一种植物肿节风有效部位总多酚及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种含有植物肿节风有效成分的药物，其特征在于所述的有效成分是肿节风有效部位总多酚以及有效单体成分咖啡酸３，４－二羟基苯乙酯。有效单体成分咖啡酸３，４－二羟基苯乙酯包括从肿节风和其它植物中提取分离纯化和通过化学合成而得。肿节风有效部位总多酚的制备和其有效单体成分咖啡酸３，４－二羟基苯乙酯的提取分离纯化方法包括不同浓度乙醇回流提取、不同浓度乙醇渗漉提取、水煎煮提取、正丁醇萃取、大孔吸附树脂柱层析、正相和反相硅胶柱层析。本发明专利技术可用于抗肿瘤、增效减毒、抗肿瘤放化疗的毒性反应及肿瘤辅助治疗，亦用于原发性血小板减少性紫癜及继发性血小板减少性紫癜，并可用于治疗常见细菌性感染。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物药物肿节风，更具体的说是肿节风有效部位和其有效成分单体及其由两者单独或分别与其它植物提取物或化合物混合制成的各种制剂及其制备方法和它们在抗肿瘤、抗肿瘤的增效减毒及抗血小板减少性紫癜、抗菌抗炎方面的应用。
技术介绍
肿节风(Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai)为金粟兰科草珊瑚属植物干燥全草，又名草珊瑚、九节茶、接骨木、驳骨茶、骨消风等。为多年生常绿草本，分布于江西、安徽、浙江、湖南、湖北、四川、广东、广西等省，江西省为主要产地。肿节风有活血祛瘀、止痛、清热解毒等功效。用于治疗常见炎症(包括咽喉炎、气管支气管炎、肺炎、角膜炎、蜂窝组织炎、阑尾炎)、风湿性关节炎。近代用于癌症辅助治疗。对多种恶性肿瘤如胃癌、胰腺癌、肝癌、食道癌、直肠癌等均有疗效。现有文献报道肿节风含黄酮类、香豆素、有机酸、挥发油、三萜，倍半萜类、酚类等多种成分。《中国药典》2000年版和2005年版收载了肿节风片、血康口服液、草珊瑚含片3个制剂。肿节风片(肿节风浸膏制成)用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎，并可用于癌症辅助治疗。血康口服液用于血小板紫癜，可升高血小板。草珊瑚含片用于咽喉炎。《卫生部药品标准》收载了肿节风注射液制剂。肿节风注射液同样用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎，癌症辅助治疗。这4个制剂均属于总提取物的粗制剂，不是有效部位和单体化合物的制剂，而且有效成分不明确。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服已有技术的不足，提供一种肿节风有效部位和其有效成分单体及其由两者单独或分别与其它植物提取物或化合物混合制成的各种制剂的抗肿瘤、抗肿瘤的增效减毒及抗血小板减少性紫癜、抗菌抗炎的应用。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为一种含有植物肿节风有效成分的药物，其特征在于所述的有效成分是肿节风有效部位总多酚；所述的有效成分是肿节风有效单体成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯。制备所述的肿节风有效部位总多酚包括如下步骤肿节风总提取物的提取 乙醇回流提取取肿节风药材粗粉，用35％～70％乙醇10～15倍量作溶剂，浸渍1小时后，加热回流提取3～4次，每次1～2小时，合并回流液，浓缩后得肿节风总提取物；或乙醇渗漉提取取肿节风药材粗粉，用35％～70％乙醇10～15倍量作溶剂，浸渍1小时后进行渗漉直到渗漉液无色，合并渗漉液，浓缩后得肿节风总提取物；或水煎煮提取取肿节风药材粗粉加10～15倍量水煎煮，每次1～2小时，滤过，滤液合并，浓缩后肿节风总提取物；肿节风有效部位总多酚的制备上述方法提取的肿节风总提取物溶解于水中，用正丁醇萃取，合并萃取液，浓缩后得正丁醇萃取物，正丁醇萃取物经大孔吸附树脂柱层析，先用水洗脱后再用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，减压浓缩后得浸膏。