结合于PSCA蛋白的用于癌症诊断的抗体制造技术

描述了结合于新型PSCA蛋白的抗体及其衍生的分子、以及它们的变体，其中PSCA在正常成体组织中呈组织特异性表达，并在表I所列的癌中异常表达。因此，PSCA提供了一种用于癌症诊断、预测、预防和/或治疗的靶标。可将PSCA基因或其片段、或其编码的蛋白质、或它们的变体、或它们的片段用于引发体液或细胞免疫应答；与PSCA反应的抗体或T细胞可用于主动或被动免疫。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术专利申请是国际申请号为PCT/US2005/017412，国际申请日为2005年5月17日，进入中国国家阶段的申请号为“200580017239.9”，专利技术名称为“结合于PSCA蛋白的抗体以及相关分子”的专利技术专利申请的分案申请。 相关申请的交叉引用本专利申请涉及要求美国临时专利60/475,064(提交于2003年5月30日)优先权的待批美国专利申请10/857,484(提交于2004年5月28日)；本申请涉及美国临时专利申请60/616,381(提交于2004年10月5日)、美国临时专利申请60/617,881(提交于2004年10月12日)；美国临时专利申请60/621,310(提交于2004年10月21日)；美国临时专利申请60/633,077(提交于2004年10月2日)；以及提交于2005年4月14日的尚未指定专利申请号的美国临时专利申请。本专利技术涉及PCT专利申请PCT/US2004/017231(提交于2004年5月28日)。本段所列各申请的内容以其全部纳入本文作为参考。 关于政府赞助研究项目专利技术的权属声明不适用。 
本文所描述的专利技术涉及结合于被称为PSCA的蛋白质的抗体及其结合片段、及由其工程化改造得到的分子。本专利技术还涉及用于治疗表达PSCA的癌的诊断、预测、预防和治疗方法和组合物。 专利技术背景 癌症是仅次于冠心病的第二大人类死亡原因。世界范围内每年有数百万人死于癌症。仅在美国，如美国癌症协会的报告，癌症每年造成50万以上的人死亡，同时每年有120万人被新诊断患有癌症。虽然死于心脏病的人数明显减少， 但死于癌症的人数正在逐渐上升。在下世纪初，预计癌症将成为头号死亡原因。 世界范围内，有几种癌症是主要的杀手。尤其是肺癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌和膀胱癌，它们是癌症死亡的主要原因。这些癌以及事实上所有其它癌都具有相同的致命特征。几乎没有例外地，转移性癌疾病是致命的。此外，即便对于那些在原发性癌中存活下来的癌症患者而言，一般经验显示，他们的生活都发生了显著的改变。许多癌症患者由于担心复发或治疗失败而产生了强烈的焦虑感。许多癌症患者在治疗后身体虚弱。此外，许多癌症患者会经历复发。 世界范围内，前列腺癌是男性第四大流行癌症。在北美和北欧，它几乎是男性中最常见的癌症，同时是造成男性癌症死亡的第二大原因。仅在美国，每年有30,000以上的男性死于这种疾病-仅次于肺癌。除了这些数字数值巨大，还没有转移性前列腺癌的有效治疗方法。外科前列腺切除术、放疗、激素注射治疗、手术阉割和化疗仍然是主要的治疗手段。不幸的是，这些治疗方法对于许多人无效，并且常常会带来不快结果。 就诊断而言，缺乏能准确检测早期局限性肿瘤的前列腺肿瘤标记仍旧是这种疾病诊断和治疗中的一个重要限制。尽管血清前列腺特异性抗原(PSA)检测已经成为一种有效工具，但广泛认为它在一些重要方面缺乏特异性和通用性。 通过产生可再现小鼠中疾病不同阶段的前列腺癌异种移植物促进了其它前列腺癌特异性标记的鉴定。LAPC(洛杉矶前列腺癌)异种移植物是在严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠中有存活传代的前列腺癌异种移植物，并显示出模拟从雄激素依赖转变为雄激素不依赖性(Klein等，1997，Nat.Med.3：402)。最近鉴定的前列腺癌标记包括PCTA-1(Su等，1996，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93：7252)、前列腺特异性膜(PSM)抗原(Pinto等，Clin Cancer Res 1996-9-2(9)：1445-51)、STEAP(Hubert等，Proc Natl Acad Sci U S A.1999-12-7；96(25)：14523-8)和前列腺干细胞抗原(PSCA)(Reiter等，1998，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95：1735)。 尽管以前鉴定的标记如PSA、PSM、PCTA和PSCA具有有助于诊断和治疗前列腺癌的作用，但还需要鉴定出前列腺癌和相关癌症的其它标记和治疗靶以进一步促进诊断和治疗。 肾细胞癌(RCC)占到成人恶性肿瘤的约3％。一旦腺瘤的直径达到2-3cm就可能恶化。在成人中，两种主要的恶性肾肿瘤是肾细胞腺癌和肾盂或输尿管移行细胞癌。估计在美国肾细胞腺癌的发病率超过29,000例，并且1998年有超过 11,600名患者死于这种疾病。移行细胞癌较为少见，其在美国的发病率约为每年500例。 