硒化香菇菌多糖及其制备方法和用途技术

本发明专利技术提供了硒化香菇菌多糖及其制备方法和用途。硒化香菇菌多糖用于抑制肿瘤的生长和转移。硒化香菇菌多糖的制备方法包括：将香菇菌多糖置于容器中；向容器中添加HNO3水溶液，加热搅拌；向容器中添加Na2SeO3和BaCl2，搅拌至全部溶解；反应之后用无水碳酸钠调节pH值，用无水硫酸钠沉淀反应液中的氯化钡；除去反应液中的沉淀，获得溶液a；对溶液a进行透析，得到透析液；减压蒸馏，得到固体；将固体用无水乙醇洗涤；减压蒸馏，得到硒化香菇菌多糖固体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及物质合成领域，更具体地，涉及硒化香菇菌多糖及其制备方法和用途。
技术介绍
香菇用于治疗疾病的记载可以追溯到清代，用于功能益气，助食及理小便失禁等。1969年，日本学者Chihara首次分离出香菇菌多糖，并发现其可以抑制S180肉瘤的生长。随后大量研究均揭示了香菇菌多糖广泛的药理作用。目前香菇菌多糖主要通过提高患者免疫力用于病毒性肝炎及晚期难治性肿瘤的辅助治疗(如胃癌、肝癌、肺癌及血液系统肿瘤)。香菇菌多糖(LentinusEdodesMyceliaPolysacharide)是从香菇菌丝体经深层液体培养后提取制得的，是由10个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物，化学成分为甘露聚糖肽。其多糖部分以甘露糖为主，含少量的葡萄糖，微量的岩藻糖，半乳糖，木糖，阿拉伯糖，而肽键是由天门冬氨酸、组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等18种氨基酸组成。然而，在临床香菇菌多糖一直作为免疫辅助性药物来治疗肿瘤，必须与化疗剂联合使用才可发挥减毒增效的作用，其本身并没有抗肿瘤活性。研究表明，无机硒-亚硒酸钠与某些抗肿瘤中药配伍对小鼠肝癌、艾氏腹水癌进行实验，结果表明，抑制作用明显，抑瘤率较高。但是，亚硒酸钠在体内具有蓄积毒性和致畸变作用，因此临床用药剂量无法量化控制。目前，香菇菌多糖在临床主要用于辅助治疗晚期胃癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌等，但是香菇菌多糖一直作为免疫辅助性药物来治疗肿瘤，必须与化疗剂联合使用才可发挥减毒增效的作用。香菇菌多糖主要起生物反应调节的作用，通过机体免疫调节机制发挥抗肿瘤、抗感染作用以及免疫增强作用。虽然香菇菌多糖能够通过机体的免疫调节机制发挥抗肿瘤作用，但是香菇菌多糖在体外不能使自然杀伤细胞激活，并且香菇菌多糖本身对肿瘤细胞没有直接杀伤作用。目前，临床研究证实了硒元素的抗癌活性，通常的无机硒化合物只在高剂量下才有抗癌效果，但高剂量补硒会造成较大毒副作用；由于无机硒的生理剂量与中毒剂量范围较窄，而且无机硒的不同摄入方式导致血硒水平的差异较大，导致临床用药剂量不可控制；此外，无机硒在体内具有蓄积毒性，还有致畸变的作用。在香菇菌多糖的结构改造，增强其本身的抗肿瘤活性方面鲜有报道，期待该领域中的改进。
技术实现思路
本专利技术提供了一种硒化香菇菌多糖的用途，所述硒化香菇菌多糖用于抑制肿瘤的生长和转移。在上述用途中，其中，所述肿瘤包括黑色素瘤和结肠瘤。在上述用途中，其中，所述硒化香菇菌多糖制备成用于抑制肿瘤生长和转移的药物。在上述用途中，其中，所述药物制备成片剂、胶囊、乳液、注射液或其他药学上可接受的制剂。本专利技术还提供了一种制备硒化香菇菌多糖的方法，包括：将香菇菌多糖置于容器中；向所述容器中添加HNO3水溶液，加热搅拌；向所述容器中添加Na2SeO3和BaCl2，搅拌至全部溶解；反应之后用无水碳酸钠调节pH值，用无水硫酸钠沉淀反应液中的氯化钡；除去所述反应液中的沉淀物，获得溶液a；对溶液a进行透析，得到透析液；减压蒸馏，得到固体；将所述固体用无水乙醇洗涤；减压蒸馏，得到硒化香菇菌多糖固体。在上述方法中，其中，所述HNO3水溶液中的HNO3的体积浓度为0.4％至0.6％。在上述方法中，其中，所述HNO3水溶液中的HNO3的体积浓度为0.5％。在上述方法中，其中，所述反应的温度控制在60℃至80℃。在上述方法中，其中，所述反应的温度为70℃。为了增强香菇菌多糖的抗肿瘤活性，提高生物利用度，我们利用无机补硒剂-亚硒酸钠对多糖进行化学修饰，合成具有良好生物活性和广泛用途的硒化香菇菌多糖，发挥硒化香菇菌多糖的抑制肿瘤生长的活性，尤其是针对黑色素瘤和结肠瘤，硒化香菇菌多糖具有活性强、毒性低、生物利用度高的优点，是一种安全、有效、健康的富硒化合物。硒化香菇菌多糖可广泛应用于生物医药、饲料添加剂、食品、保健营养品等领域，具有重要的理论意义和实际应用价值。