一种猴痘病毒荧光PCR检测试剂盒和方法技术

本发明专利技术提出了一种猴痘病毒荧光PCR检测试剂盒和方法，其中试剂盒包括预混反应液、阳性对照和阴性对照，所述预混反应液包括基因多重反应液、酶混合液和核酸扩增反应液，所述基因多重反应液包括猴痘病毒F3L基因上游引物、下游引物和探针，其序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；以及内标GAPDH基因上游引物、下游引物和探针，其序列分别如SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。本发明专利技术试剂盒为预混反应液，避免了反应液和酶混合时带来的误差，减少了操作难度，极大提高了检测灵敏度；并且能同时对刚果盆地分支和西非分支进行有效检测。支进行有效检测。支进行有效检测。

【技术实现步骤摘要】
一种猴痘病毒荧光PCR检测试剂盒和方法


[0001]本专利技术涉及PCR检测
，尤其涉及一种猴痘病毒荧光PCR检测试剂盒和方法。

技术介绍

[0002]猴痘病毒(monkeypox virus，MPXV)属于痘病毒科，脊椎动物痘病毒亚科，正痘病毒属，是一种人畜共患的双链DNA病毒，长约197kb，基因组两端都有闭合的发夹，具有反向末端重复序列，病毒体90％以上由蛋白质构成，含有100多种多肽以及10多种酶类。正痘病毒家族中还有天花病毒、痘苗病毒、牛痘病毒、鼠痘病毒、浣熊痘病毒等，猴痘及上述前3种病毒均可感染人类。猴痘病毒的形态、化学结构、抗原性、致病性以及对外界的抵抗性等，均和其他的痘病毒相似，需与天花、水痘相鉴别。基于猴痘病毒感染的临床表现和流行病学特征，并结合基因型研究，分为刚果盆地分支(CB)和西非分支(WA)。
[0003]我国《猴痘诊疗指南(2022年版)》将猴痘诊断类型分为疑似病例和确诊病例，诊断依据结合流行病史、临床表现和病原学检查，其中猴痘病毒核酸检测阳性为确诊病例病原学检查判断的重要依据。用临床标本进行实时荧光P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猴痘病毒荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：包括预混反应液、阳性对照和阴性对照，所述预混反应液包括基因多重反应液、酶混合液和核酸扩增反应液，所述基因多重反应液包括猴痘病毒F3L基因上游引物、下游引物和探针，其序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；以及内标GAPDH基因上游引物、下游引物和探针，其序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。2.如权利要求1所述的一种猴痘病毒荧光PCR检测的试剂盒，其特征在于：所述猴痘病毒F3L基因上游引物浓度为0.3
‑
0.5μmol/L、下游引物浓度为0.3
‑
0.5umol/L、探针浓度为0.1
‑
0.3umol/L；所述内参GAPDH基因上游引物浓度为0.1
‑
0.3umol/L、内参GAPDH基因下游引物浓度为0.1
‑
0.3umol/L、内参GAPDH基因探针浓度为0.1
‑
0.3umol/L。3.如权利要求1所述的一种猴痘病毒荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：所述SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:6所示的探针5'端均标记荧光基团，3'端均标记猝灭基团和PO4基团...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊慧，田潇然，王秀娟，肖樊，
申请(专利权)人：武汉百泰基因工程有限公司，
类型：发明
国别省市：