33型重组人乳头瘤病毒病毒样颗粒及其制备方法技术

本发明专利技术涉及33型重组人乳头瘤病毒病毒样颗粒及其制备方法，具体技术要点是提供一种新的编码重组的HPV33 L1蛋白的多核苷酸基因片段、包含该基因片段的载体、包括载体的宿主细胞，以及由该基因片段翻译表达的HPV33 L1溶合蛋白、五聚体和由该五聚体组成VLP，本发明专利技术还公开该五聚体、VLP蛋白及其组成的疫苗组合物在制备预防HPV33感染的药物中的应用。

Recombinant human papilloma virus like particles of type 33 and preparation method thereof

The present invention relates to recombinant human papillomavirus type 33 virus like particles and its preparation method, specific technical points are polynucleotide gene fragment, provide a new encoding recombinant HPV33 L1 protein contains vector, the gene fragment of host cell comprises a carrier, and the gene expression of HPV33 soluble L1 translation protein, five dimers and the dimers composed of five VLP, the invention also discloses the five poly vaccine composition body, VLP protein and its components in the preparation of the prophylactic application of HPV33 infection in the.

【技术实现步骤摘要】
33型重组人乳头瘤病毒病毒样颗粒及其制备方法
本专利技术涉及人乳头瘤病毒的病毒样颗粒及其制备方法。更具体而言，本专利技术涉及一种重组的人乳头瘤病毒L1蛋白的五聚体及病毒样颗粒（Virus-likeParticle，VLP）及其制备方法，及含该病毒样颗粒的疫苗组合物在预防人乳头瘤病毒感染中的应用。
技术介绍
人乳头瘤病毒(HumanPapillomavirus，简称HPV)主要通过人体密切接触，如性传播的病毒，可引起人类多种增殖性上皮病变，包括乳头状瘤（疣）和瘤样病变。具体来讲，HPV诱发的疾病主要包括3大类，第1类：宫颈、阴道、女性外阴、阴茎和肛门的癌症及某些类型的头颈部肿瘤等恶性病变。100%的宫颈癌患者都是HPV感染所导致的，90%的肛门癌，40%的外阴、阴道及阴茎，12%的口咽及3%的口腔癌症归因于HPV感染。第2类：良性病变如扁平疣、尖锐湿疣等生殖器疣，是一种性传播疾病，在性行为活跃的人群中很常见。虽然生殖器疣不会像癌症一样造成严重的后果，但是病变通常会引起病人较为痛苦的临床症状如灼痛、出血和疼痛，同时产生尴尬、焦虑和自卑等负面的心理反应，而且反复治疗的过程浪费了大量的医疗资本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种经大肠杆菌偏好密码子优化的编码人乳头瘤病毒HPV33 L1的基因，该基因为SEQ NO.2所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种经大肠杆菌偏好密码子优化的编码人乳头瘤病毒HPV33L1的基因，该基因为SEQNO.2所示的核苷酸序列。2.一种大肠杆菌表达载体，其特征在于该载体包括具有权利要求1所述基因的序列。3.如权利要求2所述的大肠杆菌表达载体，其特征在于该载体为pGEX-6p-1、pGEX-4T-2、pMAL或pET28a。4.一种工程菌细胞，该细胞包含权利要求1所述的基因，或权利要求2、3所述的表达载体。5.一种Tag-HPV33L1的融合蛋白，其特征在于该蛋白包括编码人乳头瘤病毒HPV33L1的基因，优选经大肠杆菌偏好密码子优化的编码人乳头瘤病毒HPV33L1的基因，更优选如权利要求1所述的基因编码；标签Tag为GST.Tag，MBP.Tag，GST-SUMO.Tag，6*His.Tag或6*His-SUMO.Tag。6.如权利要求5所述的融合蛋白，其特征在于L1蛋白质为全长蛋白质或C端截短不多于30个氨基酸和/或N端截短不多于10个氨基酸的L1蛋白质。7.如权利要求5所述的融合蛋白，其特征在于其核苷酸序列为SEQNO.3，SEQNO.4，SEQNO.5，SEQNO.6，SEQNO.7，SEQNO.11，SEQNO.12或SEQNO.13。8.如权利要求5所述的融合蛋白，其特征在于其氨基酸序列为SEQNO.8，SEQNO.9或SEQNO.10。9.一种HPV33L1五聚体蛋白质，其特征在于该五聚体蛋白质由如权利要求5、6、7或8所述的融合蛋白质经过纯化后获得，五聚体蛋白平均粒径10～15nmPdI<0.1。10.一种HPV33L1的VLP，其特征在于该VLP由权利要求9所述的五聚体蛋白质组装而成，平均粒径45～65nmPdI<0.1。11.一种HPVL1蛋白质疫苗组合物，其特征在于该疫苗组合物包括权利要求9所述的HPVL1五聚体蛋白质和药用佐剂。12.一种HPVL1蛋白质疫苗组合物，其特征在于该疫苗组...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘永江，伍树明，高文双，陈晓，任永峰，王雅君，姜绪林，张瑞霞，高俊，张海江，陈建平，银飞，徐岚，仉春艳，夏丽，
申请(专利权)人：北京康乐卫士生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11