本发明专利技术属于药物化学技术领域，公开了一种艾替班特的制备方法。本发明专利技术所述艾替班特的制备方法包括以下步骤：1)由Fmoc-Arg(Pbf)-OH和替代度为0.5～1.0mmol/g的2-氯三苯甲基氯树脂出发，得到Fmoc-Arg(Pbf)-CTC树脂；2)将Fmoc-Arg(Pbf)-CTC树脂采用逐一偶联的方式合成得到艾替班特-CTC树脂；3)对艾替班特-CTC树脂进行裂解得到艾替班特粗肽，纯化得到艾替班特。与现有技术相比，本发明专利技术所述制备方法操作简单、原料投入少、成本低艾替班特收率高，适合于大规模产业化生产，并且制得的艾替班特纯度高、杂质含量低，具有可观的经济实用价值和广泛的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物化学
，尤其涉及。
技术介绍
遗传性血管水肿(hereditary angioedema, HAE)又称Cl抑制物缺乏症，是罕见的由遗传缺陷引起的常染色体显性遗传病，是由于一种称为Cl抑制剂的蛋白水平低或功能障碍引起的，发病率为1/10000-1/50000。HAE其特征是不可预知的手、脚、脸、喉头和腹部的发作性水肿和肿胀，导致毁容、失能或死亡。如喉部肿胀能导致窒息，消化道水肿可引起腹痛、恶心和呕吐，肠道肿胀患者经常会出现胃部严重疼痛，恶心和呕吐。病人通常有该病的家族史。HAE病人可出现手、足、四肢、面部、肠道、喉头或气管的快速水肿，这可能而呼吸道水肿则使病人有窒息的危险。艾替班特，英文名Firazyr，是由Shire公司研发的HAE专治药物，于2011年8月 25日获FDA批准用于18岁及以上成年人的遗传性血管水肿急性发作治疗，也是FDA批准的第3个用于治疗HAE发作的药物。艾替班特有相似于缓激肽的结构d合成十肽，但是，其中有5个非蛋白源的氨基酸。艾替班特的所有手性氨基酸是L-构型除了精氨酸(位1)和 1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(位8)，其分子式为C59H89N19O13S,分子量为1304. 5，十个氨基酸顺序组成如下H-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OHo艾替班特是一种强力的选择性的缓激肽2型(B》受体的选择性竞争性拮抗剂，通过抑制与HAE的栓塞局部肿胀、炎症、疼痛症状有关的缓激肽的影响而治疗急性HAE的栓塞局部肿胀。HAE只是艾替班特可能治疗的几种适应症的第一个，其他潜在适应症还有哮喘、 肝硬化和其他类型的血管性水肿。所以说艾替班特具有很高的药用价值和广阔的市场前景。然而现有的艾替班特的制备方法仍旧主要沿用1990年左右，由德国赫切斯特股份公司专利技术的固相合成方法，该方法制得的艾替班特产品纯度低、杂质含量高、收率低，不适合产业化生产，应用价值低。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的是针对现有技术的缺陷，提供， 所述制备方法艾替班特的收率高，制得的艾替班特的杂质含量低、纯度高，适合于产业化生产。为实现本专利技术的目的，本专利技术采用如下技术方案，包括以下步骤1)由Fmoc-Arg (Pbf) -OH和替代度为0. 5 1. OmmoΙ/g的2-氯三苯甲基氯树脂出发，得到 Fmoc-Arg (Pbf) -CTC 树脂；2)将Fmoc-Arg(I^bf)-CTC树脂采用逐一偶联的方式合成得到艾替班特-CTC树脂；3)最后对艾替班特-CTC树脂进行裂解得到艾替班特粗肽，纯化得到艾替班特。优选的，所述艾替班特的制备方法步骤1)所述Fmoc-Arg (Pbf) -CTC树脂是 Fmoc-ArgO^fO-OH与2-氯三苯甲基氯树脂在碱性条件的作用下生成的。具体的是2-氯三苯甲基氯树脂经过DMF或DCM浸泡溶胀，然后加入Fmoc-Arg (Pbf) -0H,在碱性条件的作用下反应制得Fmoc-Arg(I^bf)-CTC树脂。其中，所述碱性条件的作用优选为二异丙基乙胺的作用。进一步的，所述2-氯三苯甲基氯树脂的替代度优选为0. 