一种牛膝多糖的注射制剂及其制备方法技术

一种用于免疫调节的牛膝多糖的注射制剂，包括注射液和注射用冻干粉，是由牛膝的多糖部分提取物和注射用药用辅料组成的，其特征是分子量３０００－１００００之间的牛膝多糖占除辅料外总固形物的８０％以上。我们通过实验成功的制备了牛膝多糖的注射液和注射用牛膝多糖冻干粉针，发现了分子量范围在３０００－１００００的牛膝多糖是其主要有效成分，并且分子量分布５０００±５００的牛膝多糖生物活性更高。通过大量的试验筛选出牛膝多糖注射液的制备工艺，该工艺重现性好，制成的制剂稳定、质量可控。药理实验证明本发明专利技术制备的牛膝多糖注射制剂具有很好的免疫调节作用，尤其是对于放化疗肿瘤患者的免疫力低下有较好的治疗效果，并且无毒副作用。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于免疫调节的中药多糖注射制剂，特别是牛膝多糖的注射制剂及其制备方法。
技术介绍
现代医学、细胞生物学及分子生物学的发展，使人们认识到免疫系统的紊乱不仅会产生多种疾病，而且与人体衰老及老年人的多发病如肿瘤、高血压、糖尿病甚至精神病的发生均有密切关系。爱滋病(AIDS)的危害，使人们对免疫缺损的严重后果有了更深刻的认识，因此寻找具有良好免疫调节作用的药物已成为当代新药的发展方向之一。上个世纪80年代以来，科学家们对植物多糖，特别是对中药中的多糖研究产生了浓厚的兴趣。牛膝是我国传统常用中药，具有“强筋骨、治腰膝酸麻”功效的传统中药，而这些功效无不与免疫功能有关。现代研究表明，牛膝多糖具有显著的增强机体免疫功能的作用，它能升高血清溶血素和脾脏内抗体形成细胞数，提高血清免疫球蛋白IgG水平；能激活网状内皮系统的吞噬功能，激活巨噬细胞促进TNF和IL-2的生成；促进淋巴细胞增殖，增强NK细胞和CTL细胞的活性。临床预试验结果表明，牛膝多糖在体内具有CSF样作用，对治疗肿瘤患者因化疗和放疗引起的白细胞下降的有效率可达97％，并同时可恢复免疫系统的损伤。毒理试验表明，牛膝多糖几乎无毒性，最大耐受性试验一次剂量大于20g/kg(口服有效剂量为0.5g/kg)。大鼠以5g/kg的极限剂量连续灌胃喂养90d，其活动、耗食量、体重、血常规、血液生化、主要脏器重量以及病理切片等除白细胞明显升高外(升高值均在正常范围内)均无明显毒性反应。但是由传统中药利用现代技术手段开发新型药物一直是我们新药开发的方向，牛膝多糖虽然已经有了大量的报道，但是有关牛膝多糖注射液报道很少，虽然浙江京新药业有牛膝多糖注射液的申报，但是该药只是提取纯化了牛膝多糖极少的部分，存在着转移率低，药材浪费严重等问题。因此开发疗效确切并且能充分利用牛膝资源的牛膝注射制剂是很重要的。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种用于免疫调节的牛膝多糖的注射制剂，本专利技术的另一个目的是提供该注射制剂的制备方法。为了达到上述目的，我们提供一种用于免疫调节的牛膝多糖的注射制剂，包括注射液和注射用冻干粉，是由牛膝的多糖部分提取物和注射用药用辅料组成的，其中分子量3000-10000之间的牛膝多糖占除辅料外总固形物的80％以上。优选5000±500分子量的牛膝多糖占除辅料外总固形物的80％以上。所述的注射用药用辅料为调解等渗用的葡萄糖或氯化钠。我们还提供了该牛膝多糖注射制剂的制备方法，包括以下步骤1)处方量怀牛膝切段，加入8-12倍量去离子水提取两次，合并两次提取液浓缩至相对密度1.15-1.25(50℃)，加入95％药用乙醇调整乙醇浓度至75-85％，静置24-48小时；2)取所得沉淀挥干乙醇，加去离子水充分溶解，溶液至冷库中冷藏过夜后高速离心，溶液上预处理好的强极性大孔吸附树脂，1-2倍量床体积去离子水洗脱，流出液和洗脱液合并浓缩至原体积的一半；3)浓缩液先用截流分子量10000的超滤柱超滤，超滤液再用截流分子量3000的超滤柱超滤，收集3000分子量以上的部分，浓缩后干燥即得牛膝多糖；4)牛膝多糖溶解于注射用水中，加入相应的药用辅料，调节pH值至5.5-7.0，按该领域内常规工艺制成注射或注射用冻干粉即得。牛膝多糖注射液还可以以下面优选的方法制成，包括以下步骤1)处方量怀牛膝切段，加入10倍量去离子水提取两次，合并两次提取液浓缩至相对密度1.20-1.25(50℃)，加入95％药用乙醇调整乙醇浓度至80-85％，静置24-48小时；2)取所得沉淀挥干乙醇，加去离子水充分溶解，溶液至冷库中冷藏过夜后高速离心，溶液上预处理好的强极性大孔吸附树脂，1-2倍量床体积去离子水洗脱，流出液和洗脱液合并浓缩至原体积的一半；3)浓缩液先用截流分子量10000的超滤柱超滤，超滤液再用截流分子量3000的超滤柱超滤，收集3000分子量以上的部分，浓缩后干燥即得牛膝多糖；4)牛膝多糖溶解于注射用水中，加入0.9％的氯化钠，加入0.05％的土温-80，活性炭脱碳后灌装，灭菌即得。醇沉时更优选调节乙醇浓度至80-85％。强极性大孔吸附树脂可以是但不限于SA-1，SA-4，ADS-7，ADS-2，D380，或D201大孔吸附树脂，该类大孔吸附树脂均为苯乙烯二乙烯基苯骨架结构，有强极性基团的取代基。强极性大孔吸附树脂更优选ADS-7或ADS-2大孔吸附树脂。我们还提供了分子量分布在3000-10000之间牛膝多糖在制备抗肿瘤增强免疫力药物中的应用。提供了分子量分布在5000±500之间牛膝多糖在植被抗肿瘤增将免疫力药物中的应用。通过实验我们成功的制备了牛膝多糖的注射液，发现了分子量范围在3000-10000的牛膝多糖是其主要有效成分，并且分子量分布5000±500的牛膝多糖生物活性更高。通过大量的试验筛选出牛膝多糖注射制剂的制备工艺，该工艺重现性好，制成的制剂稳定、质量可控。药理实验证明本专利技术制备的牛膝多糖注射制剂具有很好的免疫调节作用，尤其是对于放化疗肿瘤患者的免疫力低下有较好的治疗效果，并且无毒副作用。具体实施例我们通过实施例进一步说明本专利技术实施例1牛膝多糖提取物的制备取怀牛膝5kg切段，加入10倍量去离子水提取两次，每次2小时，合并两次提取液浓缩至相对密度1.20-1.25(50℃)(实测值1.20)，加入95％药用乙醇调整乙醇浓度至80％，静置24小时；取所得沉淀挥干乙醇，加去离子水充分溶解，溶液至冷库中冷藏过夜后高速离心，溶液上预处理好的SA-1强极性大孔吸附树脂(天津市欧瑞生物科技有限公司)，2BV(床体积)去离子水洗脱，流出液和洗脱液合并浓缩至原体积的一半；浓缩液先用截流分子量10000的超滤柱超滤，超滤液再用截流分子量3000的超滤柱超滤，收集3000分子量以上的部分，浓缩后干燥即得牛膝多糖；批号TQW-1实施例2牛膝多糖提取物的制备取怀牛膝5kg切段，加入10倍量去离子水提取两次，每次2小时，合并两次提取液浓缩至相对密度1.20-1.25(50℃)(实测值1.23)，加入95％药用乙醇调整乙醇浓度至85％，静置24小时；取所得沉淀挥干乙醇，加去离子水充分溶解，溶液至冷库中冷藏过夜后高速离心，溶液上预处理好的ADS-2强极性大孔吸附树脂(天津市欧瑞生物科技有限公司)，1BV(床体积)去离子水洗脱，流出液和洗脱液合并浓缩至原体积的一半；浓缩液先用截流分子量10000的超滤柱超滤，超滤液再用截流分子量3000的超滤柱超滤，收集3000分子量以上的部分，浓缩后干燥即得牛膝多糖；批号TQW-2实施例3牛膝多糖提取物的制备取怀牛膝5kg切段，加入10倍量去离子水提取两次，每次2小时，合并两次提取液浓缩至相对密度1.20-1.25(50℃)(实测值1.25)，加入95％药用乙醇调整乙醇浓度至85％，静置48小时；取所得沉淀挥干乙醇，加去离子水充分溶解，溶液至冷库中冷藏过夜后高速离心，溶液上预处理好的ADS-7强极性大孔吸附树脂(天津市南开合成)，2BV(床体积)去离子水洗脱，流出液和洗脱液合并浓缩至原体积的一半；浓缩液先用截流分子量10000的超滤柱超滤，超滤液再用截流分子量3000的超滤柱超滤，收集3000分子量以上的部分，浓缩后干燥即得牛膝多糖；批号TQW-3实施例4注射用牛膝本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于免疫调节的牛膝多糖的注射制剂，包括注射液和注射用冻干粉，是由牛膝的多糖部分提取物和注射用药用辅料组成的，其中分子量３０００－１００００之间的牛膝多糖占除辅料外总固形物的８０％以上。

