现场用快速免疫检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种现场用快速免疫检测试剂盒及其检测方法。本发明专利技术属于免疫检测技术领域。现场用快速免疫检测试剂盒，包括测试板，反应液，液滴瓶，阳性对照和阴性对照，试纸条。现场用快速免疫检测试剂盒的检测方法，包括：在测试板不同反应槽内加入反应液；再在不同反应槽内分别加入阳性对照、阴性对照和待测样品；再放入试纸条进行孵育显色，或孵育好的试纸条漂洗后转移到显色槽显色；比较试纸条上阳性对照、阴性对照和待测样品的色带深浅程度以确定该被检样品是阳性还是阴性。本发明专利技术具有检测高效、便捷、一次实验正确界定检测结果的有效性和半定量地界定被检样品中目标分子浓度等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫检测
，特别是涉及一种。
技术介绍
目前，现行的竞争法免疫层析检测试纸条制作时，在支持板(如PVC板)上依次粘贴有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫等。在硝酸纤维素膜上划线包被1条抗原线作为检测线(T线)，在其下游包被1条二抗线用予捕获抗体线作为参考线。然后依次粘贴样品垫、金标垫、吸水垫，即组合为快速检测试纸。检测时，于样品垫上滴加水溶液样品，5 IOmin内观察颜色。若检测线呈现红颜色，表明样品为阴性；若检测线不显色，表明样品为阳性。无论样品是阴性还是阳性，参考线应该显色，若参考线不显色，表明该试纸失效。现行的竞争法免疫层析检测试纸条是“单份”测定而且试纸条上的质控线(C线) 实际上是测定一抗的存在，至于一抗有否失活是测不出来的。假如，待测样品中目标物不存在(阴性)，而金标抗体失活不能和T线上包埋的抗原结合但照样会被C线上的二抗捕获显色而得出阳性结果。而实际上是因试纸条失效而显示的假阳性。相反，假如待测样品中目标物存在，但质控线C线上捕获抗体(二抗)失活而金标抗体正常，那么金标抗体和目标物结合后不能和T线上包埋的抗原结合(这是正常阳性情景)但由于不能与C线上失活的捕获蛋白/抗体结合显色而得出试纸条失效的结论。而实际上应该是阳性。因此现行的竞争法免疫层析检测试纸条的质控线(C线)的结果不能完全用于评价试纸条质量的好坏。
技术实现思路
本专利技术为解决公知技术中存在的技术问题，而提供一种。本专利技术公开一种现场用竞争法免疫检测试剂盒。该试剂盒包括一个三反应槽测试板或多反应槽测试板，样品稀释液反应液，液滴瓶，一组阳性对照和阴性对照，试纸条和显色液。测试板含有三个或三个以上反应槽的成形板。可用于同时测定阳性对照，阴性对照以及一个或一个以上的待测样品。测试板是具有固定形状可盛装液体、常温常压下化学性质稳定不与待测的样品及检测系统中的物质发生化学反应的成形板。该测试板可以是一次性使用的也可以是经洗涤后可多次使用的。该测试板的反应槽可以是卧式排列，也可以是立式排列。测试板是一个含有三个或三个以上反应槽的塑胶板(比如聚苯乙烯)或纸质板。反应液含有预先标记好的可特异性地识别待测分子的抗体。该特异抗体的标记可以是胶体金，酶(如过氧化氢酶，碱性磷酸酶)，荧光分子或其它有助于直接或间接地测试被标记抗体的分子。试纸条含有预先包埋好的抗原分子或半抗原偶联分子。该抗原或半抗原是可以被所述的反应液中含有的抗体所识别的分子。也可以是能与待测分子竞争性地与所述反应液中的抗体相结合的分子。阳性对照和阴性对照试剂盒中的至少有一个已知浓度的阳性对照其所含的待测目标分子的浓度正好是临床需求或产品质量要求上的界限浓度。比如含有1微克/毫升三聚氰胺的牛奶。因此，这样的阳性对照可以用于直观地比较测定样品是否超标。试剂盒中的至少有一个不含待测目标分子的阴性对照。比如不含三聚氰胺的牛奶。这样通过比较阴性对照、阳性对照和定测定样品的显色程度可以校准确地界定测定样品所含的待测目标分子的浓度范围，并可用于判定检测系统本身有否失效。试剂盒中的可以有一个以上不同浓度的阳性对照组最好其中有一个对照所含的待测目标分子的浓度正好是临床需求或待测产品质量要求上的界限浓度。比如含有1微克/毫升三聚氰胺的牛奶。