一种利用异亮氨酸提高聚合酶链式反应扩增效果的方法技术

技术编号:6722381 阅读:292 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种利用异亮氨酸(L-isoleucine)提高聚合酶链式反应(PCR)扩增效果的方法,涉及生物技术领域,该方法是在原有的PCR扩增方法基础上,通过向体系中添加一定量的异亮氨酸来实现的。本发明专利技术优化扩增的效果明显,操作简便,易于掌握。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
的聚合酶链式反应(PCR)扩增的方法,尤其是异亮氨酸 (L-isoleucine)提高聚合酶链式反应(PCR)扩增效果的方法。
技术介绍
聚合酶链式反应(PCR),又称体外酶促基因扩增,是一种在体外模拟DNA体内复制的基因扩增技术,该技术由K. Mullis于1985年专利技术,能在耐热DNA聚合酶的作用及特异性引物的引导下,在很短的时间里就能在一个试管内实现只有在生物体细胞分裂增殖时才出现的基因的大量复制,一般来说,在数小时内就可以将目的基因扩增至百万倍。在过去的20多年的时间里,PCR技术在不断进步和发展中逐渐成熟,形成了一整套完整的技术体系。常规PCR技术操作简便,成功率很高,因而其在遗传学、微生物学、乃至整个生命科学领域的研究中都得到了广泛应用。但是PCR技术仍存在着不可避免的缺点, 如扩增的副反应多,扩增产物的产量少,保真度不高等。但对PCR反应影响最大的是扩增过程中的副反应的发生,这种情况轻则带来在PCR产物中出现少量非目的产物,电泳图上表现为明显的非目的带和少量拖尾现象的出现,重则带来大量的非目的产物出现,在电泳图上表现为干扰很严重的拖尾和大本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.利用异亮氨酸提高聚合酶链式反应扩增效果的方法,其特征在于该方法包括如下步骤:(1).异亮氨酸溶液的配制:10-20mg/mL的异亮氨酸水溶液;(2).异亮氨酸溶液的灭菌;(3).PCR体系的配置;(4).PCR体系的优化:在PCR反应体系中添加异亮氨酸溶液,异亮氨酸终浓度为5-15mg/mL;(5).PCR条件的设定与运行;(6).PCR产物检测。

【技术特征摘要】
1.利用异亮氨酸提高聚合酶链式反应扩增效果的方法,其特征在于该方法包括如下步骤(1).异亮氨酸溶液的配制10-20mg/mL的异亮氨酸水溶液;(2).异亮氨酸溶液的灭菌;(3)...

【专利技术属性】
技术研发人员:张治洲赵鹤翔张会敏吕志伟王有志
申请(专利权)人:山东大正医疗器械股份有限公司
类型:发明
国别省市:37

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