快速检测16、18型人乳头瘤病毒的荧光定量PCR试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种快速检测16、18型人乳头瘤病毒荧光定量PCR试剂盒，涉及一种引起人类宫颈癌及宫颈上皮内高度病变的病原体基因检测技术。该试剂盒包括DNA裂解液、荧光定量PCR反应液、HPV16&18标准阳性模板PMD18-T-HPV16&18和阴性质控标准品；所述的荧光定量PCR反应液含有16、18型人乳头瘤病毒特异性引物对和荧光探针。本发明专利技术定量准确；检测速度快；特异性好，灵敏度高；使用步骤简单，可重复性高；可同时进行高通量的样品检测。本试剂盒可对16、18型人乳头瘤病毒进行快速定性定量检测，并可替代一直沿用的传统的培养法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
１．一种快速检测１６、１８型人乳头瘤病毒的荧光定量ＰＣＲ试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括ＤＮＡ裂解液、荧光定量ＰＣＲ反应液、ＨＰＶ１６＆１８标准阳性模板ＰＭＤ１８－Ｔ－ＨＰＶ１６＆１８和阴性质控标准品；所述的荧光定量ＰＣＲ反应液含有１６、１８型人乳头瘤病毒特异性引物对和荧光探针：１６、１８型人乳头瘤病毒的正向引物为５′－ＳＷＧＹＷＧＣＡＧＣＡＹＴＡＴＡＴＴＧＧ－３′，反向引物为５′－ＡＴＧＴＴＧＴＡＷＷＡＹＷＧＴＷＷＧＴＣＴＴＴＧ－３′，其中正向引物可向５’和３’端方向各延伸１０个碱基，反向引物可向５’和３’端方向各延伸１０个碱基；荧光探针序列为５′－ＣＡＹＴＣＷＧＧＹＧＴＧＴＣＴＣＣ－３′，该荧光探针序列可向５’和３’端方向各延伸１０个碱基，荧光探针５′端标记报告荧光基团ＦＡＭ，３′端标记不发光的淬灭基团标记Ｅｃｌｉｐｓｅ，可以大大减少背景噪音的干扰；所述的ＨＰＶ１６＆１８标准阳性模板ＰＭＤ１８－Ｔ－ＨＰＶ１６＆１８是含有１６、１８型人乳头瘤病毒高度保守基因－Ｅ１基因的１０１个碱基对的核苷酸片段构成的ＰＭＤ１８－Ｔ载体，该载体在大肠杆菌ＤＨ５α中增殖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：唐景峰，王业富，杨敬镜，王维旭，汪晓莉，
申请(专利权)人：武汉百泰基因工程有限公司，
类型：发明
国别省市：83