这样的一组阳性对照组可以用于半定量测定样品中待测目标分子的浓度。显色液是可以根据稀释液中的特异抗体的标记来配套的。滴瓶滴瓶的口配有一套盖子内盖和外盖。内盖是有通道的盖，通道上装有一虑膜的以防止细菌进入瓶内，同时在使用瓶内液体时防止瓶内沉淀物被挤出造成浓度不均，也防止液体逆流，所述虑膜的孔径在0. I-IOu之间；外盖是可以盖在内盖上的盖子以防液体蒸发而改变瓶内液体浓度。试剂盒中的反应液、阳性对照液、阴性对照夜，待测样品液、稀释液和显色液是分别装在相同规格的滴瓶里，这样可根据挤出液体的滴数来确定其添加量。所述滴瓶的口径控制在一定的范围，比如每滴50微升误差不超过+/-3微升。本专利技术的目的之一是提供一种具有结构简单，使用方便，检测效率高，实现在一次实验中同时测定未知浓度的样品和已知浓度的阳性对照和阴性对照以便正确地界定检测结果和有效性，便捷进行半定量地界定被检样品中所含目标分子的浓度等特点的现场用快速免疫检测试剂盒。本专利技术现场用快速免疫检测试剂盒为解决现有技术问题所采取的技术方案是一种现场用快速免疫检测试剂盒，其特点是试剂盒包括一个测试板，反应液，液滴瓶，一组阳性对照和阴性对照，试纸条。本专利技术现场用快速免疫检测试剂盒还可以采用如下技术措施所述的现场用快速免疫检测试剂盒，其特点是试剂盒还包括洗涤液，显色液和塑料吸管。所述的现场用快速免疫检测试剂盒，其特点是测试板为三反应槽测试板或多反应槽测试板；测试板具有固定形状可盛装液体，常温常压下化学性质稳定不与待测的样品及检测系统中的物质发生化学反应的成形板。所述的现场用快速免疫检测试剂盒，其特点是测试板有反应槽、显色槽和洗涤槽。所述的现场用快速免疫检测试剂盒，其特点是测试板上槽的排列方式是卧式排列或立式排列；测试板上的槽是固定型或可拆撤型设置。所述的现场用快速免疫检测试剂盒，其特点是液滴瓶的滤膜孔径为0. I-IOu0所述的现场用快速免疫检测试剂盒，其特点是液滴瓶的内盖的外形为圆柱形或锥形，外盖的内侧形状与内盖的外形相一致。所述的现场用快速免疫检测试剂盒，其特点是液滴瓶的口径一致，每滴液40-60 微升，误差小于3微升。本专利技术的目的之二是提供一种操作便捷，检测效率高，在一次现场用竞争法免疫检测实验中，同时测定未知浓度的样品和已知浓度(一个或一组)的阳性对照和阴性对照， 从而能正确地界定检测结果及有效性，或进行半定量地界定被检样品中所含目标分子的浓度等特点的现场用快速免疫检测试剂盒的检测方法。本专利技术现场用快速免疫检测试剂盒的检测方法为解决现有技术问题所采取的技术方案是现场用快速免疫检测试剂盒的检测方法，其特征是检测方法包括以下过程在测试板上的各反应槽中加入反应液；反应液含有预先标记好的可特异性地识别待测分子的抗体；再分别在两个反应槽中加入阳性对照和阴性对照，其它反应槽中加入待测样品， 混勻；然后，取试纸条并标记，分别用于测试阳性对照，阴性对照和待测样品，分别置于测试板上的反应槽中；摇混勻后在室温下进行孵育；取洗涤液或蒸馏水置于洗涤槽，取显色液置于显色槽；当反应液中所含预标记抗体为金标抗体时，孵育直至试纸条上有清晰的色带出现；取出试纸条转移到洗涤槽中漂洗以终止显色；或当反应液中所含预标记抗体为酶标(如过氧化氢酶标记)抗体时，将孵育好的试纸条转移到洗涤槽中，漂洗后转移到显色槽；轻晃或静置显色，直至试纸条上有清晰的色带出现；取出试纸条转移到洗涤槽中漂洗以终止显色；比较试纸条上阳性对照、阴性对照和待测样品的色带深浅程度以确定该被检样品是阳性还是阴性。本专利技术现场用快速免疫检测试剂盒的检测方法还可以采用如下技术措施所述的现场用快速免疫检测试剂盒的检测方法，其特点是试纸条含有预先包埋好的抗原分子或半抗原偶联分子；阳性对照是所含的待测目标分子的浓度正好是临床需求或产品质量要求上的界限浓度；阴性对照是不含待测目标分子的阴性对照。所述的现场用快速免疫检测试剂盒的检测方法，其特点是摇混勻后在室温下进行孵育的时间为10-30分钟。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邹潮，
申请(专利权)人：哈德逊天津生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：