数十年来，手术一直是肾细胞腺癌的主要治疗方法。直到最近，转移性疾病还很难用任何全身疗法来控制。随着最近全身疗法尤其是免疫疗法的发展，持续性应答可能会在合适的患者中进攻转移性肾细胞癌。不过，仍然需要治疗这些患者的有效方法。 在美国所有的新癌症病例中，膀胱癌在男性中约占5％(第五种最常见的瘤)，在女性中占3％(第八种最常见的瘤)。该发病率缓慢增加，且随着老年人口的增加这一数字也在升高。在1998年，估计有54,500病例，其中包括39,500名男性和15,000名女性。在美国，这种年龄调整发病率为每100,000男性32人，每100,000女性8人。历史上男性/女性3∶1的比例可能会由于女性吸烟而降低。估计1998年有11,000人死于膀胱癌(7,800名男性和3,900名女性)。膀胱癌的发病率和死亡率随着年龄增加而急剧上升，并且随着人口老龄化而成为日益严重的问题。 大多数膀胱癌在膀胱中会复发。膀胱癌通过经尿道膀胱切除术(TUR)和膀胱内化疗或免疫疗法的组合来治疗。膀胱癌的多病灶和复发特性指出了TUR的局限性。大多数肌肉浸润性癌症不能仅通过TUR治愈。根治性膀胱切除术和尿流改道术是最有效的根治这种癌症的方法，但会对泌尿和性功能造成不可否认的影响。显然还需要对膀胱癌患者有益的治疗方法。 估计2000年美国共发生130,200例结肠直肠癌，包括93,800例结肠癌和36,400例直肠癌。结肠直肠癌是男性和女性中的第三大癌症。在1992-1996年间其发病率显著减低(每年降低2.1％)。研究表明，这些降低是由于检查和息肉切除增加，从而防止了息肉发展成浸润性癌症。估计2000年有56,300人死亡(47,700人死于结肠癌，8,600人死于直肠癌)，占美国癌症死亡总人数的约11％。 目前，外科手术是最常见的治疗结肠直肠癌的方法，对于还未扩散的癌症经常采用这种方法。对于大多数已经深度肠壁穿孔或已经扩散到淋巴结的癌症患者，通常在手术前或手术后进行化疗，或化疗加放疗。对结肠癌有时也需要永久性结肠造口术(在腹部形成一开口以排除人体废物)，同时直肠癌也偶尔需要这种手术。仍需要有效的诊断和治疗结肠直肠癌的方法。 估计2000年新增164,100例肺和支气管癌症，占美国总癌症诊出人数的14％。肺和支气管癌症症的发病率在男性中显著降低，从1984年的86.5/100,000 降低到1996年的70.0。在20世纪90年代，女性中发病率的增加势头开始放慢。在1996年，女性中的发病率为42.3/100,000。 估计20本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种单克隆抗体或其抗原结合片段，其包括特异性结合于ＰＳＣＡ蛋白的抗原结合位点，所述ＰＳＣＡ蛋白包含ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２所示的氨基酸序列，其中所述单克隆抗体包含ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３５的ＶＨ区和ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３７的ＶＬ区的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
2004.05.28 US 10/857,484;2004.05.28 US PCT/US2004/1.一种单克隆抗体或其抗原结合片段，其包括特异性结合于PSCA蛋白的抗原
结合位点，所述PSCA蛋白包含SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列，其中所述单克隆
抗体包含SEQ ID NO：35的VH区和SEQ ID NO：37的VL区的氨基酸序列。
2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体
由美国典型培养物保藏中心(ATCC)保藏号为PTA-6699的杂交瘤产生。
3.如权利要求1或2所述的抗体或片段，其特征在于，所述片段是Fab、F(ab’)2、
Fv或scfv片段。
4.如权利要求1、2或3中任一项所述的抗体或片段，其特征在于，所述抗体或
片段是与可检测标记物偶联的。
5.一种产生权利要求1或2所述的单克隆抗体的杂交瘤。
6.如权利要求5所述的杂交瘤，其特征在于，所述杂交瘤在美国典型培养物保
藏中心(ATCC)的保藏号为PTA-6699。
7.一种多核苷酸，其编码包含权利要求1、2或3中任一项所述的抗体的轻链可
变区和重链可变区的序列。
8.如权利要求7所述的多核苷酸，其特征在于，其编码权利要求1、2或3中任
一项所述的抗体的轻链和重链。
9.一种载体，其包含权利要求7或8所述的多核苷酸。
10.一种用权利要求9所述的载体转染的细胞。
11.一种组合物，其包含权利要求1-4中任一项所述的抗体、或其Fab、F(ab’)2、
Fv或sFv片段。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·古达斯，A·雅各波维茨，X·贾，R·K·莫里森，K·J·M·莫里森，H·邵，P·M·查利塔埃德，A·B·莱塔诺，
申请(专利权)人：艾更斯司股份有限公司，
类型：发明
国别省市：US