一种适用于多糖多酚植物组织高质量RNA快速提取方法技术

本发明专利技术公开了一种适用于多糖多酚植物组织的高质量RNA快速提取方法，具体步骤为：65℃预热裂解液，加入液氮粉碎后的植物组织，振荡混匀后加入氯仿∶异戊醇(24∶1)抽提；加入沉淀液到上清，离心弃上清；加重悬液重悬沉淀，分别以水饱和酚(pH＜5.0)和氯仿∶异戊醇(24∶1)抽提，离心取上清；加入无水乙醇沉淀，沉淀物以75％乙醇洗涤，风干，RNase?free?H2O溶解。本发明专利技术的有益效果在于：1、可从富含多糖、多酚及次生代谢物的植物组织中成功提取高质量RNA；2、操作时间短；3、无DNA污染。本发明专利技术中采用的裂解液主要成分为：CTAB、Tris-HCl、LiCl、EDTA、NaCl、PVP40；沉淀液的主要成分为：LICl；重悬液的主要成分为：NaCl。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及从植物组织中的快速提取高质量的RNA，特别是从多糖多酚的植物组织包括植物的果实中提取高质量RNA的试剂及方法。
技术介绍
富含多糖、多酚及次生代谢物的植物组织高质量RNA的提取较为困难，目前一般采用冷酚法、热酚法以及LiCl沉淀法。冷酚法步骤较多，整个过程需要保持低温状态；而LiCl沉淀法需沉淀过夜，耗时长、效率低。因此，找到一种适用于富含多糖、多酚及次生代谢物的植物组织高质量RNA快速提取的方法可以为开展此类植物分子生物学的研究奠定良好的基础。一些商品化的试剂盒大都是采用TRIZOL法，无法从富含多糖、多酚及次生代谢物的植物组织中获得高质量的RNA。有部分针对富含多糖、多酚植物组织RNA提取的专门试剂，但适用性不广，提取的RNA有基因组DNA污染，效果不甚理想。本专利技术的目的是克服现有从富含多糖、多酚及次生代谢物的植物组织中提取RNA方法的不足，提供一种新的提取方法高效、快速地从富含多糖、多酚及次生代谢物的植物组织中分离高质量RNA的方法。使用本专利技术提取的植物组织RNA质量高，适用于下游与基因表达有关的分子生物学实验，但在提取过程中，5S RNA丢失，所以本专本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：彭明，阮孟斌，李文彬，于晓玲，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：