动物组织DNA提取方法技术

本发明专利技术公开一种操作简单，不但提取速度快，而且所提取的DNA纯度高的动物组织DNA提取方法，按如下步骤进行：取动物组织50mg，剪碎后置于匀浆器中，加入300μl匀浆液冰浴研磨；加入3μl?10mg/mlde蛋白酶K、15μl?10％SDS，混匀后于55℃水浴中置2～4小时至溶液呈透明粘稠状；加5M乙酸钾至终浓度1M，混匀，4℃放置30min；4℃，12000r/min离心10min；取上清液移至另一离心管中，加入二倍体积预冷的无水乙醇，4℃放置1h；4℃，12000r/min离心10min；弃上清，用预冷的70％乙醇洗涤沉淀2次后室温干燥，50μlTE溶解；向e步骤所得溶液中加入1/50体积的10mg/ml的RnaseA，37℃恒温1h。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
１．一种动物组织ＤＮＡ提取方法，其特征在于按如下步骤进行：ａ．取动物组织５０ｍｇ，剪碎后置于匀浆器中，加入３００μｌ匀浆液冰浴研磨，所述匀浆液为０．０６Ｍ　ＥＤＴＡ、０．１Ｍ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、０．１６Ｍ蔗糖、０．０８Ｍ　ＮａＣｌ；ｂ．加入３μｌ　１０ｍｇ／ｍｌｄｅ蛋白酶Ｋ、１５μｌ１０％ＳＤＳ，混匀后于５５℃水浴中置２～４小时至溶液呈透明粘稠状；ｃ．加５Ｍ乙酸钾至终浓度１Ｍ，混匀，４℃放置３０ｍｉｎ；ｄ．４℃，１２０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ；取上清液移至另一离心管中，加入二倍体积预冷的无水乙醇，４℃放置１ｈ；ｅ．４℃，１２０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ；弃上清，用预冷的７０％乙醇洗涤沉淀２次后室温干燥，５０μｌＴＥ溶解；ｆ．向ｅ步骤所得溶液中加入１／５０体积的１０ｍｇ／ｍｌ的ＲｎａｓｅＡ，３７℃恒温１ｈ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王伟，刘珊，石磊，
申请(专利权)人：大连海洋大学，
类型：发明
国别省市：91