诱导细胞凋亡的物质制造技术

＊＊＊ 一种用下述结构式表示的诱导细胞凋亡的物质。含所述物质，用于抗癌剂的药物组合物。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
诱导细胞凋亡的物质
本专利技术涉及用于药物领域的诱导细胞凋亡的物质，其具有如抗癌作用的生理活性，并用于此领域。先有技术近些年，提出了一种与细胞组织死亡有关的细胞凋亡模型。不象坏死是细胞病理死亡，细胞凋亡是细胞基因本身原始编程的死亡。因此，起细胞凋亡作用的基因被一定的外因或内因激活，在所述基因作用下，程序死亡蛋白生长，于是细胞本身由于程序死亡蛋白的形成而分解和死亡。如果这种细胞凋亡能在所希望的组织或细胞中表达，从自然状态的活体中排除不必要的和有害细胞将成为可能，并且意义非凡。专利技术所解决课题用于临床治疗的药物包括很多制剂，如抗癌剂(如烷化剂、代谢拮抗剂和植物生物碱)、抗生素、免疫强化剂、免疫调节剂等。但很难说这些药物已完全建立起来。本专利技术的一个目的是发展具有生理功能如诱导细胞凋亡作用的高度安全的物质，以及提供制备该物质的方法和含该物质的药物。解决课题的手段以下概述本专利技术。首先，本专利技术的第一部分涉及由以下式[Ⅰ]～[Ⅷ]的诱导细胞凋亡的物质或其光学活性体或其盐。-->(式[Ⅲ]中，R1是H、氨基、低级烷基或在氨基酸有取代基的低级烷基；R2是从氨基酸中去掉参与肽键的氨基和羧基之后的二价残基；X是0-或氨基；Yk-是k价阴离子；m是0-4的整数；n是0或正整数；k是正整数；当n为2或大于2时，两个或两个以上的R2可以是相同或不同，当X是0-时，该物质是内盐，Yk-不存在。)-->(式[Ⅵ]中，R3和R4可以是相同或不同，分别为含1-3个碳的烷基。)(式[Ⅶ]中，R5和R6可以是相同或不同，分别为芳香氨基酸的芳香环。)-->另外，本专利技术的第二部分涉及药物组合物，其特征在于含本专利技术的第一部分涉的诱导细胞凋亡的物质或其光学活性体或其盐。在本专利技术的第二部分中的优选实施方案中，所述的药物组合物是一种抗癌剂。附图简述附图1为咪唑基环戊烯酮的HPLC反相洗提图。附图2为咪唑基环戊烯酮的质谱图。附图3为咪唑基环戊烯酮的1H-NMR谱图。附图4为咪唑基环戊烯酮的13C-NMR谱图。附图5为咪唑基环戊烯酮的UV吸收谱图。附图6为咪唑基环戊烯酮的IR吸收谱图。附图7为反相HPLC的保留时间与210nm处吸光度的关系。附图8为三羟基苯基乙酰胺的质谱图。附图9为三羟基苯基乙酰胺的1H-NMR谱图。附图10为三羟基苯基乙酰胺的13C-NMR谱图。附图11为三羟基苯基乙酰胺的IR吸收谱图。附图12为B-UG的反相HPLC洗脱时间与215nm处吸收的关系。附图13为B-UG的质谱图。附图14为B-UG的1H-NMR谱图。附图15为B-UG的13C-NMR谱图。附图16为B-UG的UV吸收谱图。附图17为B-UG的IR吸收谱图。-->附图18为MC2的质谱图。附图19为MC2的1H-NMR谱图。附图20为MC2的13C-NMR谱图。附图21为MC2的UV吸收谱图。附图22为MC2的IR吸收谱图。附图23为HMC2的1H-NMR谱图。附图24为HMC2的13C-NMR谱图。附图25为S-1127的反相HPLC洗脱时间与215nm处吸收的关系。附图26为S-1127的质谱图。附图27为S-1127的1H-NMR谱图。附图28为S-1127的13C-NMR谱图。附图29为S-1127的UV吸收谱图。附图30为S-1127的IR吸收谱图。附图31为培养时间和细胞生存数的关系。附图32为tCD的洗脱时间与215nm处吸收的关系。附图33为LCD1的质谱图。附图34为LCD1的1H-NMR谱图。附图35为LCD1的13C-NMR谱图。附图36为LCD1的UV吸收谱图。附图37为LCD1的IR吸收谱图。附图38为LCD2的质谱图。附图39为LCD2的1H-NMR谱图。专利技术的实施方案以下将对本专利技术进行具体描述。首先，本专利技术人发现式[Ⅰ]表示的2-羟基-4-(1-咪唑基)-2-环戊烯基-1-酮(以下称为“咪唑基环戊烯酮”)可由式[Ⅸ]表示的4，5-二羟基-2-环戊烯基-1-酮(以下称为“环戊烯酮”)与咪唑反应制备。所述咪唑基环戊烯酮具有诱导细胞凋亡作用和强的抑制癌细胞生长活性。-->本专利技术提供了一种式[Ⅰ]表示的2-羟基-4-(1-咪唑基)-2-环戊烯基-1-酮、其光学活性体或其盐的制备方法，其特征在于由式[Ⅸ]表示的环戊烯酮、其光学活性体或其盐与咪唑反应制备。