一种甲胺磷人工抗原的制备方法技术

一种甲胺磷人工抗原的制备方法，选用重氮化法，在弱酸环境下，利用亚硝酸盐先将甲胺磷分子上的氨基转化为重氮基团，再在碱性环境中利用重氮基团与蛋白质上的羧基反应将甲胺磷小分子与蛋白质分子偶联。在重氮键合成时，保持微酸环境，重氮溶液加入到蛋白质溶液中，缓慢连续搅拌可以使其反应充分，增加偶联物的结合比。本发明专利技术操作简便，试剂价廉，比一般方法节省成本15％，并且一步完成反应，人工抗原制备的效率提高3％～5％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，具体是采用重氮化法将甲胺磷与蛋白质分子偶联制备甲胺磷人工抗原的方法，属于免疫

技术介绍
甲胺磷(Methamidophos，MTP)又名多灭灵，分子式=C2H8NO2PS,分子量141，化学名称0，S-二甲基氨基硫代磷酸酯。甲胺磷作为广谱高效的有机磷杀虫剂，曾广泛用于世界各地，主要用于小麦、水稻、棉花等农作物害虫的防治。国家农业部和国家发改委下达公告决定从2008年1月1日起停止甲胺磷生产，从根本上杜绝甲胺磷等5种高毒农药在国内的销售和使用。但是，这些农药在全国范围内仍然时有检出，已成为果蔬中农药残留的主体农药，由此导致的安全事件依然屡屡发生，对人体健康造成了极大的危害。因此很有必要建立适用于现场检测的快速、便捷的有机磷农药残留检测方法。目前对甲胺磷的检测方法主要有气相色谱(gas chromatography，GC)、薄层色ill (thin layer chromatography, TLC)、1 效液才画色i普(high performance liquid chromatography, HPLC)等。这些方法大多需要对被分析样品进行前处理，且操作本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种甲胺磷人工抗原的制备方法，其特征在于，依次通过以下步骤实现：（１）将牛血清白蛋白ＢＳＡ溶于ｐＨ９．０的硼酸盐缓冲液中，使ＢＳＡ浓度达到０．０１～０．０３ｇ／ｍＬ；（２）将甲胺磷溶于０．０１ｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ溶液中，使甲胺磷浓度达到０．０１～０．０５ｇ／ｍＬ，冰浴，边搅拌边缓慢加入预冷的０．１ｍｏｌ／Ｌ亚硝酸钠溶液，直至淀粉碘化钾试纸变蓝，继续搅拌反应３０～６０ｍｉｎ；（３）将步骤（２）溶液缓慢加入到步骤（１）溶液中，使牛血清白蛋白与甲胺磷的摩尔比为１：５００～１０００，冰浴搅拌２ｈ，４℃反应２４ｈ后，置于ｐＨ７．４的磷酸盐缓冲液中透析３～５ｄ，每１２ｈ换一次透析液；最后冷冻干燥，即得到...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：董全，李垚辛，杜小粉，朱开祥，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：85