羽状哈氏豆酸的高效分离纯化方法技术

本发明专利技术公开一种羽状哈氏豆酸的高效分离纯化方法，其方法步骤如下：（1）以富含羽状哈氏豆酸的药材为原料，用乙醇热回流提取，提取液浓缩；（2）将浓缩液用石油醚萃取，取下层水相；（3）将萃取后的水相再用乙酸乙酯萃取，得到萃取液，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物；（4）将萃取物采用高速逆流色谱法分离纯化，收集目标组分减压浓缩，冷冻干燥，得到羽状哈氏豆酸。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药有效成分提取
，涉及一种。
技术介绍
羽状哈氏豆酸(Hardwickiic acid)为二萜类化合物，分子式C2tlH28O3,分子量 316. 44，为白色结晶，mp. 103_104°C，广泛分布于菊科、大戟科、唇形科、豆科、马鞭草科等多种植物中，原料丰富，其中唇形科雷格拉鼠尾草fe/ria regal Cav.的地上部分含量较高， 收率达1. 33%。现代研究表明羽状哈氏豆酸具有杀虫、杀菌、抗真菌等活性，对雌性成虫(豆蚜虫) 在剂量为5ppm/inSect时，M小时候死亡率为62%，对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和耻垢分枝杆菌呈抗菌活性，对白色念珠菌、须发癣菌和长蠕孢菌呈抗真菌活性。现有技术中，尚未检索到适用于高纯度羽状哈氏豆酸规模化生产的制备方法报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的(1)以富含羽状哈氏豆酸的药材为原料，用乙醇热回流提取，提取液浓缩；(2)将浓缩液用石油醚萃取，取下层水相；(3)将萃取后的水相再用乙酸乙酯萃取，得到萃取液，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物；(4)将萃取物采用高速逆流色谱法分离纯化，收集目标组分减压浓缩，冷冻干燥，得到羽状哈氏豆酸。所述步骤(1)中富含羽状哈氏豆酸的药材为雷格拉鼠尾草或香巴豆。所述步骤(4)中高速逆流色谱溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，其体积比为(11-13) :(20-35) :(22-28) :(4_10)。本专利技术的有益效果是采用高速逆流色谱法分离纯化，生产周期短、分离效果好、广品含量尚。具体实施方式下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例1:取雷格拉鼠尾草地上部分Ikg粉碎，用80%乙醇4L加热回流提取2次，提取液合并后减压浓缩，所得粗浸膏混悬于水中，以石油醚反复萃取3次，取下层水相，将萃取后的水相用乙酸乙酯反复萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物。取正己烷、3乙酸乙酯、甲醇、水，按体积比13:27:22:10在分液漏斗中混合充分，分层后取下相作为流动相，上相为固定相，将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至900r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速调至2. 5ml/min，将乙酸乙酯萃取物溶于下相由进样阀进样，HPLC检测，根据图谱收集目标成分，减压浓缩、冷冻干燥流分，制得羽状哈氏豆酸7.89g，含量 98. 3%ο实施例2:取雷格拉鼠尾草地上部分Ikg粉碎，用75%乙醇5L加热回流提取3次，提取液合并后减压浓缩，所得粗浸膏混悬于水中，以石油醚反复萃取3次，取下层水相，将萃取后的水相用乙酸乙酯反复萃取6次，合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按体积比11:20:25:6在分液漏斗中混合充分，分层后取下相作为流动相，上相为固定相，将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至800r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速调至anl/min，将乙酸乙酯萃取物溶于下相由进样阀进样，HPLC检测，根据图谱收集目标成分，减压浓缩、冷冻干燥流分，制得羽状哈氏豆酸8.23g，含量 98. 6%ο实施例3:取香巴豆根Ikg粉碎，用90%乙醇8L加热回流提取2次，提取液合并后减压浓缩，所得粗浸膏混悬于水中，以石油醚反复萃取4次，取下层水相，将萃取后的水相用乙酸乙酯反复萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、 水，按体积比12:3328:9在分液漏斗中混合充分，分层后取下相作为流动相，上相为固定相，将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至820r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速调至3ml/min，将乙酸乙酯萃取物溶于下相由进样阀进样，HPLC检测， 根据图谱收集目标成分，减压浓缩、冷冻干燥流分，制得羽状哈氏豆酸5. 39 g，含量98. 2%。实施例4:取香巴豆根Ikg粉碎，用70%乙醇6L加热回流提取3次，提取液合并后减压浓缩，所得粗浸膏混悬于水中，以石油醚反复萃取3次，取下层水相，将萃取后的水相用乙酸乙酯反复萃取4次，合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、 水，按体积比13:3524:4在分液漏斗中混合充分，分层后取下相作为流动相，上相为固定相，将固定相充满高速逆流色谱柱，开启主机转速调至850r/min，泵入下相作流动相，动态平衡后，流动相流速调至2ml/min，将乙酸乙酯萃取物溶于下相由进样阀进样，HPLC检测， 根据图谱收集目标成分，减压浓缩、冷冻干燥流分，制得羽状哈氏豆酸4. 88g，含量98. 8%。权利要求1.，其特征在于包括以下步骤(1)以富含羽状哈氏豆酸的药材为原料，用乙醇热回流提取，提取液浓缩；(2)将浓缩液用石油醚萃取，取下层水相；(3)将萃取后的水相再用乙酸乙酯萃取，得到萃取液，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物；(4)将萃取物采用高速逆流色谱法分离纯化，收集目标组分减压浓缩，冷冻干燥，得到羽状哈氏豆酸。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中富含羽状哈氏豆酸的药材为雷格拉鼠尾草或香巴豆。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(4)中高速逆流色谱溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，其体积比为(11-13) :(20-；35) :(22- ) (4-10)。全文摘要本专利技术公开一种，其方法步骤如下(1)以富含羽状哈氏豆酸的药材为原料，用乙醇热回流提取，提取液浓缩；(2)将浓缩液用石油醚萃取，取下层水相；(3)将萃取后的水相再用乙酸乙酯萃取，得到萃取液，减压浓缩，得乙酸乙酯萃取物；(4)将萃取物采用高速逆流色谱法分离纯化，收集目标组分减压浓缩，冷冻干燥，得到羽状哈氏豆酸。文档编号C07D307/54GK102503917SQ201110303459公开日2012年6月20日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日专利技术者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，郭琴，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：