用于本专利技术的式[Ⅸ]表示的环戊烯酮可通过本专利技术公开的方法或一种化学合成方法[《碳水化合物研究》Carbohydrate Research，247卷，217-222页(1993)；《瑞士化学学报》Helvetica Chimica Acta，55卷，2838-2844页(1972)]制备。此外，由热处理选自糖醛酸、糖醛酸衍生物、含糖醛酸的糖类化合物、含糖醛酸衍生物的糖类化合物、含含糖醛酸糖类化合物的物质、含含糖醛酸衍生物糖类化合物的物质[见日本癌症学会第56届年会论文集，599页(1997)和PCT／JP97／03052说明书]。本专利技术中，热处理物质，制备的化合物和其纯化产物也可使用。含糖醛酸和／或糖醛酸衍生物的糖类化合物的多糖可通过已知的化学、酶或物理方法制备。例如，可用商品果胶或藻酸。用合成方法合成的糖醛酸、糖醛酸衍生物、寡糖等也可用于本专利技术。例如，当D-葡糖醛酸作为糖醛酸使用时，其1％的溶液于121℃加热4小时，经该热处理过程得到[Ⅸ]表示的环戊烯酮。由该热处理过程得到的环戊烯酮用溶剂提取，浓缩提取液。接着，该浓缩提取液用硅胶柱层析分离，浓缩洗脱的环戊烯酮流分，用氯仿从浓缩液中提取环戊烯酮，提取浓缩液注入正相柱层析，分离出热处理生成的环戊烯酮。对分离的环戊烯酮光学拆分，得到(-)-4，5-二羟基-2-环戊烯基-1-酮和(+)-4，5-二羟基-2-环戊烯基-1-酮。不必说由合成方法得到的环戊烯酮也可以进行光学拆分。-->光学活性体的分离可通过使外消旋混合物进行机械拆分，优选结晶，通过结晶拆分成非对映异构体或包和物，通过酶或微生物进行动态拆分，通过色谱进行拆分等。色谱拆分可用气相色谱、液相色谱、薄层层析等，可使用对它们分别适用的手性固定相。用液相色谱进行光学拆分，可采用使用手性固定相的方法、使用手性洗脱液的方法、分离非对映异构体等方法。手性固定性如酰胺型、脲型、配位体交换型固定相、多糖-多糖衍生物固定相、蛋白质固定相、聚甲基丙烯酸酯固定相、聚甲基丙烯酰胺固定相等均可用作手性固定相。对于洗脱液，己烷型、醇型、含水(缓冲液)型均适合与上述固定相配合使用。例如，将环戊烯酮溶于乙醇。在此乙醇溶液中加己烷／乙醇(94／6)制成环戊烯酮溶液。将此样品溶液注入装有Chiral Pack AS(由DaicelChemical Industries制造)的HPLC，柱温40℃，流动相己烷／乙醇(94／6)，环戊烯酮可被光学拆分。HPLC光学拆分条件。柱：Chiral Pack AS(由Daicel Chemical Industries制造)2．0cm×25．0cm流动相：己烷／乙醇(94／6)流速：14．0毫升／分检测：UV 210 nm样品注射量：150 μl(2．55mg)光学拆分的(-)-反-4，5-二羟基-2-环戊烯基-1-酮(以下称为(-)-环戊烯基酮)的旋光度为[α]D20-105°(c0本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于诱导细胞凋亡，分别由以下式［Ⅰ］～［Ⅷ］表示的物质或其光学活性体或其盐，＊＊＊式［Ⅲ］中，Ｒ↓［１］是Ｈ、氨基、低级烷基或在氨基酸有取代基的低级烷基；Ｒ↓［２］是从氨基酸中去掉参与肽键的氨基和羧基之后的二价残基；Ｘ是Ｏ↑［－ ］或氨基；Ｙ↑［ｋ－］是ｋ价阴离子；ｍ是０－４的整数；ｎ是０或正整数；ｋ是正整数；当ｎ为２或大于２时，两个或两个以上的Ｒ↓［２］可以是相同或不同，当Ｘ是Ｏ↑［－］时，该物质是内盐，Ｙ↑［ｋ－］不存在，＊＊＊式［Ⅵ］中，Ｒ↓［３］和Ｒ ↓［４］可以相同或不同，分别是含１－３个碳原子的烷基，Ｒ↓［５］－ＣＨ↓［２］－ＣＨ＝＊＊＊ ［Ⅶ］式［Ⅶ］中，Ｒ↓［５］和Ｒ↓［６］可以相同或不同，分别是芳香氨基酸的芳香环。＊＊＊ ［Ⅷ］。

【技术特征摘要】
JP 1998-1-14 17660/98;JP 1997-12-11 361644/97;JP 11．一种用于诱导细胞凋亡，分别由以下式[Ⅰ]～[Ⅷ]表示的物质或其光学活性体或其盐，式[Ⅲ]中，R1是H、氨基、低级烷基或在氨基酸有取代基的低级烷基；R2是从氨基酸中去掉参与肽键的氨基和羧基之后的二价残基；X是0-或氨基；Yk-是k...

【专利技术属性】
技术研发人员：榎竜嗣，小山信人，猪饲胜重，加藤郁之进，
申请(专利权)人：宝酒造株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]