【技术特征摘要】
1.一种用于免疫调节的牛膝多糖的注射制剂，包括注射液和注射用冻干粉，是由牛膝的多糖部分提取物和注射用药用辅料组成的，其中分子量3000-10000之间的牛膝多糖占除辅料外总固形物的80％以上。2.如权力要求1所述的用于免疫调节的牛膝多糖的注射制剂，其特征是其中5000±500分子量的牛膝多糖占除辅料外总固形物的80％以上。3.如权力要求2所述的用于免疫调节的牛膝多糖的注射制剂，其特征是所述的注射用药用辅料为调节等渗的葡萄糖或氯化钠。4.一种用于免疫调节用的牛膝多糖注射制剂的制备方法，包括以下步骤1)处方量怀牛膝切段，加入8-12倍量去离子水提取两次，合并两次提取液浓缩至相对密度1.15-1.25(50℃)，加入95％药用乙醇调整乙醇浓度至75-85％，静置24-48小时；2)取所得沉淀挥干乙醇，加去离子水充分溶解，溶液至冷库中冷藏过夜后高速离心，溶液上预处理好得强极性大孔吸附树脂，1-2倍量床体积去离子水洗脱，流出液和洗脱液合并浓缩至原体积的一半；3)浓缩液先用截流分子量10000的超滤柱超滤，超滤液再用截流分子量3000的超滤柱超滤，收集3000分子量以上的部分，浓缩后干燥即得牛膝多糖；4)牛膝多糖溶解于注射用水中，加入相应的药用辅料，调节pH值至5.5-7.0，按该领域内常规工艺制成注射液或注射用冻干粉即得。5.如权力要求4所述的用于免疫调节的牛膝多糖注射制剂的制备方法，其特征是剂型为注射...

【专利技术属性】
技术研发人员：王伟，刘二伟，
申请(专利权)人：广东大光药业有限公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]