基因制剂制造技术

一种含有所需基因的基因制剂，其中将所述基因，或插入了所述基因的载体混合进由生物相容性材料制成的载体中。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物领域，特别是基因治疗领域。更具体地讲，本专利技术涉及一种含有基因的制剂。在施用于活体以后，该制剂可稳定地保持基因载体或基因，将其逐渐释出并在长时期内维持治疗效果。该制剂可以在有利时间内中止治疗。
技术介绍
基因治疗是一个活跃的研究领域，而且对成功治疗方法的期望极高。在基因本身作为药品的基因疗法中，对疾病的治疗是通过将选定的酶、细胞因子之类的基因转移到患者的细胞内而进行的。然后所导入的基因在患者体内产生特定物质。这种基因疗法可分成两类。第一类的用意是通过将特定基因整合到患者的基因组内而对该基因进行半永久性表达。另一类的用意是瞬时表达一种基因而不期望该基因整合到基因组中。在后一种类型的基因疗法中，通常将利用腺病毒之类的方法，来将编码能增强抗癌细胞的抗癌免疫力的细胞因子之类的基因转移到患者体内(Cardiovascular Research，28,445(1994)；Science，256，808(1992)；Gastroenterology，106，1076(1994)；TIBTECH，11，182(1993)；J.Biol.Chem.，266，3361(1991)；Nature Medicine，1，583(1995)；并将其收作参考文献)。在利用病毒载体的情况下，尽管基因转移的效率通常很高，但由于免疫反应而使反复施药变得很困难(J.Biol.Chem，269，13695(1994)，Am.J.Respir.Cell Mol.，10,369(1994))。在J.Controlled Release 33.,307-315(1995)等文献中披露了一种用胶原来逐步释放含有有机化合物或蛋白制剂的药物之制剂。不过，当所披露的和常见的药物(例如，蛋白类药物、化学合成的药物等)保持在胶原凝胶等物质中时，它会在大约1-2天内溶解。在一种目前被用于基因治疗的方法中，包括施用一种基因载体(插入了基因的载体)或直接用基因，该基因载体或基因在施用后马上接触细胞，并在基因转移开始和结束后马上开始。另外，转导到细胞中的基因随着细胞分裂而被稀释(即其拷贝数减少)，或是通过在细胞中降解而减少。因此，转移基因的表达仅能维持几周时间，这段时间对于实施充分治疗来说太短了，这是该方法的缺陷之一。因此，必需反复施用一种基因载体或基因。因而本专利技术的一个目的是克服上述缺陷，并提供一种能逐步释放一种基因载体或基因，并可以将治疗效果维持很长时间的制剂。另外，希望一种能够反复施用的方法，因为这类方法在利用病毒载体之类的基因治疗中是难于实施的。因此，本专利技术的第二个目的是提供一种能够在利用病毒载体之类的基因治疗中反复施用的基因制剂。另外，希望基因在体内的表达能被随时中止，以确保安全，因为基因能表达几周时间这长于蛋白制剂的有效期。因此，本专利技术的第三个目的是提供一种基因制剂，当希望中止治疗时，该制剂能够迅速中止基因转移。专利技术概述本专利技术人且已检验了各种制剂逐步释放基因载体或基因的能力，并且已发现，当这样一种制剂-其中，一种基因或插入了基因的载体被混入一种由生物相容性材料制成的载体中-被用于活体内时，该基因出乎预料的可表达很多个月的时间。本专利技术人还发现，该制剂可以反复用于活体内，并由此完成了本专利技术。因此，本专利技术具有以下特征。(1)一种含有基因的基因制剂，其中，将所述基因或插入了该基因的载体混入一种由生物相容性材料制成的载体中。(2)如(1)所述的基因制剂，其中，所述生物相容性材料选自胶原、明胶、血纤蛋白、白蛋白、透明质酸、肝素、硫酸软骨素、壳多糖、乙酰壳多糖、藻酸、果胶、琼脂糖、羟基磷灰石、聚丙烯、聚乙烯、聚二甲基硅氧烷，乙醇酸、乳酸或氨基酸的聚合物或共聚物，上述生物相容性材料中至少两种的混合物。