桑黄菌丝的固体发酵培养基及桑黄菌丝的固体发酵培养方法，属于桑黄菌人工培养的技术领域。本发明专利技术以玉米粉、麸皮等为原料配制培养基，用于桑黄菌丝体的固体发酵培养，与目前桑黄菌丝液体发酵及桑黄子实体培养方法相比，该培养方法能够在经济、操作方便的同时获得大量的桑黄菌丝体，且，多糖和黄酮含量高于每克子实体的粗多糖和黄酮含量。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于桑黄菌人工培养的
技术介绍
桑黄的药用最早记载于李时珍的《本草纲目》中。桑黄味微苦，能利五脏、软坚、 排毒、止血、活血等。《药性论》中记载，桑黄味微苦，性寒，在我国传统中药中用于治疗痢疾、盗汗、血崩、血淋、脐腹涩痛、脱肛泻血、带下、闭经。据报道，桑黄是目前抗肿瘤能力最高的药用真菌，桑黄的抗癌功能最早于1968年被日本学者Uekawa等发现，研究表明桑黄野生子实体的提取物对小鼠肉瘤S180的抑制率为96. 7%，后来研究表明桑黄子实体多糖及桑黄菌丝多糖均具有抗癌作用。2006年刘海燕等的研究结果表明桑黄粗多糖高、中、低剂量组对小鼠S180肉瘤均有抑制作用，能明显提高荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬指数与吞噬率、外周血淋巴细胞转化率及血清溶血素水平，并能提高血清中细胞因子TFN — γ含量。张海英学者等的研究发现，桑黄灵芝UE-21 (从真菌桑黄与灵芝中提取的多糖组成的复方制剂)多糖对人卵巢癌细胞和人肝癌细胞基质金属蛋白酶22和基质金属蛋白酶四的表达均有抑制作用，并具一定的量效关系。桑黄灵芝UE-21多糖在体外可抑制肿瘤细胞基质金属蛋白酶的表达，为其抗肿瘤侵袭作用提供实验依据。现代研究表明桑黄子实体除含有多糖外，还含有黄酮及其衍生物、香豆素类、甾醇类、氨基酸等化合物；相关药理研究表明桑黄子实体的热水提取物在抗肿瘤、抗发炎、抗氧化、抗突变、提高免疫力等方面具有显著功效尤其是抗肿瘤方面。随着桑黄开发利用的发展，野生桑黄资源的储备越来越少，因此发展人工桑黄生产是当前研究和开发的一大热点。目前开展的桑黄培养主要包括获得菌丝体的液体深层发酵培养以及袋料栽培，但是由于液体发酵培养菌丝产量较低，人工袋料栽培获得子实体培养周期较长。
技术实现思路
本专利技术目的是提出一种可提高桑黄菌丝培养产量和提高黄菌丝的多糖含量的桑黄菌丝的固体发酵培养基。本专利技术由玉米粉和麸皮组成，玉米粉和麸皮分别占固体发酵培养基总质量的 68 75% 和 25 32%。本专利技术还提供一种采用以上固体发酵培养基进行发酵培养的方法。本专利技术包括以下步骤1)将固体培养基和营养液封装于培养容器中，于121！高压灭菌40 60分钟；2)接入液体菌种，于环境温度和避光条件下培养20 30天；其特点是所述固体培养基由玉米粉和麸皮组成，玉米粉和麸皮分别占固体发酵培养基总质量的68 75%和25 32% ；所述固体培养基和营养液的质量比为1 1. 2 1 1. 4。本专利技术所述营养液由水、蔗糖、KH2P04、K2HPO4和VB1组成，所述蔗糖、KH2PO4、K2HPO4 和VB1分别占营养液总质量的1. 5 2. 5%、0. 1 0. 2%、0. 1 0. 2%和0. 01 0. 02%。本专利技术采用常见的价格低廉的原材料(玉米、麸皮)做为桑黄菌丝固体发酵培养基的主要成分，不但可以大量获得桑黄菌丝体作为野生桑黄的替代品，满足的市场需求，而且可以提高桑黄多糖、黄酮等活性成分的含量，为保健、医药行业提供原料。本专利技术实现了在较短时间获得大量桑黄菌体的重要突破，具有低成本高产出的优点，能够有效地满足市场对桑黄的大量需求。本专利技术与现有的人工桑黄培养相比有如下优点(1)目前桑黄培养主要有液体深层发酵菌丝及袋料栽培子实体。但是由于液体发酵培养菌丝产量较低，人工袋料培养获得子实体培养周期较长，而本专利技术实现了在较短培养时间的同时获得大量桑黄菌体的重要突破。(2)本专利技术采用固体发酵方法，可以广口玻璃瓶为发酵用容器，比液体发酵为桑黄菌丝生长提供了一个更有利的生长环境，有利于获得大量的桑黄菌丝体。