【技术实现步骤摘要】
一种H3亚型禽流感病毒检测试剂盒
[0001]本专利技术属于分子生物学诊断
,涉及一种H3亚型禽流感病毒的荧光定量RT
‑
PCR快速检测方法。
技术介绍
[0002]目前禽流感病毒分为16种血凝素(HA)和9种神经氨酸酶(NA)亚型,在野生水禽中广泛流行。其中,H3 亚型流感病毒宿主范围广泛,除能感染自然宿主野生禽类或家养禽类外,也可感染猪、犬和马等多种哺乳动物。一般情况下,人不会感染禽流感,但是流感病毒不停变异,会偶有跨越种群的传播。早在1998年,H3N2 流感病毒就在北美的猪群中广泛流行,引起了严重的呼吸道疾病症状。这些H3N2流感病毒是新型重组病毒,包含来自人类谱系流感病毒的HA、NA和PB1基因片段、禽流感病毒的PA和PB2基因片段和来自经典猪谱系的M、NS和NP基因片段。此外也有报道显示在北美和亚洲禽源H3亚型流感病毒可感染犬类,并引起明显的呼吸道症状。这些数据均表明,H3亚型禽流感病毒逐渐获得了跨物种传播的能力,对哺乳动物(包括人类)构成了威胁。因此,加强对H3亚型禽流感病毒的监测非常重要。
[0003]传统的流感病毒诊断方法包括在鸡胚或MDCK细胞中培养分离病毒或进行血凝试验,但这两种方法较为耗时且实验条件要求严格。与传统方法不同,实时定量聚合酶链反应检测技术是一种快速且高度灵敏的检测方法,并广泛应用于流感病毒的快速诊断。目前商用的流感病毒检测试剂盒主要用于检测甲型流感病毒基质基因的实时逆转录定量聚合酶链反应。本研究旨在开发一种快速、灵敏、有效的H3亚型禽流感病毒检测产 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测H3亚型禽流感病毒的特异性引物和探针,其特征在于,所述特异性引物为H3
‑
F和H3
‑
R,H3
‑
F的序列信息:5
’‑
CCTTTGCCATATCATGCTT
‑3’
(SEQ ID No.1),H3
‑
R的序列信息:5
’‑
AATGTTGCAYCTRATRTTGC
‑3’
(SEQ ID No.2);探针为H3
‑
P,H3
‑
P的序列信息:5
’‑
Texas Red
‑
TGGGCCTGCCAG
‑
MGB
‑3’
(SEQ ID No.3)。2.如权利要求1所述的检测H3亚型禽流感病毒的特异性引物和探针,其特征在于,H3
‑
P的5
’
端进行报告荧光染料Texas Red标记,3
’
端进行荧光淬灭基团MGB标记。3.一种H3亚型禽流感病毒检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1或2所述的特异性引物和探针。4.如权利要求3所述的H3亚型禽流感病毒检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求3所述的特异性引物和探针,浓度均为10微摩尔。5.如权利要求3所述的H3亚型禽流感病毒检测试剂盒,其特征在于,试剂盒包括一步法荧光定量PCR反应缓冲液12.5微升、一步法荧光定量PCR反应混合酶1.25微升、10微摩尔的H3
‑
F 0.5微升、10微摩尔的H3
‑
R 0.5微升、10微摩尔的...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴海波,杨帆,颜思静,姚航平,吴南屏,
申请(专利权)人:浙江大学医学院附属第一医院,
类型:发明
国别省市:
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