8 1. Ommol/g，更优选为 0.9mmol/g0本专利技术所述制备方法步骤2~)通过多肽固相合成法采用从C端向N端逐一偶联的方式从Fmoc-Arg (I^bf)-CTC树脂N端逐个加入氨基酸合成艾替班特-CTC树脂。其中，所述逐一偶联方式所使用的偶联剂优选为二异丙基碳二亚胺和化合物A混合物或化合物A、 化合物B和化合物C的混合物，其中所述化合物A为1-羟基苯并三唑或1-羟基-7-偶氮苯并三唑，所述化合物B为0-苯并三唑-N，N, N, N-四甲基脲鐺六氟磷酸盐、0-(7-偶氮苯并三氮唑-1-氧)-N, N, N, N-四甲基脲鐺六氟磷酸盐、2- (7-氮杂苯并三氮唑)-N，N，N'， N'-四甲基脲四氟硼酸盐、0-(苯并三唑-1-氧)-N，N，N，N-四甲基脲鐺六氟硼酸盐或(苯并三唑-1-氧)三吡咯烷子基磷鐺六氟磷酸盐，所述化合物C为二异丙基乙胺或2，4，6-三甲基吡啶。进一步地，上述二异丙基碳二亚胺和化合物A的混合物中二异丙基碳二亚胺与化合物A的物质的量比优选为1 1 1.5 1，更优选为1.3 1。进一步地，上述化合物A、化合物B和化合物C的混合物中化合物A与化合物B和化合物C的物质的量优选比为1 1.5 1 1，更优选为1.2 1 1。本专利技术所述逐一偶联的Fmoc保护基团的氨基酸分别为Fmoc-Oic-OH、 Fmoc-D-Cit-0H> Fmoc-Ser (tBu)-0H> Fmoc-Thi-OH> Fmoc—Gly—OH、 Fmoc-Hyp (tBu)-0H> Fmoc-Pro-0H、Fmoc-Arg(Pbf)-OH 禾口 Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH。本专利技术所述制备方法步骤幻通过裂解剂对艾替班特-CTC树脂进行裂解，得到艾替班特粗肽。其中，所述裂解剂优选为三氟乙酸、三异丙基硅烷和水的混合物。进一步地，上述裂解剂中三氟乙酸与三异丙基硅烷和水的体积比为90 95 3 5 2 5，更优选为95 3 2。本专利技术所述制备方法步骤幻裂解得到的艾替班特粗肽进一步纯化得到艾替班特，所述纯化优选为反相高效液相色谱纯化。反相高效液相色谱，英文名 reversed phase high performance liquid chromatography,简称，RP-HPLC，是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系。 它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。RP-HPLC 是当今液相色谱的最主要的分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离纯化。本专利技术所述制备方法将步骤3裂解得到的艾替班特粗肽采用反相高效液相色谱法转成醋酸盐溶液。优选的，所述反相高效液相色谱法具体为以反相十八烷基硅烷或八烷基硅烷键合硅胶为固定相，裂解得到的艾替班特粗肽溶液上样后，用0. 醋酸溶液/乙腈流动相转盐，冻干即得。与现有技术相比，本专利技术所述制备方法操作简单、原料投入少、成本低艾替班特收率高，适合于大规模产业化生产，并且制得的艾替班特纯度高、杂质含量低，具有可观的经济实用价值和广泛的应用前景。附图说明图1示本专利技术实施例的制备方法的流程图。 具体实施例方式本专利技术实施例公开了。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。为了进一步理解本专利技术，下面结合实施例对本专利技术进行详细说明。说明书和权利要求书中所使用的缩写的含义列于下表中权利要求1.，其特征在于，包括以下步骤1)由Fmoc-Arg(I^bf)-OH和替代度为0. 5 1. Ommol/g的2-氯三苯甲基氯树脂出发， 得到 Fmoc-Arg (Pbf) -CTC 树脂；2)将Fmoc-Arg(Pbf) -CTC树本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈大来，潘俊锋，马亚平，袁建成，
申请(专利权)人：深圳翰宇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
0来自[北京市联通] 2014年12月29日 21:47顶班指顶替别人当班