【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子生物学领域中提取DNA的方法,尤其涉及一种提取莲细胞核DNA 的方法;具体涉及了一种以莲黄化苗叶片为材料、有效提取高质量莲细胞核DNA的方法。
技术介绍
莲,俗称荷花,是被子植物中起源最早的植物之一,素有“活化石”之称。它在我国的栽培历史悠久,是重要的水生经济作物,集食用、药用、观赏于一身。因莲具有独特的经济、文化和观赏价值,已引起了人们广泛的重视,但就分子生物技术在莲研究中的应用,目前主要集中在品种鉴定及演化关系分析、种质间遗传多样性评估等方面,还未开展深层次的莲基因组学研究。随着Illumina公司发布了新一代测序仪Genome Analyzer (Solexa产品系列)之后,Genome Analyzer作为新一代测序技术平台,具有通量高、单位成本低、测序周期短和操作简单等优点,是植物全基因组测序最经济有效的测序平台;但其对DNA质量有比较高的要求。DNA质量是基因组测序技术的基础,分离纯度高(少多糖、少多酚、少色素和蛋白质)、 叶绿体DNA和线粒体DNA含量低的核DNA,是测序仪高效和准确工作的基础,也是使测序序列达到最高可用性的保证。 ...
【技术保护点】
1.提取莲细胞核DNA的方法,其特征在于下列步骤:①称取20克黑暗条件下培养的剔除叶柄的莲黄化苗叶片,放置到经-20℃预冷5-6小时的研钵中,再倒入适量的液氮,经快速研磨后得到细粉状样品;②将细粉状样品转移至装有200毫升、4℃预冷1-2小时的细胞核提取缓冲液SolutionⅠ的烧杯中,并在冰上用磁力搅拌器搅拌20分钟,得搅拌混合液;③将搅拌混合液用两层纱布和两层Miracloth滤布过滤后,收集滤液,并转至50毫升离心管中,置于冷冻离心机上在4℃、1800 rpm离心20分钟,离心管内溶液上下分层,上层为溶液,下层为白色沉淀物,弃去上层溶液;④向白色沉淀物中加入40毫升S ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:杨美,刘艳玲,徐立铭,
申请(专利权)人:中国科学院武汉植物园,
类型:发明
国别省市:83
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