【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物化学，尤其涉及一种精肽的分离方法。
技术介绍
1、多肽类产品由于性质不稳定，常规情况下原料药(api)多以固体形式进行保存。其制备过程一般采用常规的分离、干燥方法：先利用制备色谱纯化、然后进行冻干分离的过程得到固体。其中冻干虽然具有诸多优势，例如所得产品性状易于溶解，但是其工艺过程中能耗较高，周期较长，且设备依赖性大，规模化受限，产量受限于冻干机的规模。
2、例如利那洛肽(linaclotide)是由美国ironwood开发的一种gc-c(肠上皮细胞尿苷酸环化酶c)受体激动剂，用于治疗成人慢性特发性便秘和便秘型肠易激综合症(ibs-c)，商品名为linzess。由14个氨基酸组成，包括3对二硫键连接的6个半胱氨酸残基，其具体肽序如下：
3、
4、目前，利那洛肽主要通过固相合成技术得到。对于利那洛肽的传统分离方式是采用制备色谱纯化、然后冻干分离的过程实现。其中冻干虽然具有诸多优势，例如所得产品性状较易于溶解，但是其工艺耗时且设备依赖性大，规模化受限并且能耗高，周期长且产量受限于冻干机的规模。并且利那洛肽在水溶液中溶解度较差，需要高浓度的有机相，高比例有机相增加冻干难度，且较大的冻干体积往往需要几次冻干的操作才能到达较低的异丙醇含量和水含量。而利那洛肽在制剂研究时，采用较高浓度盐酸溶液提前溶解原料药，说明该产品对于原料药的粒径等要求不高，因此冻干产品的性状优势并没有实际意义。
技术实现思路
1、针对上述技术问题，本专利技术提供一种精
2、为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
3、本专利技术提供一种精肽的分离方法，包括如下步骤：
4、将精肽溶液沉淀析出后再进行减压干燥；所述精肽溶液为通过化学合成所得的粗肽经过纯化后得到的精肽溶液。
5、在本专利技术的技术方案中，所述精肽溶液中的肽为水溶性较差的肽，例如利那洛肽、普卡那肽、齐考诺肽、索马鲁肽全保护肽和利拉鲁肽全保护肽等。
6、在某些具体的实施方式中，所述化学合成为本领域常规的合成方法，例如固相合成、液相合成以及固液相合成等。
7、作为优选地实施方式，还包括沉淀析出前对精肽溶液的浓缩；所述浓缩为减压浓缩；
8、优选地，所述浓缩为浓缩至原体积的1/2～3/4；
9、在某些具体的实施方式中，所述精肽溶液的浓度为10～40mg/ml；浓缩后的精肽溶液的浓度为20～60mg/ml，优选为30～40mg/ml。
10、作为优选地实施方式，所述沉淀析出的具体操作为向精肽溶液中加入沉淀剂后，搅拌放冷，进行沉淀析出；
11、优选地，加入沉淀剂时的温度控制在0～10℃，加入方式为滴加；
12、优选地，所述搅拌的时间为3～12小时，搅拌的转速为100～300rpm；所述放冷为降温至-10℃～0℃，优选-10℃～-5℃。
13、作为优选地实施方式，所述沉淀剂为水或石油醚，所述沉淀剂的加入量为浓缩后的精肽溶液体积的1～5倍，优选为2～3倍；在本专利技术的技术方案中，所述沉淀剂的种类与多肽的种类有关。
14、作为优选地实施方式，所述减压干燥为真空干燥，真空度为-0.09～0.1mpa；温度为30～50℃，优选35℃；干燥时间为12～40小时，优选12～24小时。
15、作为优选地实施方式，还包括对沉淀的洗涤操作；
16、优选地，所述洗涤为0～5℃的冷水或石油醚洗涤；在本专利技术的技术方案中，所述洗涤与沉淀剂的种类一致。
17、在某些具体的实施方式中，所述通过化学合成所得的粗肽经过纯化后得到精肽溶液具体包括以下步骤：
18、1)色谱制备纯化：将粗肽溶液进行一次纯化，以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以碳酸氢铵水溶液为流动相a1，以乙腈为流动相b进行梯度洗脱；将一次纯化得到的馏分进行二次纯化，以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以磷酸水溶液为流动相a2，以乙腈为流动相b，进行梯度洗脱；
19、2)转盐：将步骤一得到的馏分，以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以醋酸溶液为流动相a3，以有机溶剂为流动相b进行梯度洗脱，进行转盐，收集洗脱组分得精肽溶液。