(3)采用本专利技术方法培养的桑黄菌体中多糖和黄酮含量高于每克子实体的粗多糖和黄酮含量。(4)本专利技术所提供的培养基配方，低成本、工艺简单，易于投入大规模生产，便于农户或个人推广生产。附图说明图1为培养瓶的俯视图。图2为培养瓶的前视图。具体实施例方式1、液体菌种的获得(1)液体培养基配方将20g葡萄糖、1. 5g蛋白胨、0. 46gKH2P04、1. OgK2HPO4和 0. 5gMgS04、混均后，调整pH=7. 0，待用。(2)培养基制备将配好的液体培养基分别装入摇瓶中，每瓶lOOmL，用膜封口， 121°C高压灭菌20分钟，再将灭菌好的培养基放入超净工作台中，使用臭氧发生器进行灭菌 20min。(3)接种每瓶培养基中接种一块直径约5毫米的菌块O^eBi/ms linteus),操作过程中按无菌操作要求。(4)培养将接种好的菌种静置一天，第二天放入摇床，培养8 12天，获得液体菌种，待用。2、固体发酵培养操作步骤(1)制备营养液分别称取15 25g蔗糖、1 2g KH2PO4U 2g K2HPO4和0. 1 0. 2g VB1,加入无菌水，定容至1000ml，备用。(2)装瓶称取17 18g玉米粉、6 8g麸皮放入每个洗净的耐高温高压的栽培广口玻璃瓶中，规格瓶口内径5. 8cm、瓶高10. 7cm、瓶内体积250mL。在每瓶中再加入配制好的营养液40 50mL。用耐高温高压的聚丙烯塑料薄膜封住瓶口。用耐高温的硅胶橡皮圈扎口密封。(3)灭菌将玻璃瓶放入高压灭菌锅中，按常规灭菌方法于121 ！高压灭菌40 60分钟。(4)接种将灭菌后的玻璃瓶冷却温度降至30°C以下，放入接种室，对接种室进行紫外灯照射20 30分钟或臭氧发生器消毒20 30分钟毒后。在超净工作台中按无菌操作要求接入菌种，每瓶接入液体菌种1 2mL。(5)发菌培养将接种后的培养瓶至于恒温培养箱中进行黑暗避光培养，培养瓶数量较多可置于室内或大棚中进行避光培养。一般培养20 30天即可。如图1与图2，可见瓶内有肉黄色桑黄菌丝生成。3、功效实验对获得的桑黄菌丝体检测其活性成分多糖和黄酮的含量，与桑黄子实体(市售， Phellinus linteus)相比考察其含量的高低。采用苯酚一硫酸法测定粗多糖含量，采用UV法测定总黄酮含量。结果如下表。权利要求1.一种桑黄菌丝的固体发酵培养基，其特征在于由玉米粉和麸皮组成，玉米粉和麸皮分别占固体发酵培养基总质量的68 75%和25 32%。2.一种桑黄菌丝的固体发酵培养方法，包括以下步骤1)将固体培养基和营养液封装于培养容器中，于121！高压灭菌40 60分钟；2)接入液体菌种，于环境温度和避光条件下培养20 30天；其特征在于所述固体培养基由玉米粉和麸皮组成，玉米粉和麸皮分别占固体发酵培养基总质量的68 75%和25 32%;所述固体培养基和营养液的质量比为1 1. 2 1 1. 4。3.根据权利要求2所述桑黄菌丝的固体发酵培养方法，其特征在于所述营养液由水、 蔗糖、KH2PO4, K2HPO4和VB1组成，所述蔗糖、KH2PO4, K2HPO4和VB1分别占营养液总质量的 1. 5 2. 5%、0. 1 0. 2%、0. 1 0. 2% 和 0. 01 0. 02%。全文摘要，属于桑黄菌人工培养的
本专利技术以玉米粉、麸皮等为原料配制培养基，用于桑黄菌丝体的固体发酵培养，与目前桑黄菌丝液体发酵及桑黄子实体培养方法相比，该培养方法能够在经济、操作方便的同时获得大量的桑黄菌丝体，且，多糖和黄酮含量高于每克子实体的粗多糖和黄酮含量。文档编号C05G3/00GK10249本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋宁，刘红锦，陈忠立，孙道权，储呈平，诸永志，王道营，刘芳，张苏珍，王萍，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，鑫缘茧丝绸集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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