将浸膏溶解于少量25％乙醇中，经反相硅胶柱层析，先用水洗脱，后用10％乙醇洗脱，再用25％乙醇洗脱，收集25％乙醇洗脱液；浓缩和干燥肿节风总提取物和肿节风总多酚的浓缩方法可用薄膜浓缩或减压浓缩，干燥方法可用真空干燥或喷雾干燥或冷冻干燥，浓缩并干燥后得肿节风总多酚；制备所述的肿节风有效单体成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯包括如下步骤将肿节风总多酚溶解于少量25％乙醇中，经反相硅胶柱层析，先用水洗脱，后用25％乙醇洗脱，分段收集25％乙醇洗脱液，用高效液相色谱检测每个组分，将含有单一成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的组分合并，浓缩并干燥后得单体化合物咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯；或试药3，4-二羟基苯乙酸，咖啡酸，亚硫酰二氯，四氢铝化锂，二环己基碳二亚胺，无水甲醇，无水四氢呋喃，酒石酸，无水硫酸钠；方法3，4-二羟基苯乙醇的合成将3，4-二羟基苯乙酸溶于无水甲醇中，在0℃条件下逐滴加入亚硫酰二氯并搅拌15分钟后，于室温下放置16小时并不停搅拌；反应物经减压浓缩后，其残留物溶于无水四氢呋喃中，分部加入四氢铝化锂后，于室温下放置16小时并不停搅拌；反应物倒入5％酒石酸溶液中，用乙酸乙酯萃取。合并后的乙酸乙酯萃取液经无水硫酸钠脱水后回收乙酸乙酯得到乙酸乙酯萃取物；乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析，用环己烷和乙酸溶解于无水四氢呋喃中，然后加入二环己基碳二亚胺；其混合物在室温下搅拌8小时，加乙酯的混合溶液作洗脱液，分段收集洗脱液，用薄层层析(TLC)在紫外灯下检测每一组分，将含有3，4二羟基苯乙醇的洗脱液合并后回收有机溶剂得到3，4-二羟基苯乙醇；咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的合成将咖啡酸和3，4-二羟基苯乙醇入微量蒸馏水继续搅拌15分钟。滤过，滤液在60℃下减压浓缩得棕色稠状溶液；该棕色稠状溶液经硅胶柱层析，用乙酸乙酯和乙醇的混合溶液作洗脱液，分段收集洗脱液，用TLC在紫外灯下检测各组分，将含有咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的各组分合并后回收有机溶剂得单体化合物咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯。制备的肿节风总多酚纯度大于50％(50％-90％)，有效单体成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯纯度大于80％(80％-100％)，从其他植物或化学合成方法得到咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯纯度大于80％(80％-100％)。制成的制剂包括片剂口服片、含片、咀嚼片，丸剂、滴丸、胶囊、软胶囊、颗粒、泡腾剂、针剂小针剂、大针剂、粉针剂、乳剂、混悬液，口服液、糖浆、乳剂、合剂、缓释剂、控释剂、靶向制剂。含有植物肿节风有效成分的药物，应用于抗肿瘤；抗肿瘤增效；降低由放射、化学治疗肿瘤所引起的毒性反应如白细胞下降及血小板减少；抗菌抗炎。由于本专利技术采取了上述的技术措施，它与现有技术相比具有如下优点本专利技术用多种动物实验证明肿节风抗肿瘤及增效减毒作用的有效部位为多酚类化合物，并发现其主要的有效成分为咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯。肿节风有效部位总多酚的上述作用优于目前市售的肿节风注射液、肿节风片和血康口服液粗制剂。本专利技术用体外培养肿瘤细胞生长抑制作用实验证明肿节风总多酚和其有效单体成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯对多种肿瘤细胞生长具有明显抑制作用，且单体成分的作用明显优于总多酚。本专利技术建立的提取分离纯化方法可制备其纯度大于50％(50～90％)的肿节风总多酚和纯度大于90％(90～98％)的单体成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯以及纯度大于98％的对照品咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯。