一种黄檗转基因体系建立的方法技术

一种黄檗转基因体系建立的方法，它涉及一种转基因体系建立的方法。方法：一、成熟种子预处理；二、载体pCAMBIA1303利用电转方法转到根癌农杆菌EHA105中，获得含GUS基因的工程菌，然后制备侵染液，侵染后脱菌；三、获得抗性芽；四、抗性芽伸长及生根并移栽，获得黄檗转基因再生植株，即完成。本发明专利技术黄檗转基因体系建立的方法，可实现转基因黄檗的快速培育，为黄檗优良品种的开发奠定基础，从而培育出速生、丰产、优质、抗逆的黄檗新品种，所得黄檗转基因再生植株移栽成活率达94％，产生的后代遗传稳定性好，可极大地缩短林木育种周期，加速育种进程，对营造优质人工林，缓解木材供需矛盾，保护生态环境具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种转基因体系建立的方法。
技术介绍
黄檗(Phellodendron amurense Rupr.)，别名黄波罗，为芸香科(Rutaceae)黄檗属(Phellodendron Rupr)植物。黄檗是古老的残遗植物，对研究古代植物区系，古地理及第四纪冰期气候有科学价值，是国家二级保护植物(崔丽莉等，2004)，具有重要的经济、药用和保护价值，木材纹理美观，切面有光泽，材质坚韧，耐水湿及耐腐性强，不翘不裂，用于军工、制造家具及工艺美术。树皮木栓可作工业软木塞、浮标、救生圈或用于隔音、隔热、防震等。内皮可作黄色染料的来源及药用在我国和日本，黄檗中的药用物质被当作一种天然药使用，抗侵袭肠功能的病菌，防燥及退热剂(Ikuta et al. 1998)。叶可提取芳香油；花是很好的蜜源；果实含有甘露醇及不挥发的油分，可供工业及医药用。由于人们盲目采扒黄檗树皮，造成大规模的破坏。加上木材砍伐量较大，也造成资源枯竭。目前我国的黄檗野生资源已受到严重威胁。种子繁殖能力低，萌芽率低，以及切断面生根能力低，在引种栽培上尚未能大面积推广。近年来，有关黄檗的植株再生体系建立研究已有报道，然本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种黄檗转基因体系建立的方法，其特征在于黄檗转基因体系建立的方法按以下步骤实现：一、将黄檗去皮后的成熟种子在超净工作台内用体积浓度为７０％的酒精浸泡３０ｓ～１ｍｉｎ，灭菌水冲洗２～３遍，然后转入质量浓度为１％的ＮａＣｌＯ溶液中消毒１０～２０ｍｉｎ，灭菌水冲洗３～５遍，再接种到含４ｍｇ／Ｌ苯基噻二唑脲、０．２ｍｇ／Ｌ萘乙酸、３０ｇ／Ｌ蔗糖和５．５ｇ／Ｌ琼脂的ＭＳ培养基上培养１～３天；二、将含ＧＵＳ基因的载体ｐＣＡＭＢＩＡ１３０３利用电转方法转到根癌农杆菌ＥＨＡ１０５中，获得含ＧＵＳ基因的工程菌，然后接种到ＬＢ培养基上培养至菌液的ＯＤ６００值为０．５～１．０，再稀释至菌液的ＯＤ６００值为０．１...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李成浩，杨静莉，赵波，刘桂丰，靳春莲，周晨光，刘立辉，杜佳，李春燕，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：93