附图说明图1-1和图1-2分别示出了香菇菌多糖和硒化香菇菌多糖的红外图谱。图1-3示出了香菇菌多糖(Len)和硒化香菇菌多糖(Se-Len)的TG-DTA热分析图谱；图2示出了硒化香菇菌多糖对不同细胞的生长抑制作用-IC50。图3-1和图3-2分别示出了香菇菌多糖、硒化香菇菌多糖作用后的B16-BL6黑色素移植瘤、裸鼠荷HCT-8移植瘤的尺寸变化。图3-3示出了不同浓度的香菇菌多糖和硒化香菇菌多糖作用后的B16-BL6黑色素移植瘤的肿瘤生长曲线。图3-4示出了香菇菌多糖、硒化香菇菌多糖和亚硒酸钠作用后的裸鼠HCT-8人结肠癌移植瘤的肿瘤生长曲线。图4-1示出了给药结束时B16-B16黑色素移植瘤小鼠的体重，*表示与对照组相比P<0.05；**表示与对照组相比P<0.01。图4-2示出了给药结束时HCT-8移植瘤裸鼠的体重，*表示与Na2SeO3组相比P<0.05。图5-1示出了B16-B16黑色素移植瘤小鼠的肺、肝脏的组织切片。图5-2示出了HCT-8移植瘤裸鼠的肺、肝脏的组织切片。具体实施方式下面的实施例可以使本领域技术人员更全面地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。硒化香菇菌多糖的制备本专利技术中所用原料为香菇中提取的香菇菌多糖，合成硒化香菇菌多糖包括以下步骤：(1)称取1.00g香菇菌多糖(由河南开封(集团)制药有限公司赠与)粉末，置于三口烧瓶中；(2)向三口烧瓶中加入体积分数为0.4％～0.6％的HNO3水溶液100mL，加热搅拌(800r/min)，直至香菇菌多糖溶解，温度控制在60～80℃；(3)向三口烧瓶中加入1.00gNa2SeO3和1.50gBaCl2，搅拌至全部溶解；(4)将三口烧瓶中的溶液温度控制在60～70℃，反应8-12小时；(5)反应结束后，冷却反应液，用无水碳酸钠粉末调节pH值至5～6，用无水硫酸钠沉淀反应液中的氯化钡；(6)过滤除去反应液中的沉淀，获得溶液a；(7)对溶液a对流去离子水透析；(8)用抗坏血酸Vc检测(通常情况下，亚硒酸钠与还原剂抗坏血酸反应生成红色的零价硒)透析程度，取不同时间段(6h、12h、18h、24h、48h)透析液少量，加入抗坏血酸Vc检测，无红色时，停止透析，得到最终的透析液。抗坏血酸Vc检测是众所周知的，在此不再详细介绍；(9)减压蒸馏，至干，得固体；(10)将步骤(9)所得固体用无水乙醇洗涤；(11)重复步骤(9)，收集反应所得的固体。合成产物表征电感耦合高频等离子光谱法(ICP-MS)测定硒含量0.02g硒化香菇菌多糖样品置于50ml锥形瓶中，加入混酸HClO4+H2SO4+HNO3(1:1:4(体积比))2ml，消化至溶液澄清时，冷却，转移到10ml容量瓶中，蒸馏水定容，ICP-MS测定硒含量。最终反应产物含硒量为12mg/g。红外光谱测定硒化香菇菌多糖的结构由图1-1和图1-2提供的红外图谱可知，在3500～3200cm-1为-OH的伸缩振动吸收峰，3200～2800cm-1为C-H的伸缩振动，1400～1000cm-1处有C-H的弯曲振动峰及C-O和C-C振动吸收峰，这些都是多糖的特征吸收峰。亚硒酸钠的红外光谱在743.46和453.85cm处有两个特征吸收峰，香菇菌多糖在此范围内无吸收。香菇菌多糖在硒化反应前后多糖分子的基本特征骨架保持本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种硒化香菇菌多糖的用途，所述硒化香菇菌多糖用于抑制肿瘤的生长和转移。

【技术特征摘要】
1.一种硒化香菇菌多糖的用途，所述硒化香菇菌多糖用于抑制肿瘤的生长和转移。2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述肿瘤包括黑色素瘤和结肠瘤。3.根据权利要求1所述的用途，其中，所述硒化香菇菌多糖制备成用于抑制肿瘤生长和转移的药物。4.根据权利要求3所述的用途，其中，所述药物制备成片剂、胶囊、乳液、注射液或其他药学上可接受的制剂。5.一种制备硒化香菇菌多糖的方法，包括：将香菇菌多糖置于容器中；向所述容器中添加HNO3水溶液，加热搅拌；向所述容器中添加Na2SeO3和BaCl2，搅拌至全部溶解；反应之后加...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨诚，孙涛，周红刚，刘艳荣，孙波，刘慧娟，陈双，朱国红，谷文光，闫雪琴，赵亚丽，肖婷，荆学双，张强，秦源，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：天津;12