一种预防或治疗冠状病毒的多肽及其衍生物的合成方法技术

技术编号：39184766 阅读：18 留言：0更新日期：2023-10-27 08:32

本发明专利技术涉及一种预防或治疗冠状病毒的多肽及其衍生物的合成方法。具体公开了通过引入特殊保护的甘氨酸(Dmb/Hmb/Fmoc

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【技术实现步骤摘要】
一种预防或治疗冠状病毒的多肽及其衍生物的合成方法

[0001]本专利技术属于药物合成领域，具体涉及一种预防或治疗冠状病毒的多肽及其衍生物的合成方法。

技术介绍

[0002]SARS
‑
CoV
‑
2病毒为新冠肺炎疫情的病原体，人感染了冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。
[0003]本专利申请人在先开发的膜融合抑制剂(相应专利申请号为202111675955.3)，作用机理是与SARS
‑
CoV
‑
2病毒表面刺突蛋白(Spike protein)HR1区域结合，阻止刺突蛋白中6螺旋束结构的形成，抑制病毒与细胞间的膜融合，阻断病毒进入细胞的过程，实现对冠状病毒导致的肺炎的预防和治疗。膜融合抑制剂肽序如下表1：
[0004][0005]虽然采用常规的固相或液相合成方法能够获得上述多肽衍生物，但是在实验过程中发现如果采用常规的保护氨基酸进行固相逐步偶联，C端Gly
‑
Ser
‑
Gly
‑
Ser
‑
Gly
‑
Cys序列由于分子间氢键的作用易于聚集，导致不但前10个氨基酸偶联困难，而且后续氨基酸偶联愈加困难，合成的粗肽的纯度较差、收率低、工业化生产成本高。

技术实现思路

[0006]针对上述合成问题，本专利技术提供了一种新的合成方法，该方法通过...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽的合成方法，其特征在于，所述多肽具有以下序列：H
‑
Val1‑
AA1
‑
AA2
‑
Gly
‑
Asp5‑
Ile
‑
Ser
‑
Gly
‑
Ile
‑
Asn
10
‑
Ala
‑
Ser
‑
Val
‑
Val
‑
Asn
15
‑
Ile
‑
AA3
‑
AA4
‑
Glu
‑
Ile
20
‑
Asp
‑
Arg
‑
Leu
‑
AA5
‑
Glu
25
‑
Val
‑
AA6
‑
Lys
‑
Asn
‑
Leu
30
‑
Asn
‑
Glu
‑
Ser
‑
Leu
‑
Ile
35
‑
Asp
‑
Leu
‑
Gln
‑
Glu
‑
Leu
40
‑
Gly
‑
Ser
‑
Gly
‑
Ser
‑
Gly
45
‑
Cys
‑
OH；其中AA1选自Asp或Lys；AA2选自Leu或Phe；AA3选自Gln或Lys；AA4选自Lys或Glu；AA5选自Asn或Tyr；AA6选自Ala或Val；所述合成方法包括以下步骤：采用固相合成的方法，在固相合成树脂上依次偶联多肽自C端至N端的氨基酸，然后裂解树脂同时去除氨基酸保护基；其中偶联多肽第41、43或45位中的一个或多个甘氨酸时，选择以Fmoc、Dmb、Fmoc
‑
Dmb、Hmb、Fmoc
‑
Hmb中的任意一种或多种保护基保护的氨基酸，和或偶联所述多肽序列的第42位和或第44位丝氨酸时，选自以Fmoc保护氨基，且以Trt保护侧链的丝氨酸；优选第44位丝氨酸时，选自以Fmoc保护氨基，且以Trt保护侧链的丝氨酸。2.权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述合成方法包括以下步骤：S01)在固相合成树脂上依次偶联Fmoc保护基保护的氨基酸，然后脱除Fmoc保护基，继续重复偶联Fmoc保护基保护的氨基酸，然后脱除Fmoc保护基的步骤，直至完成所有氨基酸的合成；获得肽树脂；S02)将步骤S01)所得的肽树脂裂解得到线型粗肽；S03)纯化线性粗肽，获得精制多肽。3.权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤S01)中偶联的条件为在缩合剂的条件下进行缩合，优选地，所述缩合剂选自HBTU和DIEA的组合、HATU和DIEA的组合、HBTU和HOBt以及DIEA的组合、HCTU和NMM的组合、HATU和HOAt以及DIEA的组合、TBTU和DIEA的组合、HOBt和DIC的组合、HOAt和DIC的组合、Cl
‑
HOBt和DIC的组合、PyBOP和HOBt以及DIEA的组合、PyAOP和HOBt以及DIEA的组合，或Oxyma和DIC的组合中的一种或多种。4.权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤S01)中依次偶联的Fmoc保护基保护的氨基酸中，Asp及Glu的侧链保护基选自OtBu；Gln及Asn的侧链保护基选自Trt；除第42位和或第44位以外的Ser的侧链保护基选自tBu、Trt；Lys的侧链保护基选自Boc、Mmt、Mtt；Arg的侧链保护基选自Pbf；Cys的侧链保护基选自Trt、Mmt。5.权利要求1所述的合成方法，其特征在于，在步骤S01)中，偶联多肽第41
‑
45位氨基酸时选用的氨基酸为：Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、
Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者
Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑‑
Hmb Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Hmb Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
Hmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Hmb
‑
Gly
41
‑
OH；或者Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
45
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(tBu)
‑
OH、Fmoc
‑
Dmb
‑
Gly
‑
OH、Fmoc
‑
Ser(Trt)
‑
OH、Fmoc
‑
N
‑
Dmb
‑
Gly
41
‑
OH。6.权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述多肽序列选自H
‑
Val1‑
Asp
‑
Leu
‑
Gly
‑
Asp5‑
Ile...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶志强，尹传龙，唐洋明，余品香，
申请(专利权)人：深圳翰宇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：

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