，刺激机体产生针对变应原的特异性IgE。该抗体Fe段与肥大细胞和嗜碱性粒细胞上Fe受体(Fe ε R)结合，导致其致敏，当致敏的肥大细胞和嗜碱性粒细胞上的IgE再次接触并结合变应原时，会释放出一系列生物活性物质，导致呼吸道、消化道及皮肤发生过敏反应，危急时会出现过敏性休克，如不及时抢救则有生命危险。一系列研究发现患者的过敏反应程度与IgE抗体浓度的升高密切相关，易发生急性过敏反应的人群相对于非过敏人群血液中IgE浓度高很多。过敏反应发生时，患者体内的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种受:体蛋白的重组表达质粒，其特征在于，将核昔酸序列为SEQ ID NO :1的基因片段连接入质粒PET 23a中。2.利用权利要求I所述的重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)得到的重组菌株。3.利用权利要求2所述的重组菌株表达制备重组蛋白的方法，其特征在于包括如下步骤将核苷酸序列为SEQ ID NO 1的基因片段连接入质粒pET 23a中；用该重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主细胞，经过培养、筛选得到能够表达重组蛋白的重组菌株；培养该菌株，用诱导剂IPTG诱导重组蛋白的表达；将所得的胞内重组蛋白包涵体经初步纯化、变性和复性、分离纯化后制得重组蛋白。4.根据权利要求3所述的表达制备重组蛋白的方法，其特征在于所述的初歩纯化是将发酵液离心所得细胞用裂解液37°C下裂解20min后，超声破碎，离心收集包涵体，清洗包涵体；其中，裂解液pH为8. O，含有O. OlM Tris-HCUO. 06M NaCl和02mg/mL溶菌酶。5.根据权利要求3所述的表达制备重组蛋白的方法，其特征在干，所述的包涵体变性方法为包涵体用变...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾凌云，滕婷婷，徐丽，任军，谢健，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：