(3)一种含有基因的基因制剂，其中，所述基因或插入了该基因的载体被混入由含有胶原的生物相容性材料制成的载体中。(4)一种含有基因的基因制剂，其中，所述基因或插入了该基因的载体被混入由胶原制成的载体中。(5)如上述(1)的基因制剂，其中，当用于活体内时，所述基因制剂中生物相容性材料的含量为0.01-30w/w％。(6)如上述(1)的基因制剂，其为溶液、悬浮液、含水凝胶、薄膜、海绵状物、棒状或球状形式。(7)如上述(1)的基因制剂，其中，所述载体选自病毒载体、脂质体载体和融合脂质体载体，该融合脂质体载体融合了一种病毒和一种脂质体。(8)如上述(1)的基因制剂，其中，所述载体是病毒载体。(9)如上述(1)的基因制剂，其中，所述载体是一种腺病毒载体。(10)一种含有基因的基因制剂，其中，将所述基因或插入了该基因的载体混入由生物相容性材料制成的载体中，此载体材料装在容器中，所述基因载体或基因可透过该容器。附图简介附图说明图1表示试验例1和比较例1中血小板数的时程曲线。图2表示试验例1和比较例1的外周血中的HST-1时程曲线。图3表示试验例4和比较例1中血小板数的时程曲线。图4是试验例5中血小板数的时程曲线。图5表示试验例6中胶原对外周血中HST-1数的剂量依赖性。图6表示试验例7和比较例2中血小板数的时程曲线。专利技术详述下面将对本专利技术做更详细地说明。“用于基因插入的载体”可以是任何可将基因转移到细胞中的任何载体，例如，可包括病毒载体、脂质体载体、融合脂质体等，该融合脂质体中融合了一种病毒和脂质体(Cardiovascular Research，28，445(1994)；Science，256，808(1992)；Gastroenterology，106，1076(1994)；TIBTECH，11，182(1993)；J.Biol Chem.，266，3361(1991)；Nature Medicine，1，583(1995)；这些文献被收作本文参考资料)。病毒载体可以是任何能在基因治疗中作为普通载体使用的载体，例如，包括腺病毒、腺共生病毒、牛痘病毒、逆转录病毒、HIV病毒或疱疹病毒等。可以用常规方法，例如，披露于上述参考文献中的方法，直接将用于转移的基因插入病毒载体中而获得所述基因载体。脂质体载体可以是任何能在基因治疗中作为普通脂质体载体使用的载体，例如，包括通过混合DOTMA、DOPE、DOGS等而获得的脂质体载体。当采用阳离子型脂质体载体时，向细胞中转移的效率很高。其中融合了病毒和脂质体的融合脂质体载体的例子，包括融合了仙台病毒(HVJ日本血凝病毒)和脂质体的融合脂质体病毒等。可以用常规方法，例如，披露于上述文献中的方法，将用于转移的基因包装于脂质体载体或融合脂质体中而获得基因载体。被包装的基因可以是任何能在活体内表达该基因的形式，优选在活体内稳定的形式，如质粒等。可将基因本身保持在本专利技术的基因制剂中，而不必插入能将基因转入细胞的“用于基因插入的载体”中。在这种情况下，基因的形式可以是能在活体内表达该基因的任何形式。例如，可将基因插入被称作表达载体之类的物质中。基因的形式优选在活体内稳定的形式，如质粒等。用于转移的“基因”可以是能用于基因治疗的任何基因，例如，包括腺苷脱氨酶基因、GM-CSF基因、胸苷激酶基因等。“生物相容性材料”优选具有高生物相容性并可将基因或基因载体稳定保持在活体内的材料。生物相容性材料的例子包括胶原、明胶、血纤蛋白、白蛋白、透本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：寺田雅昭，落谷孝广，宫田晖夫，伊藤博，
申请(专利权)人：株式会社高研，住友制药株式会社，
类型：发明
国别省市：