一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒和方法技术

本发明专利技术提出了一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒和方法，其中试剂盒包括预混反应液、阳性对照和阴性对照，所述预混反应液包括核酸扩增反应液和酶混合液，所述核酸扩增反应液包括B19上游引物、下游引物和B19探针，其序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；以及内标上游引物、下游引物和探针，其序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ IDNO:6所示。本发明专利技术试剂盒为预混反应液，避免了反应液和酶混合时带来的误差，减少了操作难度，极大提高了检测灵敏度。极大提高了检测灵敏度。极大提高了检测灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒和方法


[0001]本专利技术涉及PCR检测
，尤其涉及一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒和方法。

技术介绍

[0002]人细小病毒B19是已知的最小的病毒，为单链线状DNA病毒，属于细小病毒科，无包膜，3500碱基组成的单链dna病毒，属微小病毒科，是红细胞病毒属的一种，直径20～25nm，对外界理化因素的抵抗力非常强。B19病毒可以被分为1、2、3三种基因型，其中1型和3型又各自分为两种亚型。
[0003]检测人细小病毒B19感染的常用方法依赖于抗原、抗体和核酸检测。B19病毒抗体的检测存在2～4周时间等待抗体产生的“窗口期”，抗原检测则灵敏度偏低，而核酸检测针对B19病毒的DNA，不受检测时间限制，且灵敏度最高，能够检测到样品中微量B19病毒核酸的存在，在B19病毒的检测方法中具有很大优势。目前B19核酸检测方法主要有PCR检测技术和恒温检测技术，由于恒温检测技术存在诸多苛刻条件，因此，采用荧光探针PCR原理，针对B19病毒特异性区域设计相应的引物及探针。
[0004]目前，市面本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒，其特征在于：包括预混反应液、阳性对照和阴性对照，所述预混反应液包括核酸扩增反应液和酶混合液，所述核酸扩增反应液包括B19上游引物、下游引物和探针，其序列分别如SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；以及内标上游引物、下游引物和探针，其序列分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。2.如权利要求1所述的一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒，其特征在于：所述序列号SEQ ID NO:3的探针5'端标记FAM荧光发生基团，3'端标记ZENTM
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IBFQ双淬灭基团。3.如权利要求1所述的一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒，其特征在于：所述序列号SEQ ID NO:6的探针5'端标记ROX荧光发生基团，3'端标记MGB。4.如权利要求1所述的一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒，其特征在于：所述序列号为SEQ ID NO:1
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6的引物和探针的浓度均为10
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15umol/L。5.如权利要求1所述的一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒，其特征在于：所述内标基于人管家基因锚定蛋白重复区域53而设计。6.如权利要求1所述的一种检测人细小病毒B19核酸的试剂盒，其特征在于：所述酶混合液包括Taq聚...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊慧，鄙孝威，尹璐，王秀娟，
申请(专利权)人：武汉百泰基因工程有限公司，
类型：发明
国别省市：