而且纯度大于90％的单体成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯还可通过化学合成而获得。本专利技术为将肿节风开发成有效成分明确、纯度更高、疗效更好、毒副作用更少、质量可控的各种制剂提供了科学依据。附图说明图1是肿节风有效部位总多酚的高效液相色谱图；图2是咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的结构示意图；图3是咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的H-C远程偶合关系示意图；图4是咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的高效液相色谱图；图5是咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的化学合成流程图；图6是肿节风总多酚和咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的制备工艺流程图。具体实施例方式以下结合附图对本专利技术作进一步详细描述。一、肿节风有效部位总多酚的制备及含量测定(一)肿节风总提取物的提取1、乙醇回流提取取肿节风药材粗粉，用35％～70％乙醇10～15倍量作溶剂，浸渍1小时后，加热回流提取3～4次，每次1～2小时，合并回流液，浓缩后得肿节风总提取物。2、乙醇渗漉提取取肿节风药材粗粉，用35％～70％乙醇10～15倍量作溶剂，浸渍1小时后本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有植物肿节风有效成分的药物，其特征在于所述的有效成分是肿节风有效部位总多酚。

【技术特征摘要】
1.一种含有植物肿节风有效成分的药物，其特征在于所述的有效成分是肿节风有效部位总多酚。2.根据权利要求1所述的含有植物肿节风有效成分的药物，其特征在于所述的有效成分是肿节风有效单体成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯。3.根据权利要求1所述的含有植物肿节风有效成分的药物的制备方法，其特征在于制备所述的肿节风有效部位总多酚包括如下步骤肿节风总提取物的提取乙醇回流提取取肿节风药材粗粉，用35％～70％乙醇10～15倍量作溶剂，浸渍1小时后，加热回流提取3～4次，每次1～2小时，合并回流液，浓缩后得肿节风总提取物；或乙醇渗漉提取取肿节风药材粗粉，用35％～70％乙醇10～15倍量作溶剂，浸渍1小时后进行渗漉直到渗漉液无色，合并渗漉液，浓缩后得肿节风总提取物；或水煎煮提取取肿节风药材粗粉加10～15倍量水煎煮，每次1～2小时，滤过，滤液合并，浓缩后肿节风总提取物；肿节风有效部位总多酚的制备上述方法提取的肿节风总提取物溶解于水中，用正丁醇萃取，合并萃取液，浓缩后得正丁醇萃取物，正丁醇萃取物经大孔吸附树脂柱层析，先用水洗脱后再用40％乙醇洗脱，收集40％乙醇洗脱液，减压浓缩后得浸膏。将浸膏溶解于少量25％乙醇中，经反相硅胶柱层析，先用水洗脱，后用10％乙醇洗脱，再用25％乙醇洗脱，收集25％乙醇洗脱液；浓缩和干燥肿节风总提取物和肿节风总多酚的浓缩方法可用薄膜浓缩或减压浓缩，干燥方法可用真空干燥或喷雾干燥或冷冻干燥，浓缩并干燥后得肿节风总多酚；制备所述的肿节风有效单体成分咖啡酸3，4～二羟基苯乙酯包括如下步骤将肿节风总多酚溶解于少量25％乙醇中，经反相硅胶柱层析，先用水洗脱，后用25％乙醇洗脱，分段收集25％乙醇洗脱液，用高效液相色谱检测每个组分，将含有单一成分咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的组分合并，浓缩并干燥后得单体化合物咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯；或试药3，4-二羟基苯乙酸，咖啡酸，亚硫酰二氯，四氢铝化锂，二环己基碳二亚胺，无水甲醇，无水四氢呋喃，酒石酸，无水硫酸钠；方法3，4-二羟基苯乙醇的合成将3，4-二羟基苯乙酸溶于无水甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：连晓媛，张治针，
申请(专利权)人：连晓媛，
类型：发明
国别省市：36[中国|江西]