20、作为优选地实施方式，步骤1)中，所述碳酸氢铵水溶液的浓度为80mm；
21、优选地，所述磷酸水溶液的浓度为4‰；
22、优选地，所述磷酸水溶液的ph为2.70±0.2；在某些具体的实施方式中，所述磷酸水溶液的ph用氨水进行调节。
23、作为优选地实施方式，步骤2)中，所述有机溶剂选自乙腈、乙醇、甲醇、和异丙醇中的任意一种，进一步优选为异丙醇；
24、优选地，所述醋酸水溶液的浓度为0.5‰～1.5‰，进一步优选为1‰；
25、优选地，所述醋酸水溶液占所述醋酸水溶液和有机溶剂的体积百分比为40～60％。
26、上述技术方案具有如下优点或者有益效果：
27、(1)本专利技术提供的固液分离方法采用沉淀析出和减压干燥的方式，替代多肽类产品常用的冻干工艺，缩短工艺周期，节能环保，并且适宜规模化生产放大；(2)本专利技术提供的分离、干燥方法，得到的精肽固体性状好，堆密度大，便于储存，且解决了溶剂残留的问题，溶剂残留量最少可达130ppm。
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1.一种精肽的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述精肽溶液中的肽选自利那洛肽、普卡那肽、齐考诺肽、索马鲁肽全保护肽和利拉鲁肽全保护肽中的任一种。
3.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，还包括沉淀析出前对精肽溶液的浓缩；所述浓缩为减压浓缩；
4.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述沉淀析出的具体操作为向精肽溶液中加入沉淀剂后，搅拌放冷，进行沉淀析出；
5.根据权利要求4所述的分离方法，其特征在于，所述沉淀剂为水或石油醚，所述沉淀剂的加入量为浓缩后的精肽溶液体积的1～5倍，优选为2～3倍。
6.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述减压干燥为真空干燥，真空度为-0.09～0.1Mpa；温度为30～50℃，优选35℃；干燥时间为12～40小时，优选12～24小时。
7.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，还包括对沉淀的洗涤操作；
8.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述通过化学合成所得的粗肽经过纯化后得到精肽溶
9.根据权利要求8所述的分离方法，其特征在于，步骤1)中，所述碳酸氢铵水溶液的浓度为80mM；
10.根据权利要求8所述的分离方法，其特征在于，步骤2)中，所述有机溶剂选自乙腈、乙醇、甲醇、和异丙醇中的任意一种，进一步优选为异丙醇；
...【技术特征摘要】
1.一种精肽的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述精肽溶液中的肽选自利那洛肽、普卡那肽、齐考诺肽、索马鲁肽全保护肽和利拉鲁肽全保护肽中的任一种。
3.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，还包括沉淀析出前对精肽溶液的浓缩；所述浓缩为减压浓缩；
4.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述沉淀析出的具体操作为向精肽溶液中加入沉淀剂后，搅拌放冷，进行沉淀析出；
5.根据权利要求4所述的分离方法，其特征在于，所述沉淀剂为水或石油醚，所述沉淀剂的加入量为浓缩后的精肽溶液体积的1～5倍，优选为2～3倍。
6.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：袁慧星，何英，尹传龙，唐洋明，余品香，
申请(专利权)人：深圳翰宇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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