一种RNA的免洗涤预备模板PCR检测方法技术

技术编号:9220637 阅读:198 留言:0更新日期:2013-10-04 15:45
本发明专利技术提供了一种RNA的免洗涤预备模板PCR检测方法,本发明专利技术方法在保留了原预备模板PCR方法的优点,即不需要纯化抽提RNA,不需要进行逆转录反应等优点的基础上,通过整合酶切反应,达到排除各种来源的双链DNA污染的干扰,因此不需要进行洗涤步骤,操作更加简便快速易行,具有良好的RNA检测的灵敏度和特异性,适合对各种来源的样品进行检测。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种RNA的免洗涤预备模板PCR检测方法,所述方法包括:(1)设计合成与目标RNA上任意一段序列互补的长度为25~50mer的单链寡核苷酸DNA,记为探针A;探针A的GC含量为40~60%,解链温度为75~85℃;将探针A锚定在PCR管内,得到锚定PCR管;(2)设计合成部分序列与目标RNA上另一段含有限制性内切酶识别位点的序列互补的长度为70~100mer的单链寡核苷酸DNA,其结构为:中间长度为25~50mer与目标RNA上含有限制性内切酶识别位点的区域完全互补的序列,两端为长度20~30mer的PCR引物序列,记为模板探针B;模板探针B的GC含量为40~60%,解链温度为75~85℃,与...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈燃金晓铮
申请(专利权)人